高圧凍結技法による胃酸分泌関連蛋白と細胞膜動態に関する超微形態研究

• 研究課題/領域番号: 23590238
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 解剖学一般(含組織学・発生学)
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 澤口 朗 宮崎大学, 医学部, 教授 (30336292)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円); 2013年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2012年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2011年度: 2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
• キーワード: 高圧凍結技法 / 胃粘膜 / 胃酸分泌 / 壁細胞 / 超微形態 / 細胞膜動態 / 免疫組織化学 / 蛋白局在 / TRIM50蛋白

研究概要

ラットに摂食刺激を加えた胃酸分泌期と、胃酸分泌抑制剤を投与した胃酸分泌休止期における胃底腺壁細胞の細胞膜 動態について、高圧凍結技法により作製した電子顕微鏡観察試料をもとに超微形態学的解析を加えた。特に、細胞膜動態に関わる膜融合蛋白やKCNQ1等のイオンチャネルの胃酸分泌期と休止期における細胞内局在について、電顕レベルに及ぶ詳細な免疫組織化学的解析を行ない、当該研究分野における形態学的基盤となる新たな知見を得た。さらに、胃底腺壁細胞の細胞膜動態に関わるTRIM50の細胞内局在変化を探索し、TRIM50KOマウスにおける機能形態解析について、電子顕微鏡レベルの詳細な解析を行い、論文報告した。

研究成果

• [雑誌論文] 樹脂包埋補助ツールを用いたピンポイント電顕試料作製法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 髙橋伸育、豊嶋典世、澤口朗
  • 雑誌名: 顕微鏡 巻: 48(2) ページ: 113-117
• [雑誌論文] 超微形態と生体物質の保存に優れた加圧凍結技法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 澤口朗
  • 雑誌名: Plant Morphology 巻: 25 ページ: 7-10
  • NAID: 130004691678
• [雑誌論文] TRIM50 regulates vesicular trafficking for acid secretion in gastric parietal cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishi, M., Aoyama, F., Kisa, F., Zhu, H., Sun, M., Lin, P., Ohta, H., Van, B., Yamamoto, S., Kakizawa, S., Sakai, H., Ma, J., Sawaguchi, A., Takeshima, H
  • 雑誌名: J of Biol Chem 巻: 287(40) ページ: 33523-32
  • 査読あり
• [雑誌論文] TRIM50 regulates vesicular trafficking for acid secretion in gastric parietal cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nishi, M., Aoyama, F., Kisa, F., Zhu, H., Sun, M., Lin, P., Ohta, H., Van, B., Yamamoto, S., Kakizawa, S., Sakai, H., Ma, J., Sawaguchi, A., Takeshima, H.
  • 雑誌名: Journal of Biological Chemistry 巻: 287 ページ: 33523-33532
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional transformation of gastric parietal cells and intracellular trafficking of ion channels/transporters in the apical canalicular membrane associated with acid secretion (2011)
  • 著者名/発表者名: Aoyama, F., Sawaguchi, A
  • 雑誌名: Biol Pharm Bull 巻: 34 ページ: 813-816
  • NAID: 130000738054
• [雑誌論文] Functional transformation of gastric parietal cells and intracellular trafficking of ion channels/transporters in the apical canalicular membrane associated with acid secretion. (2011)
  • 著者名/発表者名: Aoyama, F., Sawaguchi, A.
  • 雑誌名: Biol Pharm Bull 巻: 34 ページ: 813-816
  • NAID: 130000738054
• [学会発表] 胃酸分泌後壁細胞のプロトンポンプ回収機構におけるオートファジーの関与 (2013)
  • 著者名/発表者名: 澤口朗, 青山典世, 高橋伸育
  • 学会等名: 第45回日本臨床分子形態学会総会・学術集会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2013-09-14
• [学会発表] 胃酸分泌後壁細胞のプロトンポンプ回収機構におけるオートファジーの関与 (2013)
  • 著者名/発表者名: 澤口 朗, 青山典世, 高橋伸育
  • 学会等名: 第45回臨床分子形態学会総会・学術集会
  • 発表場所: 福岡県福岡市
• [学会発表] ラット単離胃粘膜モデルで見い出されたオートファジーを介する胃小窩壁細胞剥離現象の凍結技法を応用した機能形態解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 豊嶋典世、髙橋伸育、井手惣幸、澤口朗
  • 学会等名: 第68回日本解剖学会九州支部学術集会
  • 発表場所: 久留米
  • 年月日: 2012-10-13
• [学会発表] 加圧凍結技法の基礎と応用の歴史 (2012)
  • 著者名/発表者名: 澤口朗
  • 学会等名: 日本植物学会第76回大会
  • 発表場所: 姫路
  • 年月日: 2012-09-15
• [学会発表] Autophagic degeneration and subsequent exfoliation of gastric pit-parietal cells into the gastric lumen associated with a stimulation of acid-secretion : an in vitro study observed in isolated rat gastric mucosa model (2012)
  • 著者名/発表者名: Aoyama, F., Takahashi, N., Ide, S., Sawaguchi, A
  • 学会等名: 14th International Congress of Histochemistry and Cytochemistry
  • 発表場所: Kyoto, Japan
  • 年月日: 2012-08-26
• [学会発表] 加圧凍結技法が広げる次世代電顕解析の可能性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 澤口朗、豊嶋典世、髙橋伸育
  • 学会等名: 日本顕微鏡学会第68回学術講演会
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 2012-05-14
• [学会発表] 凍結技法と単離胃粘膜モデルを応用した胃酸分泌関連疾患の病態解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 豊嶋典世、髙橋伸育、井手惣幸、澤口朗
  • 学会等名: 第117回日本解剖学会全国学術集会
  • 発表場所: 山梨
  • 年月日: 2012-03-27
• [学会発表] A secretagouge-induced microtubule dynamics facilitate HK-ATPase vesicle transport in gastric parietal cell. (2012)
  • 著者名/発表者名: Natarajan, P., Sawaguchi, A., Okamoto, T., Forte, J.G.
  • 学会等名: The American Society for Cell Biology 52th Annual Meeting
  • 発表場所: San Francisco, USA
• [学会発表] 高圧凍結技法を応用した胃酸分泌関連蛋白の局在解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 澤口朗、豊嶋典世、高橋伸育
  • 学会等名: 第52回日本組織細胞化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 金沢
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] 高圧凍結技法を応用した胃酸分泌関連蛋白の局在解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 澤口 朗、豊嶋典世、高橋伸育
  • 学会等名: 第52回日本組織細胞化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 石川県金沢市