精製Ｗｎｔ蛋白質を用いたＷｎｔシグナル経路の選択的活性化機構の解析

• 研究課題/領域番号: 23590333
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 山本 英樹 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (20372691)
• 連携研究者: 高尾 敏文 大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (10197048)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: Wntシグナル経路 / Wnt / 受容体 / 翻訳後修飾 / 細胞内小胞輸送 / Wntシグナル / Wntless / 糖鎖修飾 / 極性分泌 / クラスリン / AP1 / AP2 / ガレクチン / Wnt11

研究概要

質量分析法によりWnt3aには高マンノース型、Wnt11に高マンノース型に加えて複合型の糖鎖が付加されていることを見出した。極性化MDCK細胞においてWnt3aは側底部、Wnt11は頂端部へ分泌された。ゴルジ体においてWntの細胞外分泌を制御するWntlessはWnt3aと同様に側底部へ輸送され、両者はクラスリンやAP-1によって側底部への輸送が制御された。一方、Wnt11はN末端側の複合型の糖鎖修飾が頂端部への輸送に必要であり、ガレクチン3によって頂端部への輸送が制御された。これらの結果から、極性化された上皮細胞において糖鎖修飾の違いによってWntの細胞外分泌が制御されることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] The apical and basolateral secretion of Wnt11 and Wnt3a in polarized epithelial cells is regulated by distinct mechanisms. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, H., Awada, C., Hanaki, H., Sakane, H., Tsujimoto, I., Takahashi, Y., Takao, T., and Kikuchi, A.
  • 雑誌名: J. Cell Sci. 巻: 126 ページ: 2931-2943
  • DOI: 10.1242/jcs.126052
  • 査読あり
• [雑誌論文] 山本英樹, 菊池章 (2013)
  • 雑誌名: 極性化上皮細胞におけるWnt分泌制御細胞工学「Wnt協奏曲」 巻: 32巻4号 ページ: 388-395
• [雑誌論文] Apicobasal secretion of Wnt11 and Wnt3a in polarized epithelial cells is regulated by distinct mechanisms (2013)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto, H. et. al
  • 雑誌名: J. Cell Sci. 巻: in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Localization of glypican-4 in different membrane microdomains is involved in the regulation of Wnt signaling (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakane, H., et.al.
  • 雑誌名: J.Cell Sci. 巻: 125 号: 2 ページ: 449-460
  • DOI: 10.1242/jcs.091876
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Wnt5a-antibody suppresses metastasis of gastric cancer cells in vivo by inhibiting receptor-mediated endocytosis (2012)
  • 著者名/発表者名: Hanaki, H., et.al.
  • 雑誌名: Mol.Cancer Ther. 巻: 11 号: 2 ページ: 298-307
  • DOI: 10.1158/1535-7163.mct-11-0682
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wnt5a : its signaling, functions, and implication in diseases (2012)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, A., et.al.
  • 雑誌名: Acta Physiol. 巻: 204 号: 1 ページ: 17-33
  • DOI: 10.1111/j.1748-1716.2011.02294.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Wnt5a: its signaling, functions, and implication in diseases (2012)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, A. et. al
  • 雑誌名: Acta physiol. 巻: 204 ページ: 17-33
  • 査読あり
• [雑誌論文] The transmembrane protein Waif1/5T4 inhibits Wnt/β-catenin signaling and activates noncanonical Wnt pathways by modifying LRP6 subcellular localization (2011)
  • 著者名/発表者名: Kagermeier-Schenk, B., Wehner, D., Ö z h a n -Kizil, G. Yamamoto, H., Li, J., Kirchner, K., Hoffmann, C., Stern, P., Kikuchi, A., Schambony, A., Weidinger, G.
  • 雑誌名: Dev. Cell 巻: 21 号: 4 ページ: 1129-1143
  • DOI: 10.1016/j.devcel.2013.07.020
  • 査読あり
• [雑誌論文] New insights into the mechanism of Wnt signaling pathway activation (2011)
  • 著者名/発表者名: Kikuchi, A
  • 雑誌名: Int Rev Cell Mol Biol. 巻: 291 ページ: 21-71
  • DOI: 10.1016/b978-0-12-386035-4.00002-1
  • ISBN: 9780123860354
  • 査読あり
• [雑誌論文] Waif1/5T4 inhibits Wnt/β-catenin signaling and activates noncanonical Wnt pathways by modifying LRP6 subcellular localization (2011)
  • 著者名/発表者名: Kagermeier-Schenk, B., et.al.
  • 雑誌名: Dev.Cell. 巻: 21 号: 6 ページ: 1129-1143
  • DOI: 10.1016/j.devcel.2011.10.015
  • 査読あり
• [学会発表] 極性化された上皮細胞におけるWntの分泌制御機構 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山本英樹, 花木英明, 辻本育子, 金岩知之, 粟田ちひろ, 高尾敏文, 菊池章
  • 学会等名: 第86回日本生化学会大会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] 翻訳後修飾によるWnt11の機能発現の制御 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山本英樹, 花木英明, 辻本育子, 粟田ちひろ, 高尾敏文, 菊池章
  • 学会等名: 第85回日本生化学会大会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 翻訳後修飾によるWnt11蛋白質の機能発現の制御 (2012)
  • 著者名/発表者名: 山本 英樹
  • 学会等名: 生化学会
  • 発表場所: 福岡
• [学会発表] 翻訳後修飾によるWnt蛋白質の機能発現の制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山本英樹, 粟田ちひろ, 高尾敏文, 岸田昭世, 岸田想子, 菊池章
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] 翻訳後修飾によるWnt蛋白質の機能発現の制御 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山本 英樹
  • 学会等名: 生化学会
  • 発表場所: 京都国際会館（京都府）
• [学会発表] 極性化された上皮細胞におけるWntの分泌制御機構
  • 著者名/発表者名: 山本 英樹, 花木 英明, 辻本 育子, 粟田 ちひろ, 高尾 敏文, 菊池 章
  • 学会等名: 生化学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
• [図書] 極性化上皮細胞におけるWnt分泌制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山本 英樹
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 細胞工学（秀潤社）
• [図書] 極性化上皮細胞におけるWntの分泌制御 (2013)
  • 著者名/発表者名: 山本 英樹、菊池 章
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 秀潤社
• [備考]
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/molbiobc/
• [備考] 大阪大学大学院医学系研究科分子病態生化学
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/molbiobc/
• [備考] 大阪大学大学院医学系研究科分子病態生化学
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/molbiobc/
• [備考]
  • URL: http://www.med.osaka-u.ac.jp/pub/molbiobc/