MT1‐MMPの中心体制御を介した新規がん形質転換機構の解明

• 研究課題/領域番号: 23650592
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 腫瘍生物学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 三木 義男 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (10281594)
• 研究分担者: 中西 啓 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 特任准教授 (50321790)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: ゲノム安定性 / 発がん / がん抑制遺伝子 / 乳がん / MT1-MMP / BRCA2 / 中心体

研究概要

BRCA2はDNA修復、複製、中心体増幅、および細胞分裂において重要な多機能の腫瘍抑制タンパク質である。我々はヒト乳がん細胞株MCF7において、野生型BRCA2(分子量:384kDa)の他に分子量250kDaのBRCA2フラグメントを見出した。これは他の乳がん細胞株SK-BR-3や子宮頸がん由来のHeLaS3でも同様に観察されが,良性乳腺繊維嚢胞症由来のMCF10Aや正常乳腺上皮由来のHMECでは検出されなかった。我々は多重反応モニタリング法(MRM)によりこの250kDaのタンパク質がBRCA2であることを確認した。次にBRCA2を切断する可能性のあるプロテアーゼとして細胞膜結合型マトリクスメタロプロテアーゼMT1-MMPを考え、BRCA2のN末から約250kDaの位置にMT1-MMPによる切断部位を見出し、この推定切断部位を含むリコンビナントタンパクを基質としたinvitro解析で、MT1-MMPによるリコンビナントタンパクの切断を確認した。この切断は、MT1-MMPの阻害剤によって抑制された。そこで、切断型BRCA2の機能を明らかにするために、BRCA2の切断端に対する抗体を作成し、各々N端側BRCA2フラグメント(N-BRCA2)、C端側BRCA2フラグメント(C-BRCA2)を特異的に認識することを確認した。これを用いて、C-BRCA2が核fociを形成すること、10Gyの放射線照射後、野生型BRCA2の核fociは核中心部から核膜に向かい蛍光強度が増加するのに対しC-BRCA2の核fociの蛍光強度は核内均一であった。以上より、我々はBRCA2がMT1-MMPの基質であり、切断型C-BRCA2が組換え修復や乳がん発生に重要な役割を果たす可能性を示した。

研究成果

• [雑誌論文] Transforming mutations of RAC guanosine triphosphatases in human cancers (2013)
  • 著者名/発表者名: Kawazu, M., Ueno, T., Kontani, K., Ogita, Y., Ando, M., Fukumura, K., Yamato, A., Soda, M., Takeuchi, K., Miki, Y., Yamaguchi, H., Yasuda, T., Naoe, T., Yamashita, Y., Katada, T., Choi, Y.L. and Mano, H
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A 巻: 110 ページ: 3029-34
• [雑誌論文] (2013)
  • 著者名/発表者名: Kawazu M, Ueno T, Kontani K, Ogita Y, Ando M, Fukumura K, Yamato A, Soda M, Takeuchi K, Miki Y, Yamaguchi H, Yasuda T, Naoe T,Yamashita Y, Katada T, Choi YL, Mano H,
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A 巻: 110 号: 8 ページ: 3029-3034
  • DOI: 10.1073/pnas.1216141110
  • 査読あり
• [雑誌論文] Whole-exome sequencing of human pancreatic cancers and characterization of genomic instability caused by MLH1 haploinsufficiency and complete deficiency (2012)
  • 著者名/発表者名: Wang, L., Tsutsumi, S., Kawaguchi, T., Nagasaki, K., Tatsuno, K., Yamamoto, S., Sang, F., Sonoda, K., Sugawara, M., Saiura, A., Hirono, S., Yamaue, H., Miki, Y., Isomura, M., Totoki, Y., Nagae, G., Isagawa, T., Ueda, H., Murayama-Hosokawa, S., Shibata, T., Sakamoto, H., Kanai, Y., Kaneda, A., Noda, T. and Aburatani, H
  • 雑誌名: Genome Res 巻: 22 ページ: 208-19
• [雑誌論文] DYRK2 priming phosphorylation of c-Jun and c-Myc modulates cell cycle progression in human cancer cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Taira, N., Mimoto, R., Kurata, M., Yamaguchi, T., Kitagawa, M., Miki, Y. and Yoshida, K
  • 雑誌名: J Clin Invest 巻: 122 ページ: 859-72
• [雑誌論文] Programmed cell death 6, a novel p53-responsive gene, targets to the nucleus in the apoptotic response to DNA damage (2012)
  • 著者名/発表者名: Suzuki, K., Dashzeveg, N., Lu, Z.G.,Taira, N., Miki, Y. and Yoshida, K
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 103 ページ: 1788-94
• [雑誌論文] Clinical impact of intraoperative detection of carcinoembryonic antigen mRNA in pleural lavage specimens from nonsmall cell lung cancer patients (2012)
  • 著者名/発表者名: Satoh, Y., Sugai, S., Uehara, H., Mun, M., Sakao, Y., Okumura, S., Nakagawa, K., Ishikawa, Y., Miki, Y. and Miyata, S
  • 雑誌名: Thorac Cardiovasc Surg 巻: 60 ページ: 533-40
