ヒト神経系不死化細胞株の網羅的樹立と三次元モデル構成の試み

• 研究課題/領域番号: 23659457
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 神経内科学
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 神田 隆 山口大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40204797)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2012年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 神経細胞学 / 神経免疫学 / 血液脊髄関門 / 不死化細胞株 / 内皮細胞 / 血管周細胞 / 不死化細胞 / 神経膠細胞

研究概要

本研究の主目的は、汎用性が高く、かつ元細胞の形質を完全に保持したヒト中枢神経系・末梢神経系構成細胞株を網羅的に作成し、個々の細胞の生物学的特性を把握する基盤を整備することである。2年間の研究により、ヒト骨格筋微小血管由来内皮細胞と同周細胞(平成23年度)、ヒト脊髄微小血管由来内皮細胞と同周細胞(平成24年度)の不死化細胞株が樹立できた。細胞種によっては単離・不死化操作が極端に困難で未だ株化に至っていないものも多数残っており、網羅的な樹立にはさらなる研究の継続が必要である。

研究成果

• [雑誌論文] A stable human brain microvascular endothelial cell line retaining its barrier-specific nature, independent of the passage number (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasuteru Sano, Yoko Kashiwamura, Masaaki Abe, Le-Ha Dieu, Jorg Huwyler, Fumitaka Shimizu, Hiroyo Haruki, Toshihiko Maeda, Kazuyuki Saito, Ayako Tasaki, Takashi Kanda
  • 雑誌名: Clin Exp Neuroimmunol 巻: 4(in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Advanced glycation end-products disrupt the blood-brain barrier by stimulating the release of transforming growth factor-β by pericytes and vascular endothelial growth factor and matrix metalloproteinase-2 by endothelial cells in vitro. (2013)
  • 著者名/発表者名: Fumitaka Shimizu
  • 雑誌名: Neurobiol Aging 巻: 34 号: 7 ページ: 1902-1912
  • DOI: 10.1016/j.neurobiolaging.2013.01.012
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biology of the blood-nerve barrier and its alteration in immune-mediated neuropathies (2013)
  • 著者名/発表者名: Takashi Kanda
  • 雑誌名: J Neurol Neurosurg Psychiatry 巻: 84 号: 2 ページ: 208-212
  • DOI: 10.1136/jnnp-2012-302312
  • 査読あり
• [雑誌論文] A stable human brain microvascular endothelial cell line retaining its barrier-specific nature, independent of the passage number. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yasuteru Sano
  • 雑誌名: Clin Exp Neuroimmunol 巻: 4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sera from neuromyelitis optica patients disrupt the blood-brain barrier (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimizu F, Sano Y, Takahashi T, Haruki H, Saito K, Koga M, Kanda T
  • 雑誌名: J Neurol Neurosurg Psychiatry 巻: 83 号: 3 ページ: 288-297
  • DOI: 10.1136/jnnp-2011-300434
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pericyte-derived glial cell line-derived neurotrophic factor increase the expression of claudin-5 in the blood-brain barrier and the blood-nerve barrier (2012)
  • 著者名/発表者名: Shimizu F, Sano Y, Saito K, Abe MA, Maeda T, Haruki H, Kanda T
  • 雑誌名: Neurochem Res 巻: 37 号: 2 ページ: 401-409
  • DOI: 10.1007/s11064-011-0626-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Establishment and Characterization of Human Peripheral Nerve Microvascular Endothelial Cell Lines: A New <i>in vitro</i> Blood-Nerve Barrier (BNB) Model (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaaki Abe
  • 雑誌名: Cell Structure and Function 巻: 37 号: 2 ページ: 89-100
  • DOI: 10.1247/csf.11042
  • NAID: 130004137580
  • ISSN: 0386-7196, 1347-3700
  • 査読あり
• [雑誌論文] Advanced glycation end-products induce basement membrane hypertrophy in endoneurial microvessels and disrupt the blood-nerve barrier by stimulating the release of TGF-β and vascular endothelial growth factor (VEGF) by pericytes (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimizu F, Sano Y, Haruki H, Kanda T
  • 雑誌名: Diabetologia 巻: 54 号: 6 ページ: 1517-1526
