インテグリン活性化制御分子における機能部位の同定と新たな治療法への展開

• 研究課題/領域番号: 23591416
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 田所 誠司 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (80403062)
• 研究分担者: 冨山 佳昭 大阪大学, 医学部附属病院, 准教授 (80252667) ; 金倉 譲 大阪大学, 大学院医学系研究科, 教授 (20177489)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2012年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 血栓止血 / インテグリン / シグナル伝達 / 血小板 / 血栓･止血学

研究概要

インテグリン活性化制御機構における、インテグリン活性化複合体(IAC)の役割を検討した。まず、ヒト巨核球系細胞株CMKを用いて、内因性インテグリンαIIbβ3の活性化を解析する実験系を確立した。次に、目的分子の発現を安定的に低下させたクローン化CMKを作製し、IACの構成分子を発現させて、kindlin-3とtalin-1によるαIIbβ3の活性化制御機構を明らかにした。さらに、ILK、PINCH、parvinが複合体を形成し、インテグリン活性化状態を安定化させることを示した。これらの研究結果は学術雑誌Experimental HematologyとPLoS Oneに発表した。

研究成果

• [雑誌論文] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial forαIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他4名
  • 雑誌名: Exp Hematol 巻: 41(1) ページ: 79-90
  • 査読あり
• [雑誌論文] The integrin-linked kinase-PINCH-parvin complex supports integrinαIIbβ3 activation (2013)
  • 著者名/発表者名: Honda S, Tadokor o S, Tomiyama Y他1名
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8(12)
  • 査読あり
• [雑誌論文] The integrin-linked kinase-PINCH-parvin complex supports integrin αIIbβ3 activation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Honda S, Shirotani-Ikejima H, Tadokoro S, Tomiyama Y, Miyata T.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8(12)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial for αIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK (2013)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokoro S, Kamae T, Kiyomizu K, Kashiwagi H, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Exp Hematol. 巻: 41(1) 号: 1 ページ: 79-90
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2012.09.011
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recognition of highly restricted regions in theβ-propeller domain ofαIIb by platelet-associated anti-αIIbβ3 autoantibodies in primary immune thrombocytopenia (2012)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他3名
  • 雑誌名: Blood 巻: 120(7) ページ: 1499-1509
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcl-1 and Bcl-xL regulate Bak/Bax-dependent apoptosis of the megakaryocytic lineage at multistages (2012)
  • 著者名/発表者名: Kodama T, Tadokor o S, Tomiyama Y他14名
  • 雑誌名: Cell Death Differ 巻: 19(11) ページ: 1856-1869
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recognition of highly restricted regions in the β-propeller domain of αIIb by platelet-associated anti-αIIbβ3 autoantibodies in primary immune thrombocytopenia. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Kashiwagi H, Nakazawa T, Tadokoro S, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Blood 巻: 120(7) 号: 7 ページ: 1499-1509
  • DOI: 10.1182/blood-2012-02-409995
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mcl-1 and Bcl-xL regulate Bak/Bax-dependent apoptosis of the megakaryocytic lineage at multistages. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kodama T, Hikita H, Kawaguchi T, Shigekawa M, Shimizu S, Hayashi Y, Li W, Miyagi T, Hosui A, Tatsumi T, Kanto T, Hiramatsu N, Kiyomizu K, Tadokoro S, Tomiyama Y, Hayashi N, Takehara T.
  • 雑誌名: Cell Death Differ. 巻: 19(11) 号: 11 ページ: 1856-1869
  • DOI: 10.1038/cdd.2012.88
  • 査読あり
• [雑誌論文] A potential role forα-actinin in inside-outαIIbβ3 signaling (2011)
  • 著者名/発表者名: Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他5名
  • 雑誌名: Blood 巻: 117(1) ページ: 250-258
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bleeding tendency and impaired platelet function in a patient carrying a heterozygous mutation in the thromboxane A2 receptor (2011)
