肝星細胞の可視化と発現解析を可能とするBac-TRAPマウスを用いた血栓症の解析

• 研究課題/領域番号: 23659494
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 独立行政法人国立循環器病研究センター
• 研究代表者: 宮田 敏行 独立行政法人国立循環器病研究センター, 研究所, 部長 (90183970)
• 研究分担者: 坂野 史明 独立行政法人国立循環器病研究センター, 研究所, 研究員 (00373514)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2011年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
• キーワード: 血栓性血小板減少性紫斑病 / ADAMTS13 / 抗血栓因子 / 肝星細胞 / トランスジェニックマウス / Bac-TRAP / 抗血栓性因子 / トランスクリプトーム解析 / バイオイメージング

研究概要

私達は、肝星細胞で特異的に発現するADAMTS13のプロモーターの下流に、EGFPとリボソームタンパク質L10aからなる融合タンパク質cDNAを挿入し、ADAMTS13発現細胞でEGFP-L10aが発現するマウスを作製した。EGFP-L10aが8コピー入っているマウスの肝臓のホモジネートをウェスタンプロットし、融合タンパク質EGFP-L10aの発現を確認した。このマウスの肝臓切片を抗GFP抗体で染色し、類洞壁の星細胞と思われる細胞の染色を観察した。

研究成果

• [雑誌論文] Large infarct and high mortality by cerebral ischemia in mice carrying the factor V Leiden mutation (2012)
  • 著者名/発表者名: Kita T, Banno F, Yanamoto H, Nakajo Y, Iihara K, Miyata T
  • 雑誌名: J Thromb Haemost 巻: 10 号: 7 ページ: 1453-1455
  • DOI: 10.1111/j.1538-7836.2012.04776.x
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13 gene deletion enhances plasma high-mobility group boxl elevation and neuroinflammation in brain ischemia-reperfusion injury. (2012)
  • 著者名/発表者名: Fujioka M, Nakano T, Hayakawa K, Irie K, Akitake Y, Sakamoto Y, Mishima K, Muroi C, Yonekawa Y, Banno F, Kokame K, Miyata T, Nishio K, Okuchi K, Iwasaki K, Fujiwara M, Siesjo
  • 雑誌名: Neurol Sci 巻: 33 ページ: 1107-1115
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13 safeguards the myocardium in a mouse model of acute myocardial infarction. (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaaki Doi, Hideto Matsui, Yukiji Takeda, Yoshihiko Saito, Maiko Takeda, Yasunori Matsunari, Kenji Nishio, Midori Shima, Fumiaki Banno, Masashi Akiyama, Koichi Kokame, Toshiyuki Miyata, and Mitsuhiko Sugimoto.
  • 雑誌名: Thromb. Haemost. 巻: 108 号: 12 ページ: 1236-1238
  • DOI: 10.1160/th12-09-0674
  • 査読あり
• [雑誌論文] マウス急性心筋梗塞モデルにおけるADAMTS13の心筋保護作用 (2012)
  • 著者名/発表者名: 杉本充彦、土井政明、松井英人、宮田敏行
  • 雑誌名: 日本血栓止血学会誌 巻: 第23巻 ページ: 590-593
  • NAID: 130003367332
  • URL: https://www.jstage.jst.go.jp/article/jjsth/23/6/23_590/_article/-char/ja/
  • 査読あり
• [雑誌論文] ADAMTS13 gene deletion enhances plasma high-mobility group box1 elevation and neuroinflammation in brain ischemia-reperfusion iniury (2012)
  • 著者名/発表者名: M.Fujioka, 他16名
  • 雑誌名: Neurol Sci 巻: 33 号: 5 ページ: 1107-1115
  • DOI: 10.1007/s10072-011-0913-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo imaging analysis of the interaction between unusually large von Willebrand factor multimers and platelets on the surface of vascular wall (2011)
  • 著者名/発表者名: Rybaltowski M, Suzuki Y, Mogami H, Chlebinska I, Brzoska T, Tanaka A, Banno F, Miyata T, Urano T
  • 雑誌名: Pflugers Arch 巻: 461(6) 号: 6 ページ: 623-33
  • DOI: 10.1007/s00424-011-0958-x
  • 査読あり
• [学会発表] 血栓形成の分子機構 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行
  • 学会等名: 日本バイオマテリアル学会シンポジウム2012、シンポジウム : 血液適合ト生バイオマテリアル
  • 発表場所: 仙台市
  • 年月日: 2012-11-27
• [学会発表] プロテインS徳島(K196E)変異がマウスの肺塞栓症および虚血性脳梗塞に及ぼす影響 (2012)
  • 著者名/発表者名: 坂野史明、喜多俊行、柳本広二、小亀浩市、宮田敏行
  • 学会等名: 第74回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 京都市
• [学会発表] Protective role of ADAMTS13 for myocardium in mouse model of experimental myocardial infarction (2012)