  • DOI: 10.1007/s00125-011-2107-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] Peripheral nerve pericytes modify the blood-nerve barrier function and tight junctional molecules through the secretion of various soluble factors. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimizu F, Sano Y, Abe M, Maeda T, Ohtsuki S, Terasaki T, Kanda T
  • 雑誌名: J Cell Physiol 巻: 226 号: 1 ページ: 255-266
  • DOI: 10.1002/jcp.22337
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hydrocortisone enhances the function of the blood-nerve barrier through the up-regulation of claudin-5 (2011)
  • 著者名/発表者名: Kashiwamura Y, Sano Y, Abe M, Shimizu F, Haruki H, Maeda T, Kawai M, Kanda T
  • 雑誌名: Neurochem Res 巻: 36 号: 5 ページ: 849-855
  • DOI: 10.1007/s11064-011-0413-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation and properties of endothelial cells forming the blood-nerve barrier. (2011)
  • 著者名/発表者名: Sano Y, Kanda T
  • 雑誌名: Methods Mol Biol 巻: 686 ページ: 417-425
  • 査読あり
• [雑誌論文] A serological analysis of viral and bacterial infections associated with neuromyelitisoptica (2011)
  • 著者名/発表者名: Koga M, Takahashi T, Kawai M, Fujihara K, Kanda T
  • 雑誌名: J Neurol Sci 巻: 300 号: 1-2 ページ: 19-22
  • DOI: 10.1016/j.jns.2010.10.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] 糖尿病性末梢神経障害の病態解明に向けたヒト血液神経関門 in vitroモデルの作成 (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水文崇，安部真彰，神田 隆
  • 雑誌名: 末梢神経 巻: 22 ページ: 57-63
  • 査読あり
• [雑誌論文] 血管内皮異常．「ここまでわかった多発性筋炎・皮膚筋炎」 (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水文崇，神田 隆
  • 雑誌名: 医学の歩み 巻: 239 ページ: 58-62
• [学会発表] 抗SRP抗体陽性ミオパチー患者由来IgG は筋内小血管ペリサイトの細胞死を誘導する (2012)
  • 著者名/発表者名: 神田 隆、清水文崇、佐野泰照、尾本雅俊、田崎綾子、春木明代、大石真莉子
  • 学会等名: 厚生労働科学研究費補助金難治性疾患等克服研究事業自己免疫疾患に関する調査研究平成24年度班会議
  • 発表場所: 丸ビルホールアンドカンファレンススクエア、東京
  • 年月日: 2012-12-14
• [学会発表] 抗SRP抗体陽性ミオパチー患者由来IgGは筋内小血管ペリサイトの細胞死を誘導する (2012)
  • 著者名/発表者名: 神田 隆
  • 学会等名: 厚生労働科学研究費補助金難治性疾患等克服研究事業自己免疫疾患に関する調査研究 平成24年度班会議
  • 発表場所: 丸ビルホールアンドカンファレンススクエア、東京
• [学会発表] Sera from neuromyelitis optica patients disrupt the blood-brain barrier. (2011)
  • 著者名/発表者名: Shimizu F
  • 学会等名: ECTRIMS
  • 発表場所: Amsterdam, Holland
• [学会発表] アミロイドβ蛋白の血液脳関門を介した輸送機構の解析． (2011)
  • 著者名/発表者名: 佐野泰照
  • 学会等名: 第52回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 名古屋、名古屋国際会議場
• [学会発表] 視神経脊髄炎血清での血液脳関門破綻メカニズムの解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水文崇
  • 学会等名: 第52回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 名古屋、名古屋国際会議場
• [学会発表] 抗AQP4抗体陽性患者血清によるアストロサイト細胞死とその機序について． (2011)
  • 著者名/発表者名: 春木明代
  • 学会等名: 第52回日本神経学会学術大会
  • 発表場所: 名古屋、名古屋国際会議場
• [学会発表] 血液神経関門をターゲットとした治療戦略． (2011)
  • 著者名/発表者名: 神田 隆
  • 学会等名: 第52回日本神経学会学術大会(招待講演)
  • 発表場所: 名古屋、名古屋国際会議場
• [学会発表] 多巣性運動ニューロパチー血清が血液神経関門に及ぼす影響の解析． (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水文崇
  • 学会等名: 第22回日本末梢神経学会総会．
  • 発表場所: 沖縄、沖縄コンベンションセンター
• [学会発表] 抗AQP4抗体陽性患者血清によるアストロサイト細胞死とその機序について． (2011)
  • 著者名/発表者名: 春木明代
  • 学会等名: 第23回日本神経免疫学会学術集会．
  • 発表場所: 東京、京王プラザホテル
• [学会発表] NMO sera and astrocyte cell death: an in vitro study. (2011)
  • 著者名/発表者名: Haruki H
  • 学会等名: ECTRIMS
  • 発表場所: Amsterdam, Holland
• [学会発表] 多巣性運動ニューロパチー血清が血液神経関門に及ぼす影響の解析． (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水文崇
  • 学会等名: 「難治性ニューロパチーの診断技術と治療法の開発に関する研究」班．平成23年度班会議．
  • 発表場所: 東京、都市センターホール
• [学会発表] Bickerstaff型脳幹脳炎とMiller Fisher症候群の患者血清が血液脳関門と血液神経関門に及ぼす影響の解析. (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤和幸
  • 学会等名: 第23回日本神経免疫学会学術集会
  • 発表場所: 東京、京王プラザホテル
• [学会発表] 皮膚筋炎の病態解明に向けてのヒト筋肉由来血管内皮細胞株樹立の試み． (2011)
  • 著者名/発表者名: 清水文崇
  • 学会等名: 「自己免疫疾患に関する調査研究」班平成23年度班会議．
  • 発表場所: 東京、都市センターホテル
• [図書] Annual review 2013神経 (2013)
  • 著者名/発表者名: 神田 隆
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] Annual review 2013神経 (2013)
  • 著者名/発表者名: 神田 隆
  • 総ページ数: 278
  • 出版者: 中外医学社