Ｃ型肝炎ウイルス持続感染培養肝細胞を用いた持続感染と代謝異常の機構解明

• 研究課題/領域番号: 23590551
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 杉山 和夫 慶應義塾大学, 医学部, 特任准教授 (10242520)
• 連携研究者: 齋藤 英胤 慶應義塾大学, 薬学部, 教授 (80186949)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2013年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円); 2012年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: C型肝炎ウイルス / ペントースリン酸経路 / コレステロール / 脂肪酸 / Nrf2 / メタボローム / 脂肪滴 / Ｃ型肝炎ウイルス / 持続感染 / ペントースリン酸系 / 代謝 / 脂質代謝 / Hepatitis C virus / hepatocellular carcinoma / metabolome

研究概要

本研究ではHCVの持続感染による代謝異常を解明するために、HCV持続感染培養肝細胞(HPI細胞)を樹立した。この細胞では著しい脂肪滴の蓄積が認められたので、マイクロアレイとメタボロームの統合的解析を試みた。その結果、HPI細胞では律速酵素の発現亢進を伴うコレステロール、脂肪酸の増加が認められた。また、ペントースリン酸経路が亢進し、NADPHの産生亢進も認められた。TCA回路も亢進しており著しい代謝亢進状態にあった。また、転写因子Nrf2の恒常的リン酸化が糖脂質代謝を恒常的に亢進させていると考えられた。
以上よりHPI細胞はHCVのウイルス学的解析および肝代謝解析のツールとして有用である。

研究成果

• [雑誌論文] Prominent steatosis with hypermetabolism of the cell line permissive for years of infection with hepatitis C virus (2014)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K. Ebinuma, H. Nakamoto, N. Sakasegawa, N. Murakami, Y. Chu, P. S. Usui, S. Ishibashi, Y. Wakayama, Y. Taniki, N. Murata, H. Saito, Y. Fukasawa, M. Saito, K. Yamagishi, Y. Wakita, T. Takaku, H. Hibi, T. Saito, H. Kanai, T.
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 9 号: 4 ページ: 849-854
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0094460
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Free cholesterol accumulation in hepatic stellate cells: Mechanism of liver fibrosis aggravation in nonalcoholic steatohepatitis in mice (2014)
  • 著者名/発表者名: Tomita, K. Teratani, T. Suzuki, T. Shimizu, M. Sato, H. Narimatsu, K. Okada, Y. Kurihara, C. Irie, R. Yokoyama, H. Shimamura, K. Usui, S. Ebinuma, H. Saito, H. Watanabe, C. Komoto, S. Kawaguchi, A. Nagao, S. Sugiyama, K. Hokari, R. Kanai, T. Miura, S. Hibi, T.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 59 号: 1 ページ: 154-169
  • DOI: 10.1002/hep.26604
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis C Virus Infection Induces Inflammatory Cytokines and Chemokines Mediated by the Cross Talk between Hepatocytes and Stellate Cells. (2013)
  • 著者名/発表者名: Nishitsuji H, Funami K, Shimizu Y, Ujino S, Sugiyama K, Seya T, Takaku H, Shimotohno K.