• [雑誌論文] Reduction of NOTCH1 expression pertains to maturation abnormalities of keratinocytes in squamous neoplasms (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto, K., Fujii, T., Kawachi, H., Miki, Y., Omura, K., Morita, K., Kayamori, K., Katsube, K. and Yamaguchi, A
  • 雑誌名: Lab Invest 巻: 92 ページ: 688-702
• [雑誌論文] Expression of basal cell keratin 15 and keratin 19 in oral squamous neoplasms represents diverse pathophysiologies (2012)
  • 著者名/発表者名: Khanom, R., Sakamoto, K., Pal, S.K., Shimada, Y., Morita, K., Omura, K., Miki, Y. and Yamaguchi, A
  • 雑誌名: Histol Histopathol 巻: 27 ページ: 949-59
• [雑誌論文] High level of miR-21, miR-10b, and miR-31 expression in bilateral vs. unilateral breast carcinomas (2012)
  • 著者名/発表者名: Iyevleva, A.G., Kuligina, E., Mitiushkina, N.V., Togo, A.V., Miki, Y. and Imyanitov, E.N
  • 雑誌名: Breast Cancer Res Treat 巻: 131 ページ: 1049-59
• [雑誌論文] A genome-wide association study identifies a genetic variant in the SIAH2 locus associated with hormonal receptor-positive breast cancer in Japanese (2012)
  • 著者名/発表者名: Elgazzar, S., Zembutsu, H., Takahashi, A., Kubo, M., Aki, F., Hirata, K., Takatsuka, Y., Okazaki, M., Ohsumi, S., Yamakawa, T., Sasa, M., Katagiri, T., Miki, Y. and Nakamura, Y
  • 雑誌名: J Hum Genet 巻: 57 ページ: 766-71
  • NAID: 10031145883
• [雑誌論文] BRCA遺伝子と個別化治療.がん分子標的治療 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 雑誌名: がん種別の個別化治療の最前線 巻: 10巻1号 ページ: 13-18
• [雑誌論文] 遺伝性乳癌卵巣癌診療の新時代 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 雑誌名: BRCA1とBRCA2遺伝子産物の機能基礎から臨床.癌と化学療法 巻: 39巻4号 ページ: 498-501
• [雑誌論文] 乳癌の分子生物学と発癌機序発癌機序乳癌の発癌機序概論 (2012)
  • 著者名/発表者名: 斉藤広子,三木義男
  • 雑誌名: 乳癌(第2版)-基礎と臨床の最新研究動向- 巻: 70巻増刊7 ページ: 92-96
• [雑誌論文] A genome-wide association study identifies a genetic variant in the SIAH2 locus associated with (2012)
  • 著者名/発表者名: Elgazzar S,
  • 雑誌名: J Hum Genet 巻: 57 号: 12 ページ: 766-71
  • DOI: 10.1038/jhg.2012.108
  • 査読あり
• [雑誌論文] Programmed cell death 6, a novel p53-responsive gene, targets to the nucleus in the apoptotic response to DNA damage. (2012)
  • 著者名/発表者名: Kazuho Suzuki
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 103 号: 10 ページ: 1788-1794
  • DOI: 10.1111/j.1349-7006.2012.02362.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of basal cell keratin 15 and keratin 19 in oral squamous neoplasms represents diverse pathophysiologies. (2012)
  • 著者名/発表者名: Khanom R,
  • 雑誌名: Histol Histopathol. 巻: 27 ページ: 949-59
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduction of NOTCH1 expression pertains to maturation abnormalities of keratinocytes in squamous neoplasms (2012)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto K, Fujii T, Kawachi H, Miki Y, Omura K, Morita KI, Kayamori K, Katsube KI, Yamaguchi A
  • 雑誌名: Laboratory investigation 巻: (Epub ahead of print) 号: 5 ページ: 688-702
  • DOI: 10.1038/labinvest.2012.9
  • 査読あり
• [雑誌論文] DYRK2 priming phosphorylation of c-Jun and c-Myc modulates cell cycle progression in human cancer cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Taira N., et al
  • 雑誌名: The Journal of Clinical Investigation 巻: 122 号: 3 ページ: 859-872
  • DOI: 10.1172/jci60818
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical impact of intraoperative detection of carcinoembryonic antigen mRNA in pleural lavage specimens from nonsmall cell lung cancer patients (2012)
  • 著者名/発表者名: Satoh Y, Sugai S, Uehara H, Mun M, Sakao Y, Okumura S, Nakagawa K, Ishikawa Y, Miki Y, Miyata S.
