遺伝子導入による間葉系幹細胞の肝修復再生能プログラミングと肝再生療法への応用

• 研究課題/領域番号: 23590968
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器内科学
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 酒井 佳夫 金沢大学, 医学系, 准教授 (80401925)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 肝臓学 / 肝再生 / 間葉系幹細胞 / 遺伝子導入 / エレクトロポレーション

研究概要

脂肪組織由来間質細胞への遺伝子導入による肝細胞への分化誘導を試みる研究を行った。GFPタグ付HNF4a、HNF1b発現プラスミド(pCMV6-HNF4a-GFP, pCMV-6HNF1b-GFP)をエレクトロポレーション法にて導入した。導入後15日目の細胞を回収し、リアルタイムPCRにて遺伝子発現解析を行った。pCMV6-HNF4a-GFP導入細胞ではHNF4aの発現を認めたが、Albumin発現は見られなかった。pCMV6-HNF1b-GFP導入細胞は、HNF1bの発現、Albuminの発現双方認められなかった。脂肪組織由来間質細胞への遺伝子導入による肝細胞分化には、改良が必要であった。

研究成果

• [雑誌論文] Adipose tissue derived stromal stem cell therapy in murine ConA-derived hepatitis is dependent on myeloid-lineage and CD4+ T-cell suppression (2013)
  • 著者名/発表者名: Higashimoto M, Sakai Y, Takamura M, Usui S, Nasti A, Yoshida K, Seki A, Komura T, Honda M, Wada T, Furuichi K, Ochiya T, Kaneko S
  • 雑誌名: Eur J Immunol 巻: vol.43 ページ: 2956-2968
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adipose tissue-derived stem cells as a regenerative therapy for a mouse steatohepatitis-induced cirrhosis model (2013)
  • 著者名/発表者名: Seki A, Sakai Y, Komura T, Nasti A, Yoshida K, Higashimoto M, Honda M, Usui S, Takamura M, Takamura T, Ochiya T, Furuichi K, Wada T, Kaneko S
  • 雑誌名: Hepatology 巻: vol. 58 ページ: 1133-1142
• [雑誌論文] Nodular lesions and mesangiolysis in diabetic nephropathy (2013)
  • 著者名/発表者名: Wada T, Shimizu M, Yokoyama H, Iwata Y, Sakai Y, Kaneko S, Furuichi K
  • 雑誌名: Clin Exp Nephrol 巻: vol.17 ページ: 3-9
  • NAID: 10031169438
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adipose tissue derived stromal stem cell therapy in murine ConA-derived hepatitis is dependent on myeloid-lineage and CD4+ T-cell suppression. (2013)
  • 著者名/発表者名: Higashimoto M, Sakai Y, Takamura M, Usui S, Nasti A, Yoshida K, Seki A, Komura T, Honda M, Wada T, Furuichi K, Ochiya T, Kaneko S.
  • 雑誌名: Eur J Immunol 巻: 43 号: 11 ページ: 2956-68
  • DOI: 10.1002/eji.201343531
  • 査読あり
• [雑誌論文] Adipose tissue-derived stem cells as a regenerative therapy for a mouse steatohepatitis-induced cirrhosis model (2013)
  • 著者名/発表者名: A Seki, S Y akai, T Komura, A Nasti, K Yoshida, M Higashimoto, M Honda, S Usui, M Takamura, T Takamura, T Ochiya, K Furuichi, T Wada, S Kaneko
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 58(3) 号: 3 ページ: 1133-42
  • DOI: 10.1002/hep.26470
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nodular lesions and mesangiolysis in diabetic nephropathy. (2013)
  • 著者名/発表者名: Wada T, Shimizu M, Yokoyama H, Iwata Y, Sakai Y, Kaneko S, Furuichi K.