  • 雑誌名: J. Viol 巻: 87 号: 14 ページ: 8169-8178
  • DOI: 10.1128/jvi.00974-13
  • 査読あり
• [雑誌論文] Suppressive Effect of the Histone Deacetylase Inhibitor, Suberoylanilide Hydroxamic Acid (SAHA), on Hepatitis C Virus Replication via Epigenetic Changes in Host Cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Sato, A., Saito, Y., Sugiyama, K., Sakasegawa, N., Muramatsu, T., Fukuda, S., Yoneya, M., Kimura, M., Ebinuma, H., Hibi, T., Saito, H
  • 雑誌名: J Cell Biochem 巻: 印刷中 号: 9 ページ: 1987-1996
  • DOI: 10.1002/jcb.24541
  • 査読あり
• [雑誌論文] C-C motif chemokine receptor 9 positive macrophages activate hepatic stellate cells and promote liver fibrosis in mice. (2013)
  • 著者名/発表者名: Chu PS, Nakamoto N, Ebinuma H, Usui S, Saeki K, Matsumoto A, Mikami Y, Sugiyama K, Tomita K, Kanai T, Saito H, Hibi T.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 58 号: 1 ページ: 337-350
  • DOI: 10.1002/hep.26351
  • 査読あり
• [雑誌論文] p53/p66Shc-mediated signaling contributes to the progression of non-alcoholic steatohepatitis in humans and mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Tomita K, Teratani T, Shimamura K, Nishiyama N, Mataki R, Irie T, Minamino Y, Okada C, Kurihara H, Sugiyama K, et al
  • 雑誌名: J Hepatol 巻: 57 号: 4 ページ: 837-843
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2012.05.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] A high-cholesterol diet exacerbates liver fibrosis in mice via accumulation of free cholesterol in hepatic stellate cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Teratani T, Tomita K, Suzuki T, Oshikawa T, Yokoyama H, Shimamura K, Tominaga S, Hiroi S, Irie R, Okada Y, Kurihara C, Ebinuma H, Saito H, Hokari R, Sugiyama K, Kanai T, Miura S, Hibi T
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 142 号: 1 ページ: 152-164
  • DOI: 10.1053/j.gastro.2011.09.049
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of monoclonal antibodies to human microsomal epoxide hydrolase and analysis of "preneoplastic antigen"-like molecules. (2012)
  • 著者名/発表者名: Duan H, Yoshimura K, Kobayashi N, Sugiyama K, Sawada JI, Saito Y, Morisseau C, Hammock BD, Akatsuka T
  • 雑誌名: Toxicol. 巻: 260 号: 1 ページ: 17-26
  • DOI: 10.1016/j.taap.2012.01.023
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of monoclonal antibodies to human microsomal epoxide hydrolase and analysis of "preneoplastic antigen"-like molecules. (2012)
  • 著者名/発表者名: Dua H, Yoshimura K, Kobayashi N, Sugiyama K, Sawada JI, Saito Y, Morisseau C, Hammock BD, Akatsuka T
  • 雑誌名: Toxicol. Appl. Pharmacol 巻: 260 ページ: 17-26
  • 査読あり
• [雑誌論文] A high-cholesterol diet exacerbates liver fibrosis in mice via accumulation of free cholesterol in hepatic stellate cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Teratani T, Tomita K, Suzuki T, Oshikawa T, Yokoyama H, Shimamura K, Tominaga S, Hiroi S, Irie R, Okada Y, Kurihara C, Ebinuma H, Saito H, Hokari R, Sugiyama K, Kanai T, Miura S, Hibi T.
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 142
  • 査読あり
• [雑誌論文] The interaction between human initiation factor eIF3 subunit c and heat-shock protein 90: a necessary factor for translation mediated by the hepatitis C virus internal ribosome entry site. (2012)
  • 著者名/発表者名: Ujino S, Nishitsuji H, Sugiyama R, Suzuki H, Hishiki T, Sugiyama K, Shimotohno K, Takaku H
  • 雑誌名: Virus Res. 巻: 163 ページ: 390-395
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lipoprotein component associated with hepatitis C virus is essential for virus infectivity. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimizu Y, Hishiki T, Ujino S, Sugiyama K, Funami K, Shimotohno K.
  • 雑誌名: Current Opinion in Virology 巻: 1 ページ: 19-26
  • 査読あり
• [学会発表] メタボローム・トランスクリプトーム統合的解析によるC型肝炎肝脂肪蓄積の機構解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤,日比紀文
