microRNA導入によるiPS細胞樹立の試み

• 研究課題/領域番号: 23659148
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 医化学一般
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 渡邉 すみ子 東京大学, 医科学研究所, 特任教授 (60240735)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2012年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: miRNA / iPS / 分化 / MEF / RNA / microRNA / 過剰発現 / マウス / レトロウイルス

研究概要

ヒト、マウス合計20ライン近いiPSからライブラリーを作成し、バイオインフォマティクスを用いて、高発現miRNAを抽出し、これらについて発現ベクターを作成した。これをMEF,未分化iPS、embryoidbodyにそれぞれ発現させ、iPS樹立効率、未分化性維持、分化効率について検討を加えた。複数のmiRNAで、これらの効率に影響をあたえるものが見いだされたが、過剰発現の効率、安定性に問題があり、ベクターを改変し、スポンジタイプのベクターを評価したところ安定した過剰発現が得られた。

研究成果

• [雑誌論文] The early retinal progenitor-expressed gene Sox11 regulates the timing of the differentiation of retinal cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Usui, A. et al.
  • 雑誌名: Development 巻: 140 ページ: 740-750
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selection of RNA aptamers against mouse embryonic stemcells (2012)
  • 著者名/発表者名: Iwagawa, T., Ohuchi, S., Watanabe, S., Nakamura, Y.
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 94 ページ: 250-257
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro cell subtype-specific transduction of adeno-associated virus in the mouse and marmoset retinal explant culture (2012)
  • 著者名/発表者名: Baba, Y., Satoh, S., Otsu, M., Sasaki, E., Okada, T., and Watanabe, S.
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 94 ページ: 2716-2722
• [雑誌論文] Serine/Threonine kinase Melk regulates proliferation and glial differentiationof retinal progenitor cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito, R., Nakauchi, H., Watanabe, S.
  • 雑誌名: Can. Sci. 巻: 103 ページ: 42-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Selection of RNA aptamers against mouse embryonic stem cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Iwagawa, T et al.
  • 雑誌名: Biochimie 巻: 94 ページ: 250-257
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serine/Threonine kinase Melk regulates proliferation and glial differentiation of retinal progenitor cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito, R.et al.
  • 雑誌名: Can. Sci. 巻: 103 ページ: 42-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transposon mutagenesis identifies genes that transform neural stem cells intoglioma-initiating cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Koso, H. et al.
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.,USA 巻: 109 ページ: 2998-3007
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of Sox4 and Sox11 is regulated by multiple mechanisms during retinal development (2012)
  • 著者名/発表者名: Usui, A. et al.
  • 雑誌名: FEBS Letters 巻: 587 ページ: 358-363
  • 査読あり
• [雑誌論文] Serine/Threonine kinase Melk regulates proliferation and glial differentiation of retinal progenitor cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito, R., Nakauchi, H., Watanabe, S.
  • 雑誌名: Can. Sci. 巻: 103 ページ: 42-49
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dicer plays essential roles for retinal development by regulation of survival and differentiation (2011)
  • 著者名/発表者名: Iida, A., Shinoe, T., Baba, Y., Mano, H., W atanabe, S.
  • 雑誌名: Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 巻: 52 ページ: 3008-3017
• [雑誌論文] Sox9is upstream of microRNA-140 in cartilage (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, Y., He, X., Kato, H., Wakitani, S., Kobayashi, T., Watanabe, S., Iida, A., Tahara, H., Warman, M. L., Watanapokasin, R., Postlethwait, J.H.
  • 雑誌名: Appl. Biochem. Biotechnol 巻: 166 ページ: 64-71
  • 査読あり
• [雑誌論文] 細胞移植による組織の再生とその実現化 をささえる技術開発 (2011)
  • 著者名/発表者名: Journal of the japan society of appliedelectromagnetics and mechanics
  • 雑誌名: 日本AEM学会誌 巻: V 20 ページ: 583-588
• [雑誌論文] Dicer plays essential roles for retinal development by regulation of survival and differentiation. (2011)
  • 著者名/発表者名: Iida, A., Shinoe, T., Baba, Y., Mano, H., Watanabe, S.
  • 雑誌名: Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 巻: 52 ページ: 3008-3017
  • 査読あり
• [雑誌論文] β-Catenin signaling regulates the timing of cell differentiation in mouse retinal progenitor cells, (2011)
  • 著者名/発表者名: Ouchi, Y., Baba, Y., Koso, H., Taketo, M. M., Iwamoto, T., Aburatani, H., Watanabe, S.
  • 雑誌名: Mol. Cell. Neurosci. 巻: 46 ページ: 770-780
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sall3 plays essential roles in horizontal cell maturation through regulation of neurofilament expression levels. (2011)
  • 著者名/発表者名: Baba, Y., Iida, A., Watanabe, S.
  • 雑誌名: Biochimie, 巻: 93 ページ: 1037-1046
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of Zic family zinc finger transcription factors in the proliferation and differentiation of retinal progenitor cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: Watabe, Y., Baba, Y., Nakauchi, H., Mizota, A., Watanabe, S.
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun. 巻: 415 ページ: 42-47
  • 査読あり
• [学会発表] Studies of retinal cell lineage and differentiation mechanisms by using cell surface antigens (2012)
  • 著者名/発表者名: Watanabe, S
  • 発表場所: Berlin, Germany
  • 年月日: 2012-07-22
• [学会発表] Identification of the expression pattern of microRNAs in iPS cells
  • 著者名/発表者名: Siti Razila, Watanabe, S
  • 学会等名: and analysis of their roles in maintenance of iPS cell immaturityISRF 2012
  • 発表場所: Omaha, USA
• [備考]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/moldev/