アルファ・シヌクレインオリゴマーの物性・細胞毒性機序の解明と分子標的治療への応用

• 研究課題/領域番号: 23591252
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経内科学
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 徳田 隆彦 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (80242692)
• 研究分担者: 水野 敏樹 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (30264782) ; 中川 正法 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50198040) ; 渡邊 義久 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (50363990)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,200千円 (直接経費: 4,000千円、間接経費: 1,200千円); 2013年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2011年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円)
• キーワード: α-シヌクレイン / オリゴマー / 神経細胞毒性 / パーキンソン病 / 分子標的治療 / アルファ・シヌクレイン / 神経細胞変性 / 原子間力顕微鏡 / A30P変異α-シヌクレイン

研究概要

α-シヌクレイン(α-syn)オリゴマー/線維作製方法として、高濃度(3 mg/mL)の合成α-syn溶液を撹拌しつつ37℃で7日間incubateする方法を確立した。溶液中の合成α-synおよび髄液中のα-synはゲルろ過クロマトグラフィーでは60-70kDaに溶出されたが、8Ｍ尿素存在下でも解離せず、溶液中で単量体として存在することが明らかになった。培養細胞系では、α-synオリゴマー/線維の添加により細胞内に凝集体が形成され、この凝集体の分解はオートファジーに依存していた。

研究成果

• [雑誌論文] Biomarkers for the diagnosis and management of Parkinson's disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Waragai M、Sekiyama K、Fujita M、Tokuda T、Hashimoto M
  • 雑誌名: Expert Opin Med Diagn 巻: Vol.7 ページ: 71-83
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correlation of Aβoligomer levels in matched cerebrospinal fluid and serum samples (2013)
  • 著者名/発表者名: Kasai T、Tokuda T、Taylor M、Kondo M、Mann DM、Nakagawa M、Allsop D
  • 雑誌名: Neurosci Lett 巻: Vol.551 ページ: 17-22
  • 査読あり
• [雑誌論文] Corticobasal Syndrome : CBSのバイオマーカーと鑑別診断 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 雑誌名: BRAIN and NERVE 巻: Vol.65 ページ: 55-64
• [雑誌論文] Distribution of amyloid burden is different between idiopathic normal pressure hydrocephalus and Alzheimer’s disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Kondo M, Tokuda T, Itsukage M, Kuriyama N, Matsushima S, Yamada K, Nakanishi H, Ishikawa M, Nakagawa M
  • 雑誌名: Neuroradiol J 巻: 3 ページ: 129-134
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biomarkers for the diagnosis and management of Parkinson's disease (2013)
  • 著者名/発表者名: Waragai M, Sekiyama K, Fujita M, Tokuda T, Hashimoto M
  • 雑誌名: Expert Opin Med Diagn 巻: 7 号: 1 ページ: 71-83
  • DOI: 10.1517/17530059.2013.733694
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correlation of Aβ oligomer levels in matched cerebrospinal fluid and serum samples (2013)
  • 著者名/発表者名: Kasai T, Tokuda T, Taylor M, Kondo M, Mann DM, Nakagawa M, Allsop D
  • 雑誌名: Neurosci Lett 巻: 551 ページ: 17-22
  • DOI: 10.1016/j.neulet.2013.06.029
  • 査読あり
• [雑誌論文] Corticobasal Syndrome: CBSのバイオマーカーと鑑別診断 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 雑誌名: BRAIN and NERVE 巻: 65 ページ: 55-64
• [雑誌論文] Cerebrospinal fluid proteomic patterns discriminate Parkinson's disease and multiple system atrophy (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishigami N、Tokuda T、Ikegawa M、Komori M、Kasai T、Kondo T、Matsuyama Y、Nirasawa T、Thiele H、Tashiro K、Nakagawa M
  • 雑誌名: Movement Disorders 巻: Vol.27 ページ: 851-857
  • 査読あり
• [雑誌論文] Utilization of a multiple antigenic peptide as a calibration standard in the BAN50 single antibody sandwich ELISA for Aβoligomers (2012)