  • 雑誌名: Clin Exp Nephrol. 巻: 17 号: 1 ページ: 3-9
  • DOI: 10.1007/s10157-012-0711-6
  • NAID: 10031169438
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction formula for interrupter respiratory resistance in healthy Japanese adults (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakade Y, Fujimura M, Ohkura N, Okuizumi Y, Nakatas M, Nanbu Y, Oe H, Horita H, Sakai Y, Wada T
  • 雑誌名: Rinsho Byori 巻: vol.60 ページ: 725-733
  • NAID: 10031123882
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of changes in the gene expression profile of blood cells with the local tumor inflammatory response in a murine tumor model (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakai Y, Tatsumi I, Higashimoto M, Seki A, Nasti A, Yoshida K, Kawaguchi K, Wada T, Honda M, Komura T, Kaneko S
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: vol.428 ページ: 36-43
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acyclic retinoid targets platelet-derived growth factor signaling in the prevention of hepatic fibrosis and hepatocellular carcinoma development (2012)
  • 著者名/発表者名: Okada H, Honda M, Campbell JS, Sakai Y, Yamashita T, Takebuchi Y, Hada K, Shirasaki T, Takabatake R, Nakamura M, Sunagozaka H, Tanaka T, Fausto N, Kaneko S
  • 雑誌名: Cancer Res 巻: vol.72 ページ: 4459-4471
  • 査読あり
• [雑誌論文] Beneficial effect of branched-chain amino acid supplementation on glycemic control in chronic hepatitis C patients with insulin resistance : implications for type 2 diabetes (2012)
  • 著者名/発表者名: Takeshita Y, Takamura T, Kita Y, Ando H, UedaT, Kato K, Misu H, Sunagozaka H, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Honda M, Kaneko S
  • 雑誌名: Metabolism 巻: vol.61 ページ: 1388-1394
  • NAID: 120004997025
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of adipose-derived mesenchymal cells on ischemia-reperfusion injury in kidney (2012)
  • 著者名/発表者名: Furuichi K, Shintani H, Sakai Y, Ochiya T, Matsushima K, Kaneko S, Wada T
  • 雑誌名: Clin Exp Nephrol 巻: vol.16 ページ: 670-680
  • NAID: 10031122254
  • 査読あり
• [雑誌論文] Membrane-bound form of monocyte chemoattractant protein-1 enhances antitumor effects of suicide gene therapy in a model of hepatocellular carcinoma (2012)
  • 著者名/発表者名: Marukawa Y, Nakamoto Y, Kakinoki K, Tsuchiyama T, Iida N, Kagaya T, Sakai Y, Naito M, Mukaida N, Kaneko S
  • 雑誌名: Cancer Gene Ther 巻: vol.10 ページ: 312-319
  • NAID: 120003989046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction formula for interrupter respiratory resistance in healthy Japanese adults. (2012)
  • 著者名/発表者名: Nakade Y, Fujimura M, Ohkura N, Okuizumi Y, Nakatas M, Nanbu Y, Oe H, Horita H, Sakai Y, Wada T.
  • 雑誌名: Rinsho Byori 巻: 60 ページ: 725-733
  • NAID: 10031123882
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of changes in the gene expression profile of blood cells with the local tumor inflammatory response in a murine tumor model. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakai Y, Tatsumi I, Higashimoto M, Seki A, Nasti A, Yoshida K, Kawaguchi K, Wada T, Honda M, Komura T, Kaneko S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 428 号: 1 ページ: 36-43
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.10.004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acyclic retinoid targets platelet-derived growth factor signaling in the prevention of hepatic fibrosis and hepatocellular carcinoma development. (2012)
  • 著者名/発表者名: Okada H, Honda M, Campbell JS, Sakai Y, Yamashita T, Takebuchi Y, Hada K, Shirasaki T, Takabatake R, Nakamura M, Sunagozaka H, Tanaka T, Fausto N, Kaneko S.
  • 雑誌名: Cancer Res. 巻: 72 号: 17 ページ: 4459-4471
  • DOI: 10.1158/0008-5472.can-12-0028
  • 査読あり
• [雑誌論文] Beneficial effect of branched-chain amino acid supplementation on glycemic control in chronic hepatitis C patients with insulin resistance : Implications for type 2 diabetes. Metabolism (2012)
  • 著者名/発表者名: Honda M, (他12名, 12番目)
  • 雑誌名: Epub ahead of print 巻: (Epub ahead of print) 号: 10 ページ: 1388-94
  • DOI: 10.1016/j.metabol.2012.03.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of adipose-derived mesenchymal cells on ischemia-reperfusion injury in kidney. (2012)
  • 著者名/発表者名: Furuichi K, Shintani H, Sakai Y, Ochiya T, Matsushima K, Kaneko S, Wada T.
  • 雑誌名: 10.1007/s10157-012-0614-6. 巻: 16 ページ: 670-689
  • NAID: 10031122254
  • 査読あり
• [雑誌論文] Membrane-bound form of monocyte chemoattractant protein-1 enhances antitumor effects of suicide gene therapy in a model of hepatocellular carcinoma. (2012)
  • 著者名/発表者名: Marukawa Y, Nakamoto Y, Kakinoki K, Tsuchiyama T, Iida N, Kagaya T, Sakai Y, Naito M, Mukaida N, Kaneko S.
