相同組換え現象を利用した簡便で有用な新規組換えウイルス作製システムの確立

• 研究課題/領域番号: 23658240
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 基礎獣医学・基礎畜産学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 三浦 智行 京都大学, ウイルス研究所, 准教授 (40202337)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2012年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 感染症 / 組換えウイルス / エイズ / SHIV / HIV-1mt / デングウイルス / ダニ媒介性脳炎ウイルス / 相同組換え / ウイルス / 動物モデル / 微生物

研究概要

従来型および新世代SHIVを用いて、重複領域の長さ、位置、相同性が相同組み換え効率に与える影響や遺伝子導入法、遺伝子導入細胞等の諸条件について検討し、最適条件を明らかにした。これにより、従来型および新世代SHIVをバックボーンとして種々のCCR5型HIV-1臨床分離株のenv領域を多様性を保持したまま組み換えることに成功した。更に、デングウイルスやダニ媒介性脳炎ウイルスへの適用にも成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Generation of a replication-competent chimeric simian-human immunodeficiency virus carrying env from subtype C clinical isolate through intracellular homologous recombination (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujita, Y., Otsuki, H., Watanabe, Y., Yasui, M., Kobayashi, T., Miura, T., and Igarashi, T
  • 雑誌名: Virology 巻: 436 ページ: 100-111
  • NAID: 120005434974
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a replication-competent simianhuman immunodeficiency virus, the neutralisation sensitivity of which can be enhanced in the presence of a small molecule CD4 mimic. (2013)
  • 著者名/発表者名: Otsuki, H., Hishiki, T., Miura, T., Hashimoto, C., Narumi, T., Tamamura, H., Yoshimura, K., Matsushita, S., and Igarashi, T.
  • 雑誌名: J. Gen. Virol. 巻: 94 号: 12 ページ: 2710-2716
  • DOI: 10.1099/vir.0.055590-0
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a replication-competent chimericsimian-human immunodeficiency virus carrying env from subtype C clinical isolate through intracellular homologous recombination. (2013)
  • 著者名/発表者名: Fujita, Y., Otsuki, H., Watanabe, Y.,Yasui, M., Kobayashi, T., Miura, T., and Igarashi, T.
  • 雑誌名: Virology 巻: 436 号: 1 ページ: 100-111
  • DOI: 10.1016/j.virol.2012.10.036
  • 査読あり
• [雑誌論文] No viral Evolution in the lymph Nodes of Simian Immunodecifiency Virus-Infected Rhesus Macaaues during Combined Antiretroviral Therapy (2013)
  • 著者名/発表者名: Oue M, et al.
  • 雑誌名: J Virol 巻: (In press) 号: 8 ページ: 4789-4793
  • DOI: 10.1128/jvi.03367-12
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantification system for the viral dynamics of a highly pathogenic simian/human immunodeficiency virus based on an in vitro experiment and a mathematical model. (2012)
  • 著者名/発表者名: Iwami, S., Holder, B. P., Beauchemin,C. A. A., Morita, S., Tada, T., Sato, K.,Igarashi, T., and Miura, T.
  • 雑誌名: Retrovirology 巻: 9 号: 1 ページ: 18-18
  • DOI: 10.1186/1742-4690-9-18
  • NAID: 120004920398
  • 査読あり
• [雑誌論文] Lymph nodes harbor viral reservoirs that cause rebound of plasma viremia in SIV-infected macaques upon cessation of combined antiretroviral therapy. (2012)
  • 著者名/発表者名: Horiike, M.
  • 雑誌名: Virology 巻: 423 号: 2 ページ: 107-118
  • DOI: 10.1016/j.virol.2011.11.024
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identifying viral parameters from in vitro cell cultures. (2012)
  • 著者名/発表者名: Iwami, S.
  • 雑誌名: Front. Microbiol. 巻: 3 ページ: 319-319
  • DOI: 10.3389/fmicb.2012.00319
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation of potent neutralizing monoclonal antibodies from an SIV-Infected rhesus macaque by phage display (2011)
  • 著者名/発表者名: Kuwata, T. et al.
  • 雑誌名: AIDS Res. Hum. Retroviruses 巻: 27 ページ: 487-500
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a monkey-tropic human immunodeficiency virus type 1 carrying env from a CCR5-tropic subtype C clinical isolate
  • 著者名/発表者名: Otsuki, H., Yoneda, M., Igarashi, T., and Miura, T
  • 雑誌名: Virology 巻: (in press)
  • NAID: 120005456020
  • 査読あり
• [雑誌論文] Generation of a replication-competent simianhuman immunodeficiency virus, the neutralisation sensitivity of which can be enhanced in the presence of a small molecule CD4 mimic
  • 著者名/発表者名: Otsuki, H., Hishiki, T., Miura, T., Hashimoto, C., Narumi, T., Tamamura, H., Yoshimura, K., Matsushita, S., and Igarashi, T