  • 著者名/発表者名: Kasai T、Tokuda T、Taylor M、Nakagawa M、Allsop D
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: Vol.422 ページ: 375-380
  • 査読あり
• [雑誌論文] p62/SQSTM1-dependent autophagy of Lewy body-likeα-synuclein inclusions (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y、Tatebe H、Taguchi K、Endo Y、Tokuda T、Mizuno T、Nakagawa M、Tanaka M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: Vol.7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cerebrospinal fluid proteomic patterns discriminate Parkinson's disease and multiple system atrophy (2012)
  • 著者名/発表者名: Ishigami N, Tokuda T, Ikegawa M, Tashiro K, Nakagawa M, 他
  • 雑誌名: Mov Disord.Peer-Reviewed papers 巻: 27(7) 号: 7 ページ: 851-857
  • DOI: 10.1002/mds.24994
  • 査読あり
• [雑誌論文] Utilization of a multiple antigenic peptide as a calibration standard in the BAN50 single antibody sandwich ELISA for Aβ oligomers (2012)
  • 著者名/発表者名: Kasai T, Tokuda T, Taylor M, Nakagawa M, Allsop D
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 422 号: 3 ページ: 375-380
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2012.04.146
  • 査読あり
• [雑誌論文] Knockdown of the Drosophila Fused in Sarcoma (FUS) homologue causes deficient locomotive behavior and shortening of motoneuron terminal branches. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sasayama, H., Shimamura, M., Tokuda, T., Azuma, Y., Yoshida, T., Mizuno, T., Nakagawa, M., Fujikake, N., Nagai, Y. and Yamaguchi, M
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 7(6), 号: 6 ページ: e39483-e39483
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0039483
  • 査読あり
• [雑誌論文] p62/SQSTM1-dependent autophagy of Lewy body-like α-synuclein inclusions (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe Y, Tatebe H, Taguchi K, Endo Y, Tokuda T, Mizuno T, Nakagawa M, Tanaka M
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7 号: 12 ページ: e52868-e52868
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0052868
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simultaneous impairment of intracranial and peripheral artery vasoreactivity in CADASIL patients. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara Y, Mizuno T, Okuyama C, Nagakane Y, Watanabe-Hosomi A, Kondo M, Kuriyama N, Tokuda T, Matsushima S, Nishimura T, Nakagawa M
  • 雑誌名: Cerebrovascular Diseases 巻: 33 号: 2 ページ: 128-134
  • DOI: 10.1159/000334185
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correspondence : Detection of elevated levels ofα-synuclein oligomers in CSF from patients with parkinson disease (2011)
  • 著者名/発表者名: El-Agnaf OMA、Tokuda T
  • 雑誌名: Neurology 巻: Vol.77 ページ: 510-511
• [雑誌論文] Correspondence: Detection of elevated levels of α-synuclein oligomers in CSF from patients with parkinson disease. (2011)
  • 著者名/発表者名: El-Agnaf OMA, Tokuda T
  • 雑誌名: Neurology 巻: 77 ページ: 510-511
• [学会発表] α-Synuclein is present as a monomer in the biological fluids (2013)
  • 著者名/発表者名: Tatebe H、Tokuda T、Ishi R、Watanabe Y、Kasai T、Taguchi K、Mizuta I、Tanaka M、Mizuno T
  • 学会等名: The 20th World Congress on Parkinson's Disease and Related Disorders
  • 発表場所: Geneva、Switzerland
  • 年月日: 2013-12-11
