抗体遺伝子への選択的変異導入におけるASF/SF2の新規機能の解明

• 研究課題/領域番号: 23657092
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 機能生物化学
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 金山 直樹 岡山大学, 大学院・自然科学研究科, 准教授 (70304334)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 抗体 / 親和性成熟 / 体細胞高頻度突然変異 / スプライシング因子 / ASF/SF2 / SRSF1 / 国際情報交流 / 米国

研究概要

抗原に対する抗体の親和性は、抗体遺伝子に起こる体細胞高頻度突然変異により向上する。本研究では、突然変異能を有するニワトリB細胞株DT40を用いて、選択的スプライシング因子ASF/SF2のアイソフォーム(ASF3)が、抗体遺伝子への変異導入に必須であることを見いだした。また、ASF3が抗体遺伝子の転写後プロセシングを制御することによって、変異導入装置の活性化と抗体遺伝子への標的化において重要な役割を担っていることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] la vitro substrate phosphorylation by Cg^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase kinase using guanosine-5' -triphosphate as a phosphate donor (2012)
  • 著者名/発表者名: S. Yurimoto, et al.
  • 雑誌名: BMC Biochemistry 巻: 13 号: 1 ページ: 27-27
  • DOI: 10.1186/1471-2091-13-27
  • 査読あり
• [雑誌論文] 胚中心における B 細胞のnegative selectionと濾胞樹状細胞 (2012)
  • 著者名/発表者名: 曲 正樹, 金山直樹, 大森 斉
  • 雑誌名: 臨床免疫・アレルギー科 巻: 58 ページ: 259-65
• [雑誌論文] 抗体遺伝子への突然変異能を有するニワトリB細胞株の機能拡張によるin vitroモノクローナル抗体作製・改良システム (2012)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹, 大森 斉
  • 雑誌名: 細胞工学 巻: 31 ページ: 1159-65
  • NAID: 40019445284
• [雑誌論文] Activation-induced cytidine deaminase (AID)-dependent somatic hypermutation requires a splice isoform of the serine/arginine-rich (SR) protein SRSF1 (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanehiro, Y., Ohmori, H.Kanayama, N., at al
  • 雑誌名: Proceeding of the National Academy of Sciences, USA 巻: 109 号: 4 ページ: 1216-1271
  • DOI: 10.1073/pnas.1120368109
  • 査読あり
• [雑誌論文] 胚中心における B 細胞のnegative selectionと濾胞樹状細胞 (2012)
  • 著者名/発表者名: 曲 正樹ら
  • 雑誌名: 臨床免疫・アレルギー科 巻: 58 ページ: 259-265
• [雑誌論文] 抗体遺伝子への突然変異能を有するニワトリB細胞株の機能拡張によるin vitroモノクローナル抗体作製・改良システム (2012)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹ら
  • 雑誌名: 細胞工学 巻: 31 ページ: 1159-1165
  • NAID: 40019445284
• [学会発表] 抗体遺伝子への突然変異能を有するニワトリB細胞株の抗体工学的応用による抗体機能改変 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹ら
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
  • 年月日: 2012-12-14
• [学会発表] DT40 細胞株を用いたin vitro抗体作製システムにおける, 抗原レセプターの刺激に依存した生存による抗原特異的抗体産生細胞の選択法の開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 渡邊康二, 金山直樹ら
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
  • 年月日: 2012-12-14
• [学会発表] スプライシング因子SRSF1 のアイソフォームSRSF1-3 は, R-loopを形成することでIgV高頻度突然変異を誘導する (2012)
  • 著者名/発表者名: 川口祐加, 金山直樹ら
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
  • 年月日: 2012-12-11
• [学会発表] A splicing isoform of the splicing factor SRSF1, SRSF1-3, has role in R-loop formation in IgV hypermutation (2012)
  • 著者名/発表者名: Kanayama Naoki et al.
  • 学会等名: 2012日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2012-12-05
• [学会発表] ヒト型抗体産生ニワトリB細胞株DT40 を用いた抗原特異的抗体の作製 (2012)
  • 著者名/発表者名: 川上夏奈江, 金山直樹ら
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2012-10-26
• [学会発表] 変異能力を有する培養B細胞株DT40 を用いた新規なタンパク質ディスプレーシステムの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 日笠卓哉, 金山直樹ら
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2012-10-26
• [学会発表] ニワトリB細胞株DT40-SWを用いた異種抗体改良システムの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐井燕, 金山直樹ら
  • 学会等名: 第64回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
  • 年月日: 2012-10-26
• [学会発表] AIDに依存したIgV変異には、SRタンパク質SRSF1のスプライスアイソフォームが必要である (2011)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹ら
  • 学会等名: 2011日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 幕張メッセ
  • 年月日: 2011-11-28
• [学会発表] AIDに依存したIgV変異には、ＳＲタンパク質ＳＲＳＦ１のスプライスアイソフォームが必要である (2011)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹、金広優一、藤堂景史、根岸美咲、福岡純司、曲正樹、Li Xialu、Manley, James L.、大森斉
  • 学会等名: 日本免疫学会
  • 発表場所: 幕張メッセ
• [学会発表] ヒト型抗体産生ニワトリＢ細胞株ＤＴ40を用いた抗原特異的抗体の作製
  • 著者名/発表者名: 川上夏奈江
  • 学会等名: 第64回 日本生物工学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 変異能力を有する培養Ｂ細胞株ＤＴ40を用いた新規なタンパク質ディスプレーシステムの開発
  • 著者名/発表者名: 日笠卓哉
  • 学会等名: 第64回 日本生物工学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] ニワトリＢ細胞株ＤＴ40-ＳＷを用いた異種抗体改良システムの構築
  • 著者名/発表者名: 佐井燕
  • 学会等名: 第64回 日本生物工学会大会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] A splicing isoform of the splicing factor SRSF1, SRSF1-3, has role in R-loop formation in IgV hypermutation.
  • 著者名/発表者名: 金山直樹
  • 学会等名: 2012 日本免疫学会総会・学術集会
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 抗体遺伝子への突然変異能を有するニワトリB細胞株の抗体工学的応用による抗体機能改変
  • 著者名/発表者名: 金山 直樹
  • 学会等名: 第35回 日本分子生物学会 年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
• [学会発表] スプライシング因子SRSF1のアイソフォームSRSF1-3は, R-loopを形成することでIgV高頻度突然変異を誘導する
  • 著者名/発表者名: 川口 祐加
  • 学会等名: 第35回 日本分子生物学会 年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
• [学会発表] DT40細胞株を用いたin vitro抗体作製システムにおける, 抗原レセプターの刺激に依存した生存による抗原特異的抗体産生細胞の選択法の開発
  • 著者名/発表者名: 渡邊 康二
  • 学会等名: 第35回 日本分子生物学会 年会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
• [図書] 次世代抗体医薬開発に向けた抗体工学の最前線 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹, 大森齊
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] 次世代抗体医薬開発に向けた抗体工学の最前線 監修：熊谷泉 第13章 ニワトリ抗体ライブラリーからの高親和性抗体の作製 (2012)
  • 著者名/発表者名: 金山直樹
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: シーエムシー出版