  • 学会等名: 第16回日本肝臓学会大会(JDDW 2013)
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Epigenetics作用薬を用いたC型肝炎ウイルスの制御 ヒストン脱アセチル化阻害薬の有用性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 齋藤 英胤、齋藤 義正、杉山 和夫
  • 学会等名: 第49回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Nrf2/sMaf転写因子複合体はHCVによる肝細胞脂肪蓄積に関与する (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、海老沼浩利、酒瀬川典子、齋藤義正、金井隆典、日比紀文、齋藤英胤
  • 学会等名: 第72回日本癌学会総会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] メタボローム・トランスクリプトーム統合的解析によるＣ型肝炎肝脂肪蓄積の機構解明 (2013)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫
  • 学会等名: 第17回日本肝臓学会大会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] HCV持続感染細胞における転写因子Nrf2に制御される遺伝子群の発現解析 (2013)
  • 著者名/発表者名: 酒瀬川典子、杉山和夫、海老沼浩利、中本伸宏、村上優子、齋藤英胤、金井隆典
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Usefulness of A Long-term (Over 2 years) Cultured Cell Clone Persistently and Productively Infected with HCV (2012)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama K, Saito H, Sakasegawa N, Murakami Y, Ebinuma H, Nakamoto N, Usui S, Ishibashi Y, Chu P, Wakayama Y, Saito Y, Kanai T, Hibi T
  • 学会等名: The 63rd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Boston, USA
• [学会発表] New Insights on Hepatic Inflammatory Pseudotumor by Gd-EOB-DTPA MR Imaging (2012)
  • 著者名/発表者名: Usui S, Chu P, Wakayama Y, Ishibashi Y, Nakamoto N, Yamagishi Y, Masugi Y, Ebinuma H, Sugiyama K, Tanimoto A, Kanai T, Saito H, Hibi T
  • 学会等名: ACG 2012 Annual Scientific Meeting
  • 発表場所: Las Vegas, USA
• [学会発表] 新たなHCV研究ツールとしてのHCV持続感染培養肝細胞およびその治癒細胞の樹立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤、酒瀬川典子、村上優子、海老沼浩利、中本伸宏、梅田瑠美子、碓井真吾、石橋由佳、ちょ柏松、若山遊子、齋藤義正、日比紀文
  • 学会等名: 第48回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢(ワークショップ)
• [学会発表] HCV研究私の研究とSerendipity、C型肝炎ウイルス持続感染培養肝細胞の樹立と応用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤,日比紀文
  • 学会等名: 第39回日本肝臓学会東部会
  • 発表場所: 東京(シンポジウム)
• [学会発表] Usefulness of a long-term (over 2 years) cultured cell clone persistently and productively infected with chimeric HCV (2012)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K, Saito H, Ebinuma H, Sakasegawa N, Murakami Y, Nakamoto N, Usui S, Ishibashi Y, Chu P, Wakayama Y, Saito Y, Kanai T, Hibi T
  • 学会等名: The 63rd annual meeting of the American association for the study of liver diseases
  • 発表場所: Boston USA
• [学会発表] Recruited CCR9+ macrophages promote murine liver fibrosis through induction of TGF-β in hepatic stellate cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Chu P, Nakamoto N, Ebinuma H, Usui S, Sugiyama K, Kanai T, Saito H, Hibi T
  • 学会等名: The 63rd annual meeting of the American association for the study of liver diseases
  • 発表場所: Boston USA
• [学会発表] C型肝炎ウイルス持続感染における肝発癌と免疫異常：高発癌リスク因子を中心とした検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 楮柏松, 海老沼浩利, 中本伸宏, 碓井真吾, 梅田瑠美子, 石橋由佳, 若山遊子, 菊池真大, 山岸由幸, 杉山和夫, 金井隆典, 齋藤英胤, 日比紀文
  • 学会等名: 第４８回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] 当院における免疫抑制剤投与中のHBV感染の現状 (2012)
  • 著者名/発表者名: 碓井真吾, 海老沼浩利, 若山遊子, 楮柏松, 石橋由佳, 中本伸宏, 山岸由幸, 杉山和夫, 金井隆典, 齋藤英胤, 日比紀文
  • 学会等名: 第４８回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] コレステロール多量摂取は、肝星細胞の遊離コレステロール蓄積を介して、肝臓繊維化進展を引き起こす (2012)
  • 著者名/発表者名: 冨田謙吾, 寺谷俊昭, 鈴木貴博, 横山裕一, 岡田義清, 栗原千枝, 海老沼浩利, 齋藤英胤, 渡辺知佳子, 高本俊介, 穂刈量太, 川口淳, 永尾重昭, 杉山和夫, 金井隆典, 日比紀文, 三浦総一郎
  • 学会等名: 第４８回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA)によるC型肝炎ウイルス(HCV)の増殖抑制効果 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤郁美, 齋藤義正, 永見早耶花, 酒瀬川典子, 福田真也, 木村真規, 杉山和夫, 海老沼浩利, 齋藤英胤
  • 学会等名: 第４８回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] 新たなHCV研究ツールとしてのHCV持続感染培養肝細胞およびその治癒細胞の樹立 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫, 齋藤英胤, 酒瀬川典子, 村上優子, 海老沼浩利, 中本伸宏, 梅田瑠美子, 碓井真吾, 石橋由佳, 楮柏松, 若山遊子, 齋藤義正, 日比紀文