• [学会発表] Interference from heterophilic antibodies in A-Syn ELISA (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishii R、Tokuda T、Tatebe H、Kasai T、Mizuno T、Nakagawa M
  • 学会等名: The 20th World Congress on Parkinson's Disease and Related Disorders
  • 発表場所: Geneva、Switzerland
  • 年月日: 2013-12-11
• [学会発表] 髄液,血清のα-synucleinなどの定量でパーキンソン病の発症は予測できるか? (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: パーキンソン病・運動障害疾患コングレス(MDSJ :第7回)
  • 発表場所: 品川プリンスホテル(東京都)
  • 年月日: 2013-10-12
  • 招待講演
• [学会発表] CSBのバイオマーカーと鑑別診断 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 日本神経学会学術大会(第54回)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2013-06-01
  • 招待講演
• [学会発表] Clinical application of ELISAs detecting pathogenic protein oligomers to the neurodegenerative disorders (2013)
  • 著者名/発表者名: Tokuda T
  • 学会等名: 3rd International Conference on Neurodegenerative Disorders : Immunotherapy and Biomarkers
  • 発表場所: Uppsala、Sweden
  • 年月日: 2013-05-23
  • 招待講演
• [学会発表] Clinical application of ELISAs detecting pathogenic protein oligomers to the neurodegenerative disorders (2013)
  • 著者名/発表者名: Tokuda T
  • 学会等名: 3rd International Conference on Neurodegenerative Disorders: Immunotherapy and Biomarkers
  • 発表場所: Uppsala, Sweden
  • 招待講演
• [学会発表] CBSのバイオマーカーと鑑別診断 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 日本神経学会学術大会(第54回)
  • 発表場所: 東京
  • 招待講演
• [学会発表] 髄液, 血清のα-synucleinなどの定量でパーキンソン病の発症は予測できるか? (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: パーキンソン病・運動障害疾患コングレス(MDSJ: 第7回)
  • 発表場所: 東京
  • 招待講演
• [学会発表] α-Synuclein is present as a monomer in the biological fluids (2013)
  • 著者名/発表者名: Tatebe H, Tokuda T, Ishi R, Watanabe Y, Kasai T, Taguchi K, Mizuta I, Tanaka M, Mizuno T
  • 学会等名: The 20th World Congress on Parkinson’s Disease and Related Disorders
  • 発表場所: Geneva, Switzerland
• [学会発表] Interference from heterophilic antibodies in A-Syn ELISA (2013)
  • 著者名/発表者名: Ishii R, Tokuda T, Tatebe H, Kasai T, Mizuno T, Nakagawa M
  • 学会等名: The 20th World Congress on Parkinson’s Disease and Related Disorders
  • 発表場所: Geneva, Switzerland
• [学会発表] パーキンソニズム患者の髄液プロテオーム解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦、石神紀子、中川正法、池川雅哉、近藤誉之、小森美華
  • 学会等名: 第6回パーキンソン病・運動障害疾患コングレス(Movement Disorder Society of Japan)
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-10-12
• [学会発表] パーキンソン病のバイオマーカーの開発を目指して (2012)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 日本神経学会学術大会(第53回)
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-05-25
  • 招待講演
• [学会発表] パーキンソン病とその関連疾患のバイオマーカー (2012)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 第20回日本神経学会近畿地区生涯教育講演会(招待講演)
  • 発表場所: 京都教育文化センター（京都府）
• [学会発表] 教育講演:パーキンソン病biomarker最新知見 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 第5回パーキンソン病・運動障害疾患コングレス(MDSJ)
  • 発表場所: 品川プリンスホテル(東京都)
  • 年月日: 2011-10-07
  • 招待講演
• [学会発表] パーキンソン病とALSのバイオマーカー:現状と展望: 1)パーキンソン病 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 神経変性疾患に関する調査研究班平成23年度ワークショップ
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京都)
  • 年月日: 2011-07-15
  • 招待講演
• [学会発表] ヒト髄液中のAβオリゴマーを定量するELISA系の開発と臨床応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦、笠井高士、石神紀子、近藤正樹、中川正法
  • 学会等名: 第52回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場(愛知県)