  • 著者名/発表者名: Kamae T, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他4名
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 9(5) ページ: 1040-1048
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular analysis of a patient with type I Glanzmann thrombasthenia and clinical impact of the presence of anti-αIIbβ3 alloantibodies (2011)
  • 著者名/発表者名: Kashiwagi H, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他5名
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 93(1) ページ: 106-111
  • NAID: 10029532736
  • 査読あり
• [雑誌論文] A potential role for α-actinin in inside-out αIIbβ3 signaling (2011)
  • 著者名/発表者名: Tadokoro S, Nakazawa T, Kamae T, Kiyomizu K, Kashiwagi H, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Blood 巻: 117 ページ: 250-258
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bleeding tendency and impaired platelet function in a patient carrying a heterozygous mutation in the thromboxane A2 receptor (2011)
  • 著者名/発表者名: Kamae T, Kiyomizu K, Nakazawa T, Tadokoro S, Kashiwagi H, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 9 号: 5 ページ: 1040-1048
  • DOI: 10.1111/j.1538-7836.2011.04245.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular analysis of a patient with type I Glanzmann thrombasthenia and clinical impact of the presence of anti-αIIbβ3 alloantibodies. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kashiwagi H, Kiyomizu K, Kamae T, Nakazawa T, Tadokoro S, Takiguchi S, Doki Y, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 93 ページ: 106-111
  • NAID: 10029532736
  • 査読あり
• [学会発表] Primary ITP患者の血小板関連抗抗体のエピトープの同定と臨床経過に関する検討 (2013)
  • 著者名/発表者名: 清水一亘、田所誠司、金倉譲、冨山佳昭他2名
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2013-06-01
• [学会発表] αIIbβ3細胞内活性化変異と血小板顆粒放出異常 (2013)
  • 著者名/発表者名: 柏木浩和、田所誠司、冨山佳昭、金倉譲他1名
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形
  • 年月日: 2013-05-30
• [学会発表] An anti-GPIIb/IIIa Abs in primary ITP recognize highly restricted regions in GPIIb with clonality (2012)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他3名
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2012-10-20
• [学会発表] Platelet-associated anti-GPIIb/IIIa antibodies in primary immune thrombocytopenia recognizehighly restricted regions in the beta-propeller of GPIIb with clonality (2012)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他3名
  • 学会等名: The 17th Congress of the European Hematology Association
  • 発表場所: Amsterdam
  • 年月日: 2012-06-15
• [学会発表] ヒト巨核系細胞株CMKにおけるαIIbβ3の活性化にはagonist, talin-1, kindlin-3が必須である (2012)
  • 著者名/発表者名: 中澤剛士、田所誠司、金倉譲、冨山佳昭他3名
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-06-09
• [学会発表] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial forαIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y.他4名
  • 学会等名: Special Symposium on the Basic Science, The American Society of Hematology 53rd Annual meeting
  • 発表場所: San Diego
  • 年月日: 2011-12-13
• [学会発表] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial forαIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokor o S, Kanakura Y Tomiyama Y.他4名
  • 学会等名: The American Society of Hematology 53rd Annual meeting
  • 発表場所: San Diego
  • 年月日: 2011-12-10
• [学会発表] α-Actinin stabilizes integrins to a low-affinity ligand-binding state in resting platelets (2011)
  • 著者名/発表者名: Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他5名
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto
  • 年月日: 2011-07-26
• [学会発表] α-Actinin stabilizes integrins to a low-affinity ligand-binding state in resting platelets. (2011)