  • 学会等名: 第４８回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] Peginterferon (PEG)/ Rivabirin (RBV)併用療法の治療成績からみた高齢者とりわけ高齢女性にたいする今後の治療展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 海老沼浩利, 齋藤英胤, 中本伸宏, 山岸由幸, 碓井真吾, 梅田瑠美子, 楮柏松, 石橋由佳, 若山遊子, 杉山和夫, 金井隆典, 日比紀文
  • 学会等名: 第４８回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 金沢
• [学会発表] １ｂ型HCVレプリコン複製細胞内のレプリコンRNAを効率よく感染性粒子としてtranspackagingする方法 (2012)
  • 著者名/発表者名: 村上優子, 杉山和夫, 齋藤英胤, 海老沼浩利, 中本伸宏, 酒瀬川典子, 斉藤聡, 金井隆典, 日比紀文, 高久洋
  • 学会等名: 第６０回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 長期間の持続感染培養肝細胞におけるHCVゲノムの自然発生的遺伝子変異の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 酒瀬川典子, 杉山和夫, 齋藤英胤, 海老沼浩利, 村上優子, 中本伸宏, 金井隆典, 日比紀文
  • 学会等名: 第６０回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] C型肝炎ウイルス(HCV)複製制御に係わる宿主因子Hsp70の機能解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小倉大直, 君塚圭亮, 杉山隆一, 日紫喜隆行, 下遠野邦忠, 杉山和夫, 高久洋
  • 学会等名: 第６０回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] Age and the liver stiffness measured by Fibroscan are significant predictive values for hepatoma development in chronic liver diseases (2011)
  • 著者名/発表者名: Ishibashi Y, Ebinuma H, Sugiyama K, Nakamoto N, Yamagishi Y, Usui S, Cho HS, Umeda R, Wakayama Y, Takaishi H, Kanai T, Sakamoto M, Saito H, Hibi T
  • 学会等名: 62nd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, USA
• [学会発表] Significant and continuous elevation of serum total cholesterol levels in patients with chronic hepatitis C who achieved sustained virological response by peginterferon and rivabirin treatment (2011)
  • 著者名/発表者名: Ebinuma H, Saito H, Sugiyama K, Nakamoto N, Yamagishi Y, Usui S, Cho HS, Umeda R, Ishibashi Y, Wakayama Y, Kanai T, Hibi T
  • 学会等名: 62nd Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: San Francisco, USA
• [学会発表] キメラHCV(1b/2a)持続感染細胞のメタボローム解析(Metabolome analysis of the cultured hepatocytes persistently infected with Chimeric HCV (1b/2a) (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、齋藤英胤、海老沼浩利、高久洋、日比紀文
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Nrf2/sMaf転写因子複合体はHCVによる肝細胞脂肪蓄積に関与する (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫、海老沼浩利、酒瀬川典子、齋藤義正、金井隆典、日比紀文、齋藤英胤
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Infectious hepatitis C virus bearing genotype-1b subgenomic replicon by trans-encapsidation with the structural regions of genotype 1b. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K, Murakami Y, Hishiki T, Shimizu Y, Funami K, Ujino S, Saito H, Saito S, Kato N, Hibi T, Takaku H
  • 学会等名: The 18th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: Seattle USA
• [学会発表] Metabolome analysis of the cultured hepatocytes persistently infected with Chimeric HCV (1b/2a). (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K, Saito H, Ebinuma H, Takaku H, Hibi T
  • 学会等名: 第70回日本癌学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Metabolome analysis of the cultured hepatocytes persistently infected with Chimeric HCV (1b/2a). (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K. , Saito, H., Ebinuma, H., Takaku, H., Hibi, T.
  • 学会等名: 70th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association.
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県）
• [学会発表] Infectious hepatitis C virus bearing genotype-1b subgenomic replicon by trans-encapsidation with the structural regions of genotype 1b. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sugiyama, K., Murakami, Y., Hishiki, T., Shimizu, Y., Funami, K., Ujino, S., Saito, H., Saito, S., Kato, N., Hibi, T., Takaku, H.
  • 学会等名: 18th International Symposium on Hepatitis C Virus and Related Viruses
  • 発表場所: シアトル、アメリカ合衆国
• [図書] がん生物学イラストレイティド, 腫瘍ウイルス(肝炎ウイルス) (2011)
  • 著者名/発表者名: 杉山和夫, (渋谷正史,湯浅保仁編)
  • 出版者: 羊土社
• [図書] がん生物学イラストレイテッド、腫瘍ウイルス(肝炎ウイルス) (2011)
  • 著者名/発表者名: 宇治野真之, 杉山和夫, 下遠野邦忠
  • 総ページ数: 10
  • 出版者: 羊土社