血友病治療に対する人工多能性幹細胞の応用

• 研究課題/領域番号: 23591427
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 大森 司 自治医科大学, 医学部, 講師 (70382843)
• 研究分担者: 窓岩 清治 自治医科大学, 分子病態治療研究センター分子病態研究部, 講師 (70296119) ; 三室 淳 自治医科大学, 医学部, 准教授 (10221607)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円); 2013年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2012年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 遺伝子細胞治療 / 血友病 / 人工多能性幹細胞 / iPS細胞

研究概要

血友病に対する人工多能性幹細胞（iPSC）を用いた細胞治療の開発を検討した．C57BL/6間葉系幹細胞に山中4因子を導入し，iPS細胞を得た．レンチウイルスベクターを用いて血液凝固第VIII因子（FVIII）を遺伝子導入し，30-100％の凝固因子活性をもつiPS細胞株を樹立した．この細胞をヌードマウスに皮下投与を行うと奇形腫の形成に伴い，血中の凝固因子抗原量がヒト治療域に達した． EF1αプロモーターがiPS細胞で長期にわたり安定して遺伝子を発現することを明らかとした．血友病BマウスiPS細胞を樹立し，キメラ系性能を確認した．この樹立したiPS細胞からFIXを強発現する細胞株を得た．

研究成果

• [雑誌論文] Production of functional coagulation factor VIII from iPSCs using a lentiviral vector (2014)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y, Ohmori T, Mimuro J, Madoiwa S, Inoue M, Hasegawa M, Ozawa K, and Sakata Y
  • 雑誌名: Haemophilia 巻: 20
• [雑誌論文] Production of functional coagulation factor VIII from iPSCs using a lentiviral vector (2014)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y, Ohmori T, Mimuro J, Madoiwa S, Inoue M, Hasegawa M, Ozawa K, and Sakata Y.
  • 雑誌名: Haemophilia 巻: 20 号: 1
  • DOI: 10.1111/hae.12311
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of factor VII ameliorates bleeding diathesis of factor VIII-deficient mice with inhibitors (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasumoto A, Madoiwa S, Kashiwakura Y, Ishiwata A, Ohmori T, Mizukami H, Ozawa K, Sakata Y, Mimuro J
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 131 ページ: 444-449
• [雑誌論文] Minimizing the Inhibitory Effect of Neutralizing Antibody for Efficient Gene Expression in the Liver With Adeno-associated Virus 8 Vectors (2013)
  • 著者名/発表者名: Mimuro J, Mizukami H, Hishikawa S, Ikemoto T, Ishiwata A, Sakata A, Ohmori T, Madoiwa S, Ono F, Ozawa K, Sakata Y
  • 雑誌名: Mol Ther 巻: 21 ページ: 318-323
• [雑誌論文] Genetically modified adipose tissue-derived stem/stromal cells, using simian immunodeficiency virus-based lentiviral vectors, in the treatment of hemophilia B (2013)
  • 著者名/発表者名: Watanabe N, Ohashi K, Tatsumi K, Utoh R, Shim IK, Kanegae K, Kashiwakura Y, Ohmori T, Sakata Y, Inoue M, Hasegawa M, Okano T
  • 雑誌名: Hum Gene Ther 巻: 24 ページ: 283-294
• [雑誌論文] Porcine model of hemophilia A (2012)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y, Mimuro J, Onishi A, Iwamoto M, Madoiwa S, Fuchimoto D, Suzuki S, Suzuki M, Sembon S, Ishiwata A, Yasumoto A, Sakata A, Ohmori T, Hashimoto M, Yazaki S, Sakata Y
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 7
• [雑誌論文] Intra-articular injection of mesenchymal stem cells expressing coagulation factor ameliorates hemophilic arthropathy in factor VIII-deficient mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y, Ohmori T, Mimuro J, Yasumoto A, Ishiwata A, Sakata A, Madoiwa S, Inoue M, Hasegawa M, Ozawa K, and Sakata Y
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 10 ページ: 1802-1813
• [雑誌論文] Immune response against serial infusion of factor VIII antigen through an implantable venous-access device system in haemophilia A mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Madoiwa S, Kobayashi E, Kashiwakura Y, Sakata A, Yasumoto A, Ohmori T, Mimuro J, Sakata Y
  • 雑誌名: Haemophilia 巻: 18
• [雑誌論文] Intra-articular injection of mesenchymal stem cells expressing coagulation factorameliorates hemophilic arthropathy in factor VIII-deficient mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura, Y
  • 雑誌名: J Thromb Haemost. 巻: 10(9) 号: 9 ページ: 1802-1813
  • DOI: 10.1111/j.1538-7836.2012.04851.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Porcine model of hemophilia a. PLoS One. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 7(11) 号: 11 ページ: e49450-e49450
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0049450
  • 査読あり
• [雑誌論文] Immune response against serial infusion of factor VIII antigen through an implantable venous-access device system in haemophilia A mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Madoiwa, S., et al.
  • 雑誌名: Haemophilia 巻: 18 号: 3
  • DOI: 10.1111/j.1365-2516.2011.02686.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lack of association between serum paraoxonase-1 activity and residual platelet aggregation during dual anti-platelet therapy (2012)
  • 著者名/発表者名: Ohmori, T., et al.
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 129 号: 4 ページ: e36-e40
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2011.10.033
  • 査読あり
• [雑誌論文] FTY720 improves functional recovery after spinal cord injury by primarily nonimmunomodulatory mechanisms (2012)
  • 著者名/発表者名: Norimatsu Y, Ohmori T, Kimura A, Madoiwa S, Mimuro J, Seichi A, Yatomi Y, Hoshino Y, Sakata Y.
