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新規微小結晶マウント法とキセノン加圧誘導体調製法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 23600016
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 量子ビーム科学
研究機関公益財団法人高輝度光科学研究センター

研究代表者

熊坂 崇  公益財団法人高輝度光科学研究センター, タンパク質結晶解析推進室, 副主席研究員 (30291066)

連携研究者 牧野 正知  島根県産業技術センター, 研究員 (30529582)
研究期間 (年度) 2011-04-28 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
5,460千円 (直接経費: 4,200千円、間接経費: 1,260千円)
2013年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2012年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2011年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
キーワード結晶解析 / タンパク質 / 結晶構造解析 / 希ガス / 微小結晶 / 試料処理 / 機器分析 / 蛋白質
研究成果の概要

放射光マイクロビームは蛋白質結晶学にも新展開を導き、10 um程度の微結晶で原子分解能の構造解析を可能にした。しかし研究開始当時の2011年にも微結晶の操作は難しかった。課題解決のため、細胞へのマイクロインジェクションを参考に新結晶マウント法を開発した。
ガラスの硬さを生かして作成した先端径15 umのテーパー形状のキャピラリは結晶を保持しつつ、凍結も可能にした。細さゆえ溶媒が減らせ、散乱X線を減らす効果が得られた。耐圧性を利用したガス加圧では、ねじ式ピンにキャピラリを取付け、加圧装置に直接つないだ。簡単な操作で卵白リゾチーム結晶のキセノン誘導体を作成でき、異常分散効果による位相決定も実現した。

報告書

(5件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実施状況報告書
  • 2012 実施状況報告書
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2013 2012 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件) 図書 (1件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] A convenient tool for gas derivatization using fine-needle capillary mounting for protein crystals.2013

    • 著者名/発表者名
      Mizuno, N., Makino, M., Kumasaka, T.
    • 雑誌名

      J. Sync. Rad.

      巻: 20 号: 6 ページ: 999-1002

    • DOI

      10.1107/s0909049513021584

    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Fine-needle capillary mounting for protein microcrystals.2012

    • 著者名/発表者名
      M. Makino, I. Wada, N. Mizuno, K. Hirata, N. Shimizu, T. Hikima, M. Yamamoto and T. Kumasaka
    • 雑誌名

      J. Appl. Cryst.

      巻: 45 号: 4 ページ: 785-788

    • DOI

      10.1107/s0021889812024545

    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Fine-needleキャピラリーを用いたタンパク質結晶マウント法2012

    • 著者名/発表者名
      水野伸宏、牧野正知、和田いづみ、平田邦生、引間孝明、山本雅貴、熊坂崇
    • 学会等名
      平成24年度日本結晶学会年会
    • 発表場所
      東北大学(宮城県仙台市)
    • 関連する報告書
      2012 実施状況報告書
  • [学会発表] Advanced Crystal Mounting Tool for Gas Pressurization Improves Efficiency of Xenon-Derivatization

    • 著者名/発表者名
      Nobuhiro Mizuno, Masatomo Makino, Takashi Kumasaka
    • 学会等名
      The 12th Conference of the Asia Crystallographic Association
    • 発表場所
      HKUST, Hong Kong
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [図書] Fine-needleキャピラリーを用いたマウント法(「タンパク質結晶の最前線」所収)2013

    • 著者名/発表者名
      水野伸宏, 熊坂崇
    • 総ページ数
      9
    • 出版者
      シーエムシー出版
    • 関連する報告書
      2013 実施状況報告書
  • [産業財産権] 微小試料用キャピラリー2012

    • 発明者名
      熊坂崇,牧野正知,桑本いづみ,山本雅貴
    • 権利者名
      熊坂崇,牧野正知,桑本いづみ,山本雅貴
    • 産業財産権番号
      2012-018603
    • 出願年月日
      2012
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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