  • 年月日: 2011-05-20
• [学会発表] ヒト髄液中のAβオリゴマーを定量するELISA系の開発と臨床応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦，笠井高士，石神紀子，近藤正樹，中川正法
  • 学会等名: 第52回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 名古屋国際会議場（愛知県）
• [学会発表] パーキンソン病とALSのバイオマーカー：現状と展望: 1) パーキンソン病 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 神経変性疾患に関する調査研究班平成23年度ワークショップ(招待講演)
  • 発表場所: 都市センターホテル（東京都）
• [学会発表] Intravenous immunoglobulin improved cognitive functions in patients with Alzheimer’s disease without any changes in PIB retention in the brain. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokuda T, Kondo M, Kasai T, Oishi Y, Ataka S, Shimada H, Miki T, Mori H, Nakagawa M
  • 学会等名: The 11th Alzheimer's Association International Conference on Alzheimer’s Disease 2011 (AAICAD)
  • 発表場所: Paris Porte de Versailles Convention and Exhibition Center, Paris
• [学会発表] 教育講演：パーキンソン病biomarker最新知見 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 第5回パーキンソン病・運動障害疾患コングレス(MDSJ)(招待講演)
  • 発表場所: 品川プリンスホテル（東京都）
• [学会発表] シンポジウム2：認知症のバイオマーカー：その現状と展望 (2011)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 第31回日本精神科診断学会(招待講演)
  • 発表場所: 信州大学附属病院大会議室（長野県）
• [学会発表] Cardiomyopathy in a Japanese family with the Glu61Lys transthyretin variant: a new phenotype. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tokuda T, Noto Y, Shiga K, Tsuchiya A, Yazaki M, Matoba S, Nakagawa M
  • 学会等名: The 8th International Symposium on Familial Amyloidotic Polyneuropathy
  • 発表場所: The Kumamoto City Medical Association hall（熊本県）
• [学会発表] アルツハイマー型認知症患者5例に対するIVIg療法と治療後経過の検討
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦, 近藤正樹, 笠井高士, 田中章浩, 中川正法, 安宅鈴香, 嶋田裕之, 三木隆己, 森啓
  • 学会等名: 日本神経学会学術大会(第53回)
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] パーキンソニズム患者の髄液プロテオーム解析
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦, 石神紀子, 中川正法, 池川雅哉, 近藤誉之, 小森美華
  • 学会等名: 第6回パーキンソン病・運動障害疾患コングレス(Movement Disorder Society of Japan)
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] The usefulness of the Convexity APPArent Hyperperfusion (CAPPAH) sign in the perfusion SPECT study for the diagnosis of iNPH
  • 著者名/発表者名: Tokuda T, Koizumi H, Kondo M, Kuriyama N, Okuyama C, Ishii K, Mori E, Nakagawa M
  • 学会等名: The 4th Meeting of the International Society for Hydrocephalus and Cerebrospinal Fluid Disorders
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] アルツハイマー型認知症患者に対するIVIg療法の短期及び長期効果の検討
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦, 近藤正樹, 笠井高士, 田中章浩, 中川正法, 安宅鈴香, 嶋田裕之, 三木隆己, 森啓
  • 学会等名: 日本認知症学会学術集会(第31回)
  • 発表場所: 筑波
• [学会発表] 神経変性疾患のバイオマーカーの現状と課題
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦
  • 学会等名: 日本臨床薬理学会学術総会(第33回)
  • 発表場所: 宜野湾
  • 招待講演
• [図書] アクチュアル脳・神経疾患の臨床 (2013)
  • 著者名/発表者名: 笠井高士、徳田隆彦
  • 出版者: 中山書店
• [図書] アクチュアル脳・神経疾患の臨床 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦、中川正法
  • 出版者: 中山書店
• [図書] アクチュアル 脳・神経疾患の臨床 (2013)
  • 著者名/発表者名: 笠井高士, 徳田隆彦
  • 出版者: 中山書店
• [図書] アクチュアル 脳・神経疾患の臨床 (2013)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦, 中川正法
  • 出版者: 中山書店
• [図書] ガイドライン外来診療2012 (2012)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦、中川正法
  • 出版者: 日経メディカル開発社
• [図書] ガイドライン外来診療2012 (2012)
  • 著者名/発表者名: 徳田隆彦, 中川正法
  • 出版者: 日経メディカル開発社