  • 雑誌名: 10.1038/cgt.2012.3. 巻: 19 ページ: 312-319
  • NAID: 120003989046
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequency of CD45RO+ subset in CD4+CD25(high) regulatory T cells associated with progression ofhepatocellular carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Takata Y, Nakamoto Y, Nakada A, Terashima T, Arihara F, Kitahara M, Kakinoki K, Arai K. Yamashita T, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Kaneko S
  • 雑誌名: Cancer Lett 巻: vol.307 ページ: 165-173
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative analysis of various tumor-associated antigen-specific t-cell responses in patients with hepatocellular carcinoma (2011)
  • 著者名/発表者名: Mizukoshi E, Nakamoto Y, Arai K, Yamashita T, Sakai A, Sakai Y, Kagaya T, Yamashita T, Honda M, Kaneko S
  • 雑誌名: Hepatology 巻: vol.53 ページ: 1206-1216
  • 査読あり
• [雑誌論文] Malnutrition impairs interferon signaling through mTOR and FoxO pathways in patients with chronic hepatitis C (2011)
  • 著者名/発表者名: Honda M, Takehana K, Sakai A, Tagata Y, Shirasaki T, Nishitani S, Muramatsu T, Yamashita T, Nakamoto Y, Mizukoshi E, Sakai Y, Yamashita T, Nakamura M, Shimakami T, Yi M, Lemon SM, Suzuki T, Wakita T, Kaneko S; Hokuriku Liver Study Group
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: vol.141 ページ: 128-140
  • 査読あり
• [雑誌論文] Frequency of CD45RO+ subset in CD4+CD25(high) regulatory T cells associated with progression of hepatocellular carcinoma. (2011)
  • 著者名/発表者名: Takata Y, Nakamoto Y, Nakada A, Terashima T, Arihara F, Kitahara M, Kakinoki K, Arai K, Yamashita T, Sakai Y, Yamashita T, Mizukoshi E, Kaneko S.
  • 雑誌名: Cancer Lett 巻: 307 ページ: 165-173
  • NAID: 120003141809
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative analysis of various tumor-associated antigen-specific t-cell responses in patients with hepatocellular carcinoma. (2011)
  • 著者名/発表者名: Mizukoshi E, Nakamoto Y, Arai K, Yamashita T, Sakai A, Sakai Y, Kagaya T, Yamashita T, Honda M, Kaneko S.
  • 雑誌名: Hepatology 巻: 53 ページ: 1206-1216
  • 査読あり
• [雑誌論文] Malnutrition impairs interferon signaling through mTOR and FoxO pathways in patients with chronic hepatitis C. (2011)
  • 著者名/発表者名: Honda M, Takehana K, Sakai A, Tagata Y, Shirasaki T, Nishitani S, Muramatsu T, Yamashita T, Nakamoto Y, Mizukoshi E, Sakai Y et al.
  • 雑誌名: Gastroenterology 巻: 141 ページ: 128-140
  • 査読あり
• [学会発表] 肝硬変マウスモデルにおける脂肪組織由来間質細胞投与による肝修復再生効果の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関晃裕、金子周一
  • 学会等名: 第40回日本肝臓学会西部会
  • 発表場所: 岐阜都ホテル、岐阜
  • 年月日: 2013-12-06
• [学会発表] Features of immunomodulatory and therapeutic effects of mesenchymal stromal/stem cells on non-alcoholic steatohepatitis murine model in early and cirrhotic phases (2013)
  • 著者名/発表者名: Akihiro Seki, Yoshio Sakai, Mami Higashimoto, Takuya Komura, Alessandro Nasti, Keiko Yoshida, Takahiro Ochiya, Takashi Wada, Masao Honda, Shuichi Kaneko
  • 学会等名: The 64th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Washington D.C., U.S.A
  • 年月日: 2013-11-04
• [学会発表] 脂肪組織由来間質細胞を用いた肝硬変に対する肝再生療法実用化への基礎的検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関晃裕、金子周一
  • 学会等名: 第55回日本消化器病学会大会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪、東京