  • 雑誌名: Thorac Cardiovasc Surg 巻: 60 号: 8 ページ: 533
  • DOI: 10.1055/s-0031-1298066
  • 査読あり
• [雑誌論文] Whole-exome sequencing of human pancreatic cancers and characterization of genomic instability caused by MLH1 haploinsufficiency and complete deficiency (2012)
  • 著者名/発表者名: Wang L, Tsutsumi S, Kawaguchi T,Nagasaki K, Tatsuno K, Yamamoto S, SangF, Sonoda K, Sugawara M, Saiura A,Hirono S, Yamaue H, Miki Y, Isomura M,Totoki Y, Nagae G, Isagawa T, Ueda H,Murayama-Hosokawa S, Shibata T,Sakamoto H, Kanai Y, Kaneda A, Noda T,Aburatani H
  • 雑誌名: Genome Research 巻: 22(2) 号: 2 ページ: 208-19
  • DOI: 10.1101/gr.123109.111
  • 査読あり
• [雑誌論文] High level of miR-21, miR-10b, and miR-31 expression in bilateral vs. unilateral breast carcinomas. (2012)
  • 著者名/発表者名: Iyevleva AG,
  • 雑誌名: Breast Cancer Res Treat. 巻: 13 号: 3 ページ: 1049-59
  • DOI: 10.1007/s10549-011-1845-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] ［遺伝性乳癌卵巣癌診療の新時代］BRCA1とBRCA2遺伝子産物の機能 基礎から臨床 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 雑誌名: 癌と化学療法 巻: 39 ページ: 498-501
• [雑誌論文] ［がん種別の個別化治療の最前線］BRCA遺伝子と個別化治療 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 雑誌名: がん分子標的治療 巻: 10 ページ: 13-18
• [雑誌論文] ［乳癌(第2版)-基礎と臨床の最新研究動向-］乳癌の分子生物学と発癌機序 発癌機序 乳癌の発癌機序 概論(分子機構、多段階発癌機序を含めて) (2012)
  • 著者名/発表者名: 斉藤 広子
  • 雑誌名: 日本臨床 巻: 70巻増刊7 ページ: 92-96
• [雑誌論文] ［個別化薬物療法-始まっている臨床応用］分子標的薬の個別化医療 (2012)
  • 著者名/発表者名: 須貝 幸子
  • 雑誌名: 薬事 巻: 54 ページ: 919-923
• [雑誌論文] High level of miR-21, miR-10b, and miR-31 expression in bilateral vs. unilateral breast carcinomas. (2012)
  • 著者名/発表者名: Iyevleva AG, Kuligina ESh, Mitiushkina NV, Togo AV, Miki Y, Imyanitov EN.
  • 雑誌名: Breast Cancer Res Treat. 巻: 131 ページ: 1049-1059
  • 査読あり
• [雑誌論文] BRCA2 and nucleophosmin coregulate centrosome amplification and form a complex with the Rho effector kinase ROCK2. (2011)
  • 著者名/発表者名: Wang HF, Takenaka K, Nakanishi A, Miki Y.
  • 雑誌名: Cancer Res. 巻: 71 ページ: 68-77
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prospective randomized phase II study determines the clinical usefulness of genetic biomarkers for sensitivity to primary chemotherapy with paclitaxel in breast cancer. (2011)
  • 著者名/発表者名: Ito Y, Nagasaki K, Miki Y, Iwase T, Akiyama F, Matsuura M, Horii R, Makita M, Tokudome N, Ushijima M, Yoshimoto M, Takahashi S, Noda T, Hatake K.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 102 ページ: 130-6
  • NAID: 10029288759
  • 査読あり
• [雑誌論文] PKCδ regulates Mdm2 independently of p53 in the apoptotic response to DNA damage. (2011)
  • 著者名/発表者名: Hew HC, Liu H, Miki Y, Yoshida K.