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 180(4) 号: 4 ページ: 1625-35
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2011.12.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Degradation of cross-linked fibrin by leukocyte elastase as alternative pathway for plasmin-mediated fibrinolysis in sepsis-induced disseminated intravascular coagulation. (2011)
  • 著者名/発表者名: Madoiwa, S. Tanaka, H. Nagahama, Y. Dokai, M. Kashiwakura, Y. Ishiwata, A. Sakata, A. Yasumoto, A. Ohmori, T. Mimuro, J. Sakata, Y.
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 127 号: 4 ページ: 349-355
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2010.12.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Local regulation of neutrophil elastase activity by endogenous alpha1-antitrypsin in lipopolysaccharide-primed hematological cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Dokai, M., Madoiwa, S., Yasumoto, A., Kashiwakura, Y., Ishiwata, A., Sakata, A., Makino, N., Ohmori, T., Mimuro, J., and Sakata, Y.
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 128 号: 3 ページ: 283-292
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2011.04.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Predictive blood coagulation markers for early diagnosis of venous thromboembolism after total knee joint replacement (2011)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, H. Madoiwa, S. Sekiya, H. Nagahama, Y. Matsuura, S. Kariya, Y. Ohmori, T. Mimuro, J. Hoshino, Y. Hayasaka, S. Sakata, Y.
  • 雑誌名: Thromb Res 巻: 128 号: 6 ページ: e137-e143
  • DOI: 10.1016/j.thromres.2011.07.030
  • 査読あり
• [学会発表] Development of a cell-based therapy for treating hemophilic arthropathy by local injection of transduced MSCs (2013)
  • 著者名/発表者名: 大森司
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形
• [学会発表] 血友病Aクローンブタ (2013)
  • 著者名/発表者名: 柏倉裕志、三室淳、大西彰、岩元正樹、窓岩清治、淵本大一郎、鈴木俊一、鈴木美佐枝、千本昭一郎、石渡彰、安本篤史、坂田飛鳥、大森司、橋本径子、矢崎智子、坂田洋一
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会, (日本血栓止血学会誌)
  • 発表場所: 山形
• [学会発表] 人工多能性幹細胞を用いた新規血友病治療法に対する基礎的検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 柏倉裕志、大森司、坂田飛鳥、窓岩清治、井上誠、長谷川護、三室淳、坂田洋一
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] Dose-respnse relationship of factor IX expression in non-human orimates using AAV8-based vector (2012)
  • 著者名/発表者名: 水上浩明、三室淳、塚原智典、卜部匡司、久米晃浩、大森司、窓岩清治、坂田洋一、小澤敬也
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都
• [学会発表] FVIII遺伝子導入MSCの関節内移植は血友病Aマウスの血友病性関節症を改善する (2012)
  • 著者名/発表者名: 柏倉裕志,大森司,三室淳,安本篤史,石渡彰,坂田飛鳥,窓岩清治,井上誠,長谷川護,小澤敬也,坂田洋一
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 第VIII因子感作血友病マウスにおけるマイクロポートを用いた連続的抗原投与モデルの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 窓岩 清治，小林 英司，坂田 飛鳥，柏倉 裕志，大森 司，三室 淳，坂田 洋一
  • 学会等名: 第34回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] Intra-articular injection of autologous mesenchymal stem cells ameliorates hemophilic arthropathy in factor VIII-deficient mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y, Ohmori T, Mimuro J, Yasumoto A, Ishiwata A, Sakata A, Madoiwa S, Inoue M, Hasegawa M, Watanabe N, Tatsumi K, Ohashi K, Okano T, Sakata Y
  • 学会等名: ISTH2011.XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis.57^<th> Annual SSC Meeting
• [学会発表] Intra-articular injection of autologous mesenchymal stem cells ameliorates hemophilic arthropathy in factor VIII-deficient mice (2011)
  • 著者名/発表者名: Kashiwakura Y, Ohmori T, Mimuro J, Yasumoto A, Ishiwata A, Sakata A, Madoiwa S, Inoue M, Hasegawa M, Watanabe N, Tatsumi K, Ohashi K, Okano T and Sakata Y
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] Application of lentiviral vectors to therapies for inherited bleeding disorders and research into blood cell signal transduction (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohmori T
  • 学会等名: Aso International Meeting(招待講演)
  • 発表場所: Kumamoto
• [学会発表] Overexpression of factor VII ameliorates bleeding diathesis of FVIII-deficient mice with inhibitors
  • 著者名/発表者名: 安本 篤史、窓岩 清治、柏倉 裕志、石渡 彰、大森 司、水上 浩明 、小澤 敬也、坂田 洋一 、三室 淳
  • 学会等名: 第75回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] Development of cell-based therapy for treating hemophilic arthropathy by local injection of transduced MSCs
  • 著者名/発表者名: Ohmori T, Kashiwakura Y, Mimuro J, Yasumoto A, Ishiwata A, Sakata A, Madoiwa S, Inoue M, Hasegawa M, Ozawa K, and Sakata Y
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形
  • 招待講演
• [学会発表] 血友病Aクローンブタ
  • 著者名/発表者名: 柏倉裕志，三室 淳，大西 彰，岩本正樹，窓岩清治，渕本大一郎，鈴木俊一，鈴木美佐枝，千本昭一郎，石渡 彰，安本 篤，坂田飛鳥，大森 司，橋本経子，矢崎智子，坂田洋一
  • 学会等名: 第35回日本血栓止血学会学術集会
  • 発表場所: 山形
• [図書] Stem Cells and Cancer Stem Cells, volume 2 - Chapter 11 (2011)
  • 著者名/発表者名: Ohmori T, and Sakata Y
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: Springer