繊維芽細胞から造血幹細胞へのリプログラミング技法

• 研究課題/領域番号: 23659202
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 実験病理学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 伊藤 克彦 京都大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (90281097)
• 研究分担者: 宮地 均 京都大学, ウイルス研究所, 技術専門職員 (90599200)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2013年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 再生医学 / 造血幹細胞検出法 / リプログラミング / 造血幹細胞

研究概要

以下の事を行った。（１）SCL遺伝子のレポーター・マウス系統を作成し、このマウスの胎児繊維芽細胞を標的として候補遺伝子のスクリーニングを行った。（２）候補遺伝子の「ある組み合わせ」で、極めて少数の細胞でEGFP発現を示唆する結果を得たが、通常のマウスへの移植実験で、この細胞の造血再構築能を確認出来なかった。（３）c-kit遺伝子にCrisprにて変異導入したマウスを用いた造血幹細胞検出法を作成したが、造血再構築能を保持する細胞は、検出出来なかった。
以上のより、上記の「候補遺伝子」は、繊維芽細胞を造血幹細胞へリプログラム出来ないと結論した。

研究成果

• [雑誌論文] The BALB/c-specific polymorphic SIRPA enhances its affinity for human CD47, inhibiting phagocytosis against human cells to promote xenogenic engraftment (2014)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto C, Takenaka K, Urata S, Yamauchi T, Shima T, Kuriyama T, Daitoku S, Saito Y, Miyamoto T, Iwasaki H, Kitabayashi I. Itoh K, Kishimoto J, Kohda D, Matozaki T and Akashi K
  • 雑誌名: Exp. Hematol 巻: 42 ページ: 163-171
• [雑誌論文] The BALB/c-specific polymorphic SIRPA enhances its affinity for human CD47, inhibiting phagocytosis against human cells to promote xenogeneic engraftment. (2014)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto C
  • 雑誌名: Exp Hematol 巻: 42 号: 3 ページ: 163-171
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2013.11.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of gankyrin in mouse hepatocytes induces hemangioma by suppressing factor inhibiting hypoxia-inducible factor-1 (FIH-1) and activating hypoxia-inducible factor-1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Liu Y, Higashitsuji H, Higashitsuji H, Itoh K, Sakurai T, Koike K, Hirota K, Fukumoto M and Fujit J
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 巻: 432 ページ: 22-27
• [雑誌論文] Hypothermia Protects against Fulminant Hepatitis in Mice by Reducing Reactive Oxygen Species Production (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakurai T, Kudo M, Watanabe T, Itoh K, Higashitsuji H, Arizumi T, Inoue T, Hagiwara S, Ueshima K, Nishida N, Fukumoto M and Fujita J
  • 雑誌名: Dig. Dis. 巻: 31 ページ: 440-446
• [雑誌論文] Oscillatory control of factors determining multipotency and fate in mouse neural progenitors (2013)
  • 著者名/発表者名: Imayoshi, I., Isomura, A., Harima, Y., Kawaguchi, K., Kori, H., Miyachi, H., Fujiwara, T., Ishidate, F., and Kageyama, R
  • 雑誌名: Science 巻: 342 ページ: 1203-1208
  • NAID: 120005343917
• [雑誌論文] JMJD1C, a JmjC Domain-Containing Protein, Is Required for Long-Term Maintenance of Male Germ Cells in Mice (2013)
  • 著者名/発表者名: Kuroki, S., Akiyoshi, M., Tokura, M., Miyachi, H., Nakai, Y., Kimura, H., Shinkai, Y., and Tachibana, M
  • 雑誌名: Biol. Reprod
• [雑誌論文] Epigenetic regulation of mouse sex determination by the histone demethylase Jmjd1a (2013)
  • 著者名/発表者名: Kuroki, S., Matoba, S., Akiyoshi, M., Matsumura, Y., Miyachi, H., Mise, N., Abe, K., Ogura, A., Wilhelm, D., Koopman, P., Nozaki, M., Kanai, Y., Shinkai, Y., and Tachibana, M
  • 雑誌名: Science 巻: 341 ページ: 1106-1109
  • NAID: 120005323045
• [雑誌論文] Interleukin-7 receptor controls development and maturation of late stages of thymocyte subpopulations (2013)
