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酵素標識後に蛍光を発するスプリット蛍光タグの開発

研究課題

研究課題/領域番号 23656518
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関東京大学

研究代表者

山口 哲志  東京大学, 先端科学技術研究センター, 講師 (80398106)

研究期間 (年度) 2011 – 2012
研究課題ステータス 完了 (2012年度)
配分額 *注記
3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
キーワード蛍光標識 / 酵素 / 動物細胞 / タンパク質 / ペプチド / スプリットタグ / 細胞内導入 / ターンオンプローブ / トリプトファンジッパー / 細胞 / ペプチド連結酵素
研究概要

酵素を用いてタンパク質へ特異的に標識可能であり、また、標識して初めて蛍光を発するようなタグ配列-蛍光ラベル化剤のペアの開発を行った。その結果、ソルターゼによる特異的な連結反応後に2.6倍に蛍光が増大するペアを創製できた。そこで、細胞内での標識を可能にするため、細胞外で発現精製した連鎖球菌由来ソルターゼAを細胞内に導入して連結反応を行う方法を開発した。

報告書

(3件)
  • 2012 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (12件)

すべて 2013 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (10件)

  • [雑誌論文] Intracellular protein cyclization catalyzed by exogenously transduced Streptococcus pyogenes sortase A2013

    • 著者名/発表者名
      Jing Zhang
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience Bioengineering

      巻: 印刷中 号: 3 ページ: 298-301

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2013.03.006

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Enhancement of sortase A-mediated protein ligation by inducing a beta-hairpin structure around the ligation site2011

    • 著者名/発表者名
      Y. Yamamura, H. Hirakawa, S. Yamaguchi and T. Nagamune
    • 雑誌名

      chemical communications

      巻: 47 号: 16 ページ: 4742-4744

    • DOI

      10.1039/c0cc05334a

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Intracellular protein cyclization catalyzed by streptococcus pyogenes sortase A through protein transduction2012

    • 著者名/発表者名
      J. Zhang, S. Yamaguchi, H. Hirakawa, T.Nagamune
    • 学会等名
      The 18^th Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC2012)
    • 発表場所
      徳島, 徳島大学
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Enzymatic protein labeling using turn-on split fluorescent tag2012

    • 著者名/発表者名
      J. Zhang, S. Yamaguchi, S. Inoue, H.Hirakawa, T. Nagamune
    • 学会等名
      15^th International Biotechnology Symposiumand Exhibition (IBS2012)
    • 発表場所
      Daegu, Korea
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 光応答性分子修飾による蛋白質の細胞内局在制御2012

    • 著者名/発表者名
      前田泰一,山口哲志,長棟輝行
    • 学会等名
      第6回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      札幌,北海道大学
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 酵素反応でturn-onするスプリット蛍光タグの開発2012

    • 著者名/発表者名
      山口哲志,井上紫織,平川秀彦,長棟輝行
    • 学会等名
      第6回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      札幌,北海道大学
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Photo-assisted protein transduction into cytoplasm by modifying or mixing with fluorophore-conjugated poly-arginine peptides2011

    • 著者名/発表者名
      Y. Maeda, S. Yamaguchi, W. Ishihara, H.Hirakawa, T. Nagamune
    • 学会等名
      The 17^th Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC2011)
    • 発表場所
      Incheon, Korea
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Photo-assisted protein transduction into cytoplasm by modifying or mixing with fluorophore conjugated poly-arginine peptides2011

    • 著者名/発表者名
      Yasukazu Maeda, Satoshi Yamaguchi, Wataru Ishihara, Hidehiko Hirakawa, Teruyuki Nagamune
    • 学会等名
      The 17th Symposium of Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC 2011)
    • 発表場所
      Incheon, Korea
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [学会発表] 酵素反応でturn-onするスプリット蛍光タグの開発

    • 著者名/発表者名
      山口哲志
    • 学会等名
      第6回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      北海道大学高等教育推進機構(札幌)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 光応答性分子修飾による蛋白質の細胞内局在制御

    • 著者名/発表者名
      前田泰一
    • 学会等名
      第6回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      北海道大学高等教育推進機構(札幌)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Enzymatic protein labeling using turn-on split fluorescent tag

    • 著者名/発表者名
      Jing Zhang
    • 学会等名
      15th International Biotechnology Symposium and Exhibition (IBS2012)
    • 発表場所
      Daegu, Korea
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Intracellular Protein Cyclization Catalyzed by Streptococcus pyogenes Sortase A through Protein Transduction

    • 著者名/発表者名
      Jing Zhang
    • 学会等名
      The 19th Symposium of Young Asian Biochemical Engineers' Community (YABEC2012)
    • 発表場所
      徳島大学(徳島)
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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