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in vitro翻訳後修飾導入による新規自己抗体同定法の確立

研究課題

研究課題/領域番号 23659311
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 病態検査学
研究機関聖マリアンナ医科大学

研究代表者

加藤 智啓  聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (80233807)

研究期間 (年度) 2011
研究課題ステータス 中途終了 (2011年度)
配分額 *注記
3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2012年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2011年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
キーワード翻訳後修飾 / 自己抗原 / シトルリン化 / 質量分析
研究概要

自己抗体は検査医学研究の主要対象のひとつであるが、多くの自己抗体検査は抗原の翻訳後修飾という点は考慮していない。最近、シトルリン化ペプチドに対する自己抗体が関節リウマチに特異性が高いなど、抗原の翻訳後修飾の重要性が明らかになりつつある。本研究では、蛋白質の翻訳後修飾を認識する自己抗体の汎用的同定法を確立する。その際、従来法と異なり、in vitroで様々な翻訳後修飾を導入し、それを用いて自己抗体をスクリーニングすることで、効率良く目的を達成する。本年度の結果は以下の通りである。すなわちJurkat細胞からの抽出蛋白質をアルギニンデイミナーゼを用いてシトルリン化した。シトルリン化した抽出蛋白質と無処理の抽出蛋白質をそれぞれ2次元電気泳動で展開し、関節リウマチ患者血清によるウエスタンブロッティングで、シトルリン化パネルでのみ陽性となる蛋白質スポットをスクリーニングしたところ、シトルリン化依存性自己抗原候補スポットを複数個検出し、そのうち5種の自己抗原をMALDI-TOF-TOF-MS質量分析により同定した。さらに、組み換えタンパク質を作成し、シトルリン化ののちELISA法によりシトルリン化依存性を確認した。そのうちのひとつはアデノシンデナミナーゼで、抗炎症作用のあるアデノシンを減少させる酵素であった。診断マーカー候補になると共に、病態論的にも興味深いもので、現在論文として公表準備中である。また、アセチル化についても同様の解析法の確立することの検討を開始した。

報告書

(1件)
  • 2011 実績報告書
  • 研究成果

    (17件)

すべて 2012 2011

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (11件)

  • [雑誌論文] A novel anti-peroxiredoxin autoantibodyinpatients with Kawasaki disease.2012

    • 著者名/発表者名
      Fujieda M, Karasawa R, Takasugi H,Yamamoto M, Kataoka K, Yudoh K, KatoT, Ozaki S, Wakiguchi H.
    • 雑誌名

      Microbiology andImmunology.

      巻: 56 号: 1 ページ: 56-61

    • DOI

      10.1111/j.1348-0421.2011.00393.x

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Proteomic analysis of bone marrow-adherent cells in rheumatoid arthritis and osteoarthritis.2012

    • 著者名/発表者名
      Kamada T, et al.
    • 雑誌名

      International Journal of Rheumatic Diseases

      巻: 15 号: 2 ページ: 169-178

    • DOI

      10.1111/j.1756-185x.2012.01702.x

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] AC13, a C-Terminal fragment of apolipoprotein A-I, Is a candidate biomarker for microscopic polyangiitis2011

    • 著者名/発表者名
      Takakuwa Y., Ozaki S., et al
    • 雑誌名

      Arthritis & Rheumatis.

      巻: 63(11) 号: 11 ページ: 3613-3624

    • DOI

      10.1002/art.30560

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Increased expression of S100 calcium binding protein A8 in GM-CSF-stimulated neutrophils leads to the increased exptessions of IL-8 and IL-162011

    • 著者名/発表者名
      Katano M, et al
    • 雑誌名

      Clin Exp Rheumatol

      巻: 29(5) ページ: 768-775

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Arthritogenecity of anneixin7 revealed by phosphoproteomics of rheumatoid synoviocytes2011

    • 著者名/発表者名
      Matsuo K, et al
    • 雑誌名

      Ann Rheum Dis

      巻: 70 ページ: 1489-1495

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Anti-endothelial cell antibodies (AECA) in patients with systemic vasculitis : our research using proteomics2011

    • 著者名/発表者名
      Karasawa R, et al
    • 雑誌名

      Expert Opin Biol Ther

      巻: 11 ページ: 77-87

    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 抗RNP抗体の対応抗原snRNP68kの翻訳後修飾の解析2011

    • 著者名/発表者名
      永井宏平, 他7名
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] 関節リウマチ関連因子Anx7の解析2011

    • 著者名/発表者名
      有戸光美, 他11名
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] 「アセチル化」プロテオミクスによる関節リウマチ関連分子の探索2011

    • 著者名/発表者名
      有戸光美, 他6名
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] MPO-AMCAの対応抗原の翻訳後修飾の検討2011

    • 著者名/発表者名
      内田貞輔, 7名
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Proteomic analysis of bone marrow-derived adheret cells in RA and OA2011

    • 著者名/発表者名
      Kamada T, et al
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Proteomic analysis of peropheral blood monouclear cells from Bechet's desease2011

    • 著者名/発表者名
      Yoshioka T, et al
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Comprehensive analyses of serum peptides in microscopic polyangiitis2011

    • 著者名/発表者名
      Takakuwa Y, et al
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Proteome analysis of serum peptide related to the onset of arthritis of CIA rat2011

    • 著者名/発表者名
      Mitsui H, et al
    • 学会等名
      第55回日本リウマチ学会総会・学術集会、第20回国際リウマチシンポジウム
    • 発表場所
      神戸ポートピアホテル、神戸国際会議場、神戸国際展示場(兵庫県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] 関節リウマチにおける糖タンパク質の糖鎖異常2011

    • 著者名/発表者名
      佐藤利行, 他
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2011年大会、日本ヒトプロテオーム機構第9回大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ(新潟県)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Screening of glycoproteins with altered glycans in rheumatoid arthritis2011

    • 著者名/発表者名
      Sato T, et al
    • 学会等名
      HUPO 2011
    • 発表場所
      ジュネーブ(スイス)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書
  • [学会発表] Analysis of phosphorylation status of a disease-specific isoform of a U1 small nuclear ribonucleoprotein 68k subunit, a major antigen for anti-RNP autoantibodies2011

    • 著者名/発表者名
      Nagai K, et al
    • 学会等名
      HUPO 2011
    • 発表場所
      ジュネーブ(スイス)
    • 関連する報告書
      2011 実績報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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