  • 雑誌名: Mol Carcinog. 巻: 50 ページ: 719-31
  • 査読あり
• [学会発表] BRCA2の新規機能と合成致死理論に基づく新規乳癌治療法開発の可能性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木義男,中西啓
  • 学会等名: 第20回日本乳癌学会学術総会
  • 発表場所: 熊本市
• [学会発表] Hereditary breast/ovarian cancer -New development of the molecular diagnosis and treatment-遺伝性乳がん・卵巣がん症候群-分子診断・治療の新たな展開 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木義男,中西啓
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会シンポジウム
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] Phosphorylation of BRCA2 by Akt is involved in BRCA2-14-3-3 gamma interaction related to centrosome dynamics 中心体制御に関わるBRCA2‐14-3-3γ複合体形成にはAktによるBRCA2のリン酸化が関与する (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮口健,郭甜甜,三木義男,中西啓
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] Proteasome activity affects cancerous centrosome hypertrophy プロテアソームの活性は癌細胞における中心体の肥大化に影響する (2012)
  • 著者名/発表者名: 木村仁美,中西啓,三木義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] BRCA2 contributes success of cytokinesis through regulation ofnon-muscle myosin IIC ATPase activity乳癌原因遺伝子産物BRCA2はII型ミオシンIICのATPase活性の制御を通して細胞質分裂に働く (2012)
  • 著者名/発表者名: 高岡美帆,斉藤広子,中西啓,三木義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] The correlation of decorin and periostin indicated by the proteomics of phyllodes葉状腫瘍のプロテオーム解析から導いたdecorinとperiostinの関連性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 石場俊之,中西啓,高木洋子,笠原舞,杉本斉,永原誠,中川剛士,佐藤隆宣,杉原健一,三木義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] Phosphorylation of BRCA2 by Akt is involved in BRCA2-14-3-3 gamma interaction related to centrosome dynamics (2012)
  • 著者名/発表者名: Miyaguchi K,Miki Y, Nakanishi A
  • 学会等名: 15th International Congress on Hormonal Steroids and Hormones& Cancer
  • 発表場所: Kanazawa
• [学会発表] Hereditary breast/ovarian cancer -New development of the molecular diagnosis and treatment- 遺伝性乳がん・卵巣がん症候群-分子診断・治療の新たな展開- (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
  • 招待講演
• [学会発表] 遺伝性乳がん卵巣がんの現状 問題点と展望 遺伝性乳がん原因遺伝子BRCA2の新規機能と新たな治療法開発の試み． (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第18回日本家族性腫瘍学会学術集会
  • 発表場所: 大阪市
  • 招待講演
• [学会発表] 乳癌新規予後予測因子Stathmin1の検討 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第20回日本乳癌学会学術総会
  • 発表場所: 熊本市
• [学会発表] Dysregulation of c-Jun/c-Myc expression by depletion of DYRK2 triggers tumorigenesis DYRK2の発現欠失によるc-Jun/c-Mycの制御異常は細胞の腫瘍化を引き起こす (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] Analysis of a centrosome localization signal （CLS） in BRCA2 BRCA2由来中心体局在化シグナル（CLS）の機能解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] BRCA2 contributes success of cytokinesis through regulation of non-muscle myosin IIC ATPase activity 乳癌原因遺伝子産物 BRCA2 は II型ミオシンIIC の ATPase 活性の制御を通して細胞質分裂に働く (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] The correlation of decorin and periostin indicated by the proteomics of phyllodes 葉状腫瘍のプロテオーム解析から導いたdecorinとperiostinの関連性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三木 義男
  • 学会等名: 第71回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 札幌市
• [学会発表] BRCA1/2研究の現状と展望 (2011)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 学会等名: 第17回日本家族性腫瘍学会学術集会(招待講演)
  • 発表場所: 京都市
• [学会発表] 遺伝性乳がん・卵巣がん症候群の分子遺伝 (2011)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 学会等名: 第47回北九州乳腺カンファレンス(招待講演)
  • 発表場所: 北九州市
• [学会発表] BRCA1/2遺伝子の分子生物学－遺伝子の発見から今、そして今後の展望－ (2011)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 学会等名: 第14回家族性腫瘍セミナー(招待講演)
  • 発表場所: 東大阪市
• [学会発表] New insights into the cellular function of BRCA2. (2011)
  • 著者名/発表者名: Miki Y, Takenaka K, Nakanishi A.
  • 学会等名: 70th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association(招待講演)
  • 発表場所: Nagoya, Japan,
• [学会発表] 網羅的遺伝子発現情報のがん個別化治療への展開 (2011)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 学会等名: 第35回日本頭頸部癌学会
  • 発表場所: 名古屋市
• [学会発表] BRCA1/2遺伝子検査の先進医療への取組み (2011)
  • 著者名/発表者名: 三木義男
  • 学会等名: 第19回日本乳癌学会学術総会
  • 発表場所: 仙台市
• [学会発表] 遺伝性乳癌・卵巣癌症候群－基礎から臨床－ (2011)
  • 著者名/発表者名: 三木義男、 斉藤広子、 中西啓
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第56回大会・第11回東アジア人類遺伝学会
  • 発表場所: 千葉市
• [学会発表] 切断型BRCA2の形成機序および機能解析
  • 著者名/発表者名: 中西啓,Nadila Wali,斉藤広子,大(1)研究代表者海,三木義男
  • 学会等名: 日本人類遺伝学会第57回大会
  • 発表場所: 新宿区
• [備考]
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/mri/section/genomics/mg/index.html
• [備考] 東京医科歯科大学 難治疾患研究所 分子遺伝分野
  • URL: http://www.tmd.ac.jp/mri/mgen/index_j.html