  • 著者名/発表者名: Masaaki Doi, Hideto Matsui, Yukiji Takeda, Yoshihiko Saito, Maiko Takeda, Yasunori Matsunari, Kenji Nishio, Midori Shima, Fumiaki Banno, Masashi Akiyama, Koichi Kokame, Toshiyuki Miyata,Mitsuhiko Sugimoto
  • 学会等名: 54th American Society of Hematology, Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: Atlanta, USA
• [学会発表] ADAMTS13 improving the cell engraftment efficacy in mouse model of bone marrow transplantation (2012)
  • 著者名/発表者名: Hideto Matsui, Masaaki Doi, Yasunori Matsunari, Maiko Takeda, Kenji Nishio, Midori Shima, Kenji Soejima, Fumiaki Banno, Masashi Akiyama, Koichi Kokame, Toshiyuki Miyata, Mitsuhiko Sugimoto
  • 学会等名: 54th American Society of Hematology, Annual Meeting and Exposition
  • 発表場所: Atlanta, USA
• [学会発表] Thrombotic thrombocytopenic purpura and ADAMTS13 (2011)
  • 著者名/発表者名: Toshiyuki Miyata
  • 学会等名: 3^<rd> SIRIC-NCVC Joint Symposium
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 2011-11-11
• [学会発表] Generation of knock-in mice carrying a K196E point mutation in protein S (2011)
  • 著者名/発表者名: Fumiaki Banno, Toshiyuki Kita, Hiroji Yanamoto, Koichi Kokame, Koji Iihara, Toshiyuki Miyata
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] Imaging analysis of the interaction between unusually large von-Willebrand factor multimers and platelets on vascular endothelial cells in living animals (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomasz Brzoska, Miroslaw Rybaltowski, Yuko Suzuki, Hideo Mogami, Iwona Chlebinska, Aki Tanaka, Fumiaki Banno, Toshiyuki Miyata, Tetsumei Urano
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: Kyoto
• [学会発表] ADAMTS13研究の最先端、血栓止血学・血管生物学の最近の進歩 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行、小亀浩市、秋山正志、武田壮一、坂野史明
  • 学会等名: 第73回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋市
• [学会発表] Imaging analysis of the interaction between unusually large von-Willebrand factor multimers and platelets on vascular endothelial cells in living animals (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomasz Brzoska, Miroslaw Rybaltowski, Yuko Suzuki, Hideo Mogami, Iwona Chlebinska, Aki Tanaka, Fumiaki Banno, Toshiyuki Miyata, Tetsumei Urano
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: 京都市
• [学会発表] Generation of knock-in mice carrying a K196E point mutation in protein S (2011)
  • 著者名/発表者名: Fumiaki Banno, Toshiyuki Kita, Hiroji Yanamoto, Koichi Kokame, Koji Iihara, Toshiyuki Miyata
  • 学会等名: XXIII Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis
  • 発表場所: 京都市
• [学会発表] ADAMTS13研究の最先端 (2011)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行、小亀浩市、秋山正志、武田壮一、坂野史明
  • 学会等名: 第73回日本血液学会学術集会
  • 発表場所: 名古屋市
• [学会発表] Thrombotic thrombocytopenic purpura and ADAMTS13 (2011)
  • 著者名/発表者名: Toshiyuki Miyata
  • 学会等名: 3rd SIRIC-NCVC Joint Symposium
  • 発表場所: Seoul, Korea
• [学会発表] 血栓形成の分子機構
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行
  • 学会等名: 日本バイオマテリアル学会シンポジウム2012
  • 発表場所: 仙台市
  • 招待講演
• [学会発表] 血栓性細小血管障害症の分子機構
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行
  • 学会等名: TTMフォーラム
  • 発表場所: 東京都
  • 招待講演
• [図書] VI.凝固線溶系 3.内因系凝固反応と血栓症I Annual Review 血液 2012、高久史麿・小澤敬也・坂田洋一・金倉 譲・小島勢二編集 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行、喜多俊行
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] Annual Review血液2012 (2012)
  • 著者名/発表者名: 宮田敏行、喜多俊行
  • 出版者: 中外医学社