  • 年月日: 2013-10-10
• [学会発表] 肝硬変マウスモデルにおける脂肪組織由来幹細胞による肝修復再生療法の検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 関晃裕、酒井佳夫、Alessandro Nasti、吉田佳子、東元真実、小村卓也、本多政夫、金子周一
  • 学会等名: 第49回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル、東京
  • 年月日: 2013-06-06
• [学会発表] 血液細胞の遺伝子発現解析による生体のがん反応解明と消化器癌診断法開発の可能性 (2013)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、本多政夫、金子周一
  • 学会等名: 第99回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 鹿児島
  • 年月日: 2013-03-21
• [学会発表] マウス皮下肝癌モデルにおける末梢血液細胞の遺伝子発現プロファイルの変化 (2012)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、金子周一、古市賢吾、和田隆志
  • 学会等名: 第59回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-11-30
• [学会発表] Therapeutic effect of adipose derived mesenchymal stem cell to murine NASH liver cirrhosis inactivating Kupffer/Macrophage and helper T cell (2012)
  • 著者名/発表者名: Akihiro Seki, Yoshio Sakai, Takuya Komura, Mami Higashimoto, Haruo Fujinaga, Masao Honda,Takashi Wada, Toshinari Takamura, Takahiro Ochiya, Shuichi Kaneko
  • 学会等名: The 63rd Annual Meeting of the American Association for the Study Liver Diseases
  • 発表場所: Boston
  • 年月日: 2012-11-13
• [学会発表] 肝硬変に対する脂肪組織由来間質細胞による肝再生療法開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関晃裕、金子周一
  • 学会等名: JDDW 2012シンポジウム11
  • 発表場所: 神戸ポートピアホテル
  • 年月日: 2012-10-11
• [学会発表] 肪組織由来間質細胞を用いた肝硬変に対する肝再生療法実用化への基礎的検討
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関晃裕、金子周一.
  • 学会等名: 第55回日本消化器病学会大会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル新高輪、東京
• [学会発表] 肝硬変マウスモデルにおける脂肪組織由来間質細胞投与による肝修復再生効果の検討
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関晃裕、金子周一.
  • 学会等名: 第40回日本肝臓学会西部会
  • 発表場所: 岐阜都ホテル、岐阜
• [学会発表] Features of immunomodulatory and therapeutic effects of mesenchymal stromal/stem cells on non-alcoholic steatohepatitis murine model in early and cirrhotic phases.
  • 著者名/発表者名: Akihiro Seki, Yoshio Sakai, Mami Higashimoto, Takuya Komura, Alessandro Nasti, Keiko Yoshida, Takahiro Ochiya, Takashi Wada, Masao Honda, Shuichi Kaneko.
  • 学会等名: The 64th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases
  • 発表場所: Washington D.C., U.S.A.
• [学会発表] 肝硬変マウスモデルにおける脂肪組織由来幹細胞による肝修復再生療法の検討
  • 著者名/発表者名: 関晃裕、酒井佳夫 Alessandro Nasti, 吉田佳夫、東元真実、小村卓也、本多政夫、金子周一.
  • 学会等名: 第49回日本肝臓学会総会
  • 発表場所: 京王プラザホテル、東京
• [学会発表] 肝硬変に対する脂肪組織由来間質細胞による肝再生療法開発
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、関晃裕、金子周一
  • 学会等名: JDDW 2012 シンポジウム11
  • 発表場所: 神戸ポートピアホテル、兵庫県
• [学会発表] マウス皮下肝癌モデルにおける末梢血液細胞の遺伝子発現プロファイルの変化
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、金子周一、古市賢吾、和田隆志
  • 学会等名: 第59回日本臨床検査医学会学術集会
  • 発表場所: 国立京都国際会館、京都府
• [学会発表] 血液細胞の遺伝子発現解析による生体のがん反応解明と消化器癌診断法開発の可能性
  • 著者名/発表者名: 酒井佳夫、本多政夫、金子周一
  • 学会等名: 第99回日本消化器病学会総会
  • 発表場所: 城山観光ホテル、鹿児島県
• [学会発表] Therapeutic effect of adipose derived mesenchymal stem cell to murine NASH liver cirrhosis inactivating Kupffer/Macrophage and helper T cell.
  • 著者名/発表者名: Akihiro Seki, Yoshio Sakai, Takuya Komura, Mami Higashimoto, Haruo Fujinaga, Masao Honda, Takashi Wada, Toshinari Takamura, Takahiro Ochiya, Shuichi Kaneko
  • 学会等名: The 63rd Annual Meeting of the American Association for the Study Liver Diseases
  • 発表場所: BOSTON、アメリカ合衆国