  • 著者名/発表者名: Tadokoro S, Nakazawa T, Kamae T, Kiyomizu K, Kashiwagi H, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto, Japan
• [学会発表] Agonist induced αIIbβ3 activation in genetically engineered human megakaryoblastic cell line, CMK. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Kamae T, Kiyomizu K, Tadokoro S, Honda S, Kashiwagi H, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto, Japan
• [学会発表] Identification of epitopes and critical residues for binding of platelet-associated anti-GPIIbIIIa autoantibodies in patients with chronic immune thrombocytopenia. (2011)
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Kashiwagi H, Nakazawa T, Kamae T, Tadokoro S, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto, Japan
• [学会発表] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial for αIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokoro S, Kamae T, Kiyomizu K, Kashiwagi H, Honda S, Tomiyama Y, Kanakura Y.
  • 学会等名: The American Society of Hematology 53rd Annual meeting
  • 発表場所: San Diego, USA
• [学会発表] Agonist stimulation, talin-1, and kindlin-3 are crucial for αIIbβ3 activation in a human megakaryoblastic cell line, CMK. (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokoro S, Kamae T, Kiyomizu K, Kashiwagi H, Honda S, Tomiyama Y, Kanakura Y.
  • 学会等名: Special Symposium on the Basic Science, The American Society of Hematology 53rd Annual meeting
  • 発表場所: San Diego, USA
• [学会発表] Agonist inducedαIIbβ3 activation in genetically engineered human megakaryoblastic cell line, CMK
  • 著者名/発表者名: Nakazawa T, Tadokor o S, Kanakura Y, Tomiyama Y他4名
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] Identification of epitopes and critical residues for binding of platelet-associated anti-GPIIbIIIa autoantibodies in patients with chronic immune thrombocytopenia
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Tadokoro S, Kanakura Y, Tomiyama Y他4名
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] αIIbβ3細胞内活性化変異と血小板顆粒放出異常
  • 著者名/発表者名: 柏木浩和、清水一亘、田所誠司、冨山佳昭、金倉譲
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形国際ホテル（山形県）
• [学会発表] Primary ITP患者の血小板関連抗αIIbβ3抗体のエピトープの同定と臨床経過に関する検討
  • 著者名/発表者名: 清水一亘、柏木浩和、加藤恒、田所誠司、本田繁則、金倉譲、冨山佳昭
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形国際ホテル（山形県）
• [学会発表] Platelet-associated anti-GPIIb/IIIa antibodies in primary immune thrombocytopenia recognize highly restricted regions in the beta-propeller of GPIIb with clonality
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Kashiwagi H, Nakazawa T, Tadokoro S, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y.
  • 学会等名: The 17th Congress of the European Hematology Association
  • 発表場所: Amsterdam, Netherlands
• [学会発表] ヒト巨核系細胞株CMKにおけるαIIbβ3 の活性化にはagonist, talin-1, kindlin-3が必須である。
  • 著者名/発表者名: 中澤剛士、田所誠司、清水一亘、柏木浩和、本田繁則、金倉 譲、冨山佳昭
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 東京、ハイアットリージェンシー東京
• [学会発表] ITP患者のPA anti-GPIIｂ/IIIa抗体の多くはGPIIb βプロペラ領域の極めて限定された部位に結合する
  • 著者名/発表者名: 清水一亘、柏木浩和、中澤剛士、田所誠司、本田繁則、金倉 譲、冨山佳昭
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 東京、ハイアットリージェンシー東京
• [学会発表] A anti-GPIIb/IIIa Abs in primary ITP recognize highly restricted regions in GPIIb with clonality
  • 著者名/発表者名: Kiyomizu K, Kashiwagi H, Nakazawa T, Tadokoro S, Honda S, Kanakura Y, Tomiyama Y
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都、国立京都国際会館
• [図書] 血小板インテグリンの負の調節因子 (2013)
  • 著者名/発表者名: 田所誠司, (高久史麿、小澤敬也、坂田洋一、金倉譲、小島勢二編)
  • 総ページ数: 247
  • 出版者: Annual Review
• [図書] Annual Review血液2013（高久史麿、小澤敬也、坂田洋一、金倉譲、小島勢二編） (2013)
  • 著者名/発表者名: 田所誠司
  • 総ページ数: 247
  • 出版者: 中外医学社