  • 雑誌名: J. Gen. Virol 巻: 94 ページ: 2710-2716
  • 査読あり
• [学会発表] CCR5 指向性を示す新規サル指向性HIV-1 はサル個体に持続感染する (2013)
  • 著者名/発表者名: 齊藤暁, 大附寛幸, 東濃篤徳, 鈴木紗織, 松田健太, 高橋尚史, 岩谷靖雅, 杉浦亙, 野間口雅子, 足立昭夫, 保富康宏, 俣野哲朗, 三浦智行, 明里宏文
  • 学会等名: 第27回日本エイズ学会学術集会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] CCR5 指向性を示す新規サル指向性HIV-1 はサル個体に持続感染する (2013)
  • 著者名/発表者名: 齊藤暁, 大附寛幸, 東濃篤徳, 鈴木紗織, 松田健太, 高橋尚史, 岩谷靖雅, 杉浦亙, 野間口雅子, 足立昭夫, 保富康宏, 俣野哲朗, 三浦智行, 明里宏文
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] CCR5 指向性サブタイプC エンベローを持つサル指向性 HIV-1のブタオザルにおける複製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸, 五十嵐樹彦, 三浦智行
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] 分泌型ルシフェラーゼ遺伝子を有するデングウイルス1 型レプリコンの構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博, 小林剛, 三浦智行, 五十嵐樹彦, 日紫喜隆行
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] ウイルスの標的細胞指向性はサル指向性HIV-1 の増殖に影響するか? (2013)
  • 著者名/発表者名: 齊藤暁, 大附寛幸, 東濃篤徳, 鈴木紗織, 松田健太, 高橋尚史, 岩谷靖雅, 杉浦亙, 保富康宏, 俣野哲朗, 三浦智行, 明里宏文
  • 学会等名: 第156回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] ウイルスの標的細胞指向性はサル指向性HIV-1の増殖に影響するか？ (2013)
  • 著者名/発表者名: 齊藤暁、大附寛幸、東濃篤徳、鈴木紗織、松田健太、高橋尚史、岩谷靖雅、杉浦亙、保富康宏、俣野哲朗、三浦智行、明里宏文
  • 学会等名: 第156回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] 分泌型ルシフェラーゼ遺伝子を有するデングウイルス1型レプリコンの構築 (2013)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博、小林剛、三浦智行、五十嵐樹彦、日紫喜隆行
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] CCR5指向性サブタイプCエンベローを持つサル指向性 HIV-1 のブタオザルにおける複製 (2013)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸、五十嵐樹彦、三浦智行
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] CCR5指向性を示す新規サル指向性HIV-1はサル個体に持続感染する (2013)
  • 著者名/発表者名: 齊藤暁、大附寛幸、東濃篤徳、鈴木紗織、松田健太、高橋尚史、岩谷靖雅、杉浦亙、野間口雅子、足立昭夫、保富康宏、俣野哲朗、三浦智行、明里宏文
  • 学会等名: 第61回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] CCR5指向性を示す新規サル指向性HIV-1はサル個体に持続感染する (2013)
  • 著者名/発表者名: 齊藤暁、大附寛幸、東濃篤徳、鈴木紗織、松田健太、高橋尚史、岩谷靖雅、杉浦亙、野間口雅子、足立昭夫、保富康宏、俣野哲朗、三浦智行、明里宏文
  • 学会等名: 第27回日本エイズ学会学術集会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] 細胞内相同組換えを利用したCCR5 指向性サブタイプC HIV-1 由来env を持つサル指向性HIV-1 の作出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸, 一瀬裕太郎, 小林剛, 五十嵐樹彦, 三浦智行
  • 学会等名: 第26回日本エイズ学会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] シベリア型ダニ媒介性脳炎ウイルスIR99-2f7株の感染性cDNAクローンの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 川岸崇裕, 加藤文博, 日向亮輔, 三浦智行, 小林剛, 五十嵐樹彦
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 中和感受性を増強する薬剤による抗HIV-1 治療戦略に向けた新規SHIV/アカゲザル評価モデルの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸, 一瀬裕太郎, 小林剛, 原田恵嘉, 吉村和久, 鳴海哲夫, 玉村啓和, 松下修三, 五十嵐樹彦, 三浦智行
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 霊長類エイズモデル感染病態に関わるウイルスゲノム基盤に関する研究 (2012)
  • 著者名/発表者名: 三浦智行, 大附寛幸, 米田舞, 一瀬裕太郎, 小林剛, 五十嵐樹彦
  • 学会等名: 第154回日本獣医学会
  • 発表場所: 岩手
• [学会発表] ダニ媒介性脳炎ウイルスCapsid欠損レプリコンの構築及びSingle-round infectious systemの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 日向亮輔
  • 学会等名: 第47回日本脳炎ウイルス生態学研究会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] Generation of monkey-tropic human immunodeficiency virus strains carrying a variety of CCR5-utilizing env genes from HIV-1 subtype C clinical isolates through intracellular homologous recombination. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hiroyuki Otsuki
  • 学会等名: 19th East Asia Joint Symposium on Biomedical Research
  • 発表場所: Seoul, Korea
• [学会発表] 抗デングウイルス活性を有する化合物の探索および作用機序の解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 加藤文博
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 中和感受性を増強する薬剤による抗HIV-1治療戦略に向けた新規SHIV/アカゲザル評価モデルの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] シベリア型ダニ媒介性脳炎ウイルスＩＲ９９-２ｆ７株の感染性ｃＤＮＡクローンの構築 (2012)
  • 著者名/発表者名: 川岸崇裕
  • 学会等名: 第60回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 大阪
• [学会発表] 細胞内相同組換えを利用したCCR5指向性サブタイプＣ HIV-1由来envを持つサル指向性HIV-1の作出 (2012)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸
  • 学会等名: 第26回日本エイズ学会
  • 発表場所: 神奈川
• [学会発表] 中和抵抗性のサル/ヒト免疫不全ウイルスの作製とin vitro における立体構造変化誘導剤による中和感受性増強効果の評価 (2011)
  • 著者名/発表者名: 大附寛幸, 三浦智行, 小林剛, 吉村和久, 玉村啓和, 松下修三, 五十嵐樹彦
  • 学会等名: 第25回日本エイズ学会学術集会
  • 発表場所: 東京