  • 著者名/発表者名: Tani-Ichi, S., Shimba, A., Wagatsuma, K., Miyachi, H., Kitano, S., Imai, K., Hara, T., and Ikuta, K
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 巻: 110 ページ: 612-617
  • NAID: 120005241695
• [雑誌論文] Posttranscriptional regulation of histone lysine methyltransferase GLP in embryonic male mouse germ cells (2013)
  • 著者名/発表者名: Deguchi, K., Nagamatsu, G., Miyachi, H., Kato, Y., Morita, S., Kimura, H., Kitano, S., Hatada, I., Saga, Y., Tachibana, M., and Shinkai, Y
  • 雑誌名: Biol. Reprod 巻: 88 ページ: 36-36
• [雑誌論文] In vivo analysis of Aicda gene regulation : a critical balance between upstream enhancers and intronic silencers governs appropriate expression (2013)
  • 著者名/発表者名: Huong le, T., Kobayashi, M., Nakata, M., Shioi, G., Miyachi, H., Honjo, T., and Nagaoka, H
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 8
• [雑誌論文] Hypothermia protects against fulminant hepatitis in mice by reducing reactive oxygen species production. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sakurai T, Kudo M, Watanabe T, Itoh K, Higashitsuji H, Arizumi T, Inoue T, Hagiwara S, Ueshima K, Nishida N, Fukumoto M, Fujita J.
  • 雑誌名: Dig Dis 巻: 31 号: 5-6 ページ: 440-6
  • DOI: 10.1159/000355242
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epigenetic regulation of sex determination by the histone demethylase Jmjd1a (2013)
  • 著者名/発表者名: Kuroki S, Matoba S, Akiyoshi M, Matsumura Y, Miyachi H, Mise N, Abe K, Ogura A, Wilhelm D, Koopman P, Nozaki M, Kanai Y, Shinkai Y, and Tachibana, M
  • 雑誌名: Science 巻: 341 号: 6150 ページ: 1106-1109
  • DOI: 10.1126/science.1239864
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interleukin-7 receptor controls development and maturation of late stages of thymocyte subpopulations. (2013)
  • 著者名/発表者名: Tani-Ichi, S., Shimba, A., Wagatsuma, K., Miyachi, H., Kitano, S., Imai, K., Hara, T., and Ikuta, K.
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 巻: 110 号: 2 ページ: 612-617
  • DOI: 10.1073/pnas.1219242110
  • NAID: 120005241695
  • 査読あり
• [雑誌論文] Oscillatory control of factors determining multipotency and fate in mouse neural progenitors (2013)
  • 著者名/発表者名: I. Imayoshi, A. Isomura, Y. Harima, K. Kawaguchi, H. Kori, H. Miyachi, T. Fujiwara, F. Ishidate, and R. Kageyama
  • 雑誌名: Science 巻: 342 号: 6163 ページ: 1203-1208
  • DOI: 10.1126/science.1242366
  • 査読あり
• [雑誌論文] Overexpression of gankyrin in mouse hepatocytes induces hemangioma by suppressing factor inhibiting hypoxia-inducible factor-1 (FIH-1) and activating hypoxia-inducible factor-1 (2013)
  • 著者名/発表者名: Y. Liu, H. Higashitsuji, K. Itoh, T. Sakurai, K. Koike, K. Hirota, M. Fukumoto, J. Fujita
  • 雑誌名: Biochemical and biophysical research communications 巻: 432 号: 1 ページ: 22-27
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.01.093
  • 査読あり
• [雑誌論文] HTLV-I Tax regulates the cellular proliferation through the down-regulation of PIP3-phosphatase expressions via the NK-kB pathway (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuda RI, Tsuchiya K, Suzuki K, Itoh K, Fujita J, Utsunomiya A and Tsuji T
  • 雑誌名: Int. J. Biochem. Mol. Biol 巻: 3 ページ: 95-104
• [雑誌論文] Stromal factors SDF1a, sFRP1, and VEGFD induce dopaminergic neuron differentiation of human pluripotent stem cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Schwartz CM, Tavakoli T, Jamias C, Park C-C, Maudsley S, Martin B, Phillips TM, Yao PJ, Itoh K, Ma W, Rao MS, Arenas E and Mattson MP
  • 雑誌名: J. Neurosci. Res 巻: 90 ページ: 1367-1381
• [雑誌論文] Cold-inducible RNA-binding protein (Cirp) interacts with Dyrk1b/Mirk and promotes proliferation of immature male germ cells in mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Masuda T, Itoh K, Higashitsuji H, Higashitsuji H, Nakazawa N, Sakurai T, Liu Y, Tokuchi H, Fujita T, Zhao Y, Nishiyama H, Tanaka T, Fukumoto M, Ikawa M, Okabe M and Fujita J
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 巻: 109 ページ: 10885-10890
• [雑誌論文] In situ differentiation of CD8□□ T cells from CD4 T cells in peripheral lymphoid tissues (2012)
  • 著者名/発表者名: Nambu Y, Hayashi T, Jang KJ, Aoki K, Mano H, Nakano K, Osato M, Takahashi K, Itoh K, Teramukai S, Komori T, Fujita J, Ito Y, Shimizu A and Sugai M
  • 雑誌名: Sci. Rep 巻: 2 ページ: 642-642
• [雑誌論文] Identification of a novel enhancer that binds Sp1 and contributes to induction of cold-inducible RNA-binding protein (cirp) expression in mammalian cells (2012)
  • 著者名/発表者名: Sumitomo Y, Higashitsuji H, Higashitsuji H, Liu Y, Fujita T, Sakurai T, Candeias M, Itoh K, Chiba T and Fujita J
  • 雑誌名: BMC Biotechnology 巻: 12 ページ: 72-72
• [雑誌論文] Identification of IL-7-Producing Cells in Primary and Secondary Lymphoid Organs Using IL-7-GFP Knock-In Mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Hara, T., Shitara, S., Imai, K., Miyachi, H., Kitano, S., Yao, H., Tani-Ichi, S., and Ikuta, K
  • 雑誌名: J.Immunol 巻: 189 ページ: 1577-1584
• [雑誌論文] In vivo evaluation of PhiC31 recombinase activity in transgenic mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Imayoshi, I., Hirano, K., Kitano, S., Miyachi, H., and Kageyama, R
  • 雑誌名: Neurosci.Res 巻: 73 ページ: 106-114
• [雑誌論文] A multifunctional teal-fluorescent Rosa26 reporter mouse line for Creand Flp-mediated recombination (2012)
  • 著者名/発表者名: Imayoshi, I., Hirano, K., Sakamoto, M., Miyoshi, G., Imura, T., Kitano, S., Miyachi, H., and Kageyama, R
  • 雑誌名: Neurosci.Res 巻: 73 ページ: 85-91
• [雑誌論文] Light-induced silencing of neural activity in Rosa26 knock-in mice conditionally expressing the microbial halorhodopsin eNpHR2.0 (2012)
  • 著者名/発表者名: Imayoshi, I., Tabuchi, S., Hirano, K., Sakamoto, M., Kitano, S., Miyachi, H., Yamanaka, A., and Kageyama, R
  • 雑誌名: Neurosci. Res
• [雑誌論文] Role of hepatocyte-derived IL-7 in maintenance of intrahepatic NKT cells and T cells and development of B cells in fetal liver (2012)
  • 著者名/発表者名: Liang, B., Hara, T., Wagatsuma, K., Zhang, J., Maki, K., Miyachi, H., Kitano, S., Yabe-Nishimura, C., Tani-Ichi, S., and Ikuta, K
  • 雑誌名: J.Immunol 巻: 189 ページ: 4444-4450
• [雑誌論文] HTLV-I Tax regulates the cellular proliferation through the down-regulation of PIP3-phosphatase expressions via the NK-kB pathway. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fukuda RI, Tsuchiya K, Suzuki K, Itoh K, Fujita J, Utsunomiya A and Tsuji T
  • 雑誌名: Int. J. Biochem. Mol. Biol. 巻: 3 ページ: 95-104
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stromal factors SDF1a, sFRP1, and VEGFD induce dopaminergic neuron differentiation of human pluripotent stem cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Schwartz CM, Tavakoli T, Jamias C, Park C-C, Maudsley S, Martin B, Phillips TM, Yao PJ, Itoh K, Ma W, Rao MS, Arenas E and Mattson MP
  • 雑誌名: J. Neurosci. Res. 巻: 90 号: 7 ページ: 1367-1381
  • DOI: 10.1002/jnr.23064
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cold-inducible RNA-binding protein (Cirp) interacts with Dyrk1b/Mirk and promotes proliferation of immature male germ cells in mice (2012)
  • 著者名/発表者名: Masuda T, et al.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA 巻: 109 号: 27 ページ: 10885-108901
  • DOI: 10.1073/pnas.1121524109
  • 査読あり
• [雑誌論文] In situ differentiation of CD8αα T cells from CD4 T cells in peripheral lymphoid tissues (2012)
  • 著者名/発表者名: Nambu Y., Hayashi T., Jang KJ, Aoki K., Mano H., Nakano K., Osato M., Takabashi K., Itoh K., Teramukai S., Komon T., Fujita J., Ito Y., Shimizu
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 2 号: 1 ページ: 930-930
  • DOI: 10.1038/srep00642
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of a novel enhancer that binds Sp1 and contributes to induction of cold-inducible RNA-binding protein (cirp) expression in mammalian cells. (2012)
  • 著者名/発表者名: Sumitomo Y, Higashitsuji H, Higashitsuji H, Liu Y, Fujita T, Sakurai T, et al
  • 雑誌名: BMC Biotechnol 巻: 12 号: 1 ページ: 72-72
  • DOI: 10.1186/1472-6750-12-72
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of IL-7-producing cells in primary and secondary lymphoid organs using IL-7-GFP knock-in mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Hara, T., S. Shitara, K. Imai, H. Miyachi, S. Kitano, H. Yao, S. Tani-Ichi, and K. Ikuta
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 189 号: 4 ページ: 1577-1584
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1200586
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo evaluation of PhiC31 recombinase activity in transgenic mice. (2012)
  • 著者名/発表者名: Imayoshi, I., K. Hirano, S. Kitano, H. Miyachi, and R. Kageyama
  • 雑誌名: Neuroscience Research 巻: 73 号: 2 ページ: 106-114
  • DOI: 10.1016/j.neures.2012.02.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] A multifunctional teal-fluorescent Rosa26 reporter mouse line for Cre- and Flp-mediated recombination (2012)
  • 著者名/発表者名: I.Imayoshi, K.Hirano, M.Sakamoto, G.Miyoshi, T.Imura, S.Kitano, H.Miyachi, R.Kageyama
  • 雑誌名: Neuroscience Research 巻: 73 号: 1 ページ: 85-91
  • DOI: 10.1016/j.neures.2012.02.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Light-induced silencing of neural activity in Rosa26 knock-in mice conditionally expressing the microbial halorhodopsin eNpHR2.0 (2012)
  • 著者名/発表者名: I.Imayoshi, S.Tabuchi, K.Hirano, M.Sakamoto, S.Kitano, H.Miyachi, A.Yamanaka, R.Kageyama, R.
  • 雑誌名: Neuroscience Research 巻: (掲載確定)(印刷中) 号: 1 ページ: 85-91
  • DOI: 10.1016/j.neures.2012.03.008
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of hepatocyte-derived IL-7 in maintenance of intrahepatic NKT cells and T cells and development of B cells in fetal liver. (2012)
  • 著者名/発表者名: Liang, B., T. Hara, K. Wagatsuma, J. Zhang, K. Maki, H. Miyachi, S. Kitano, C. Yabe-Nishimura, S. Tani-Ichi, and K. Ikuta
  • 雑誌名: Journal of Immunology 巻: 189 号: 9 ページ: 4444-4450
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1201181
  • 査読あり
• [学会発表] CRISPR/Cas9 システムを利用した遺伝子編集マウス作製の実際 (2014)
  • 著者名/発表者名: 宮地均, 伊藤克彦, 他
  • 学会等名: 第61回日本実験動物学会総会