ナノホールアレイを用いた表面プラズモン共鳴法によるメチル化DNAの迅速検知

• 研究課題/領域番号: 23710152
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: マイクロ・ナノデバイス
• 研究機関: 独立行政法人産業技術総合研究所
• 研究代表者: 栗田 僚二 独立行政法人産業技術総合研究所, バイオメディカル研究部門, 主任研究員 (50415676)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2012年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: DNA / メチルシトシン / エピジェネティクス

研究概要

本研究課題では、抗メチルシトシン抗体を用いたシーケンス選択的なメチル化 DNA の迅速な検出に向けた検討を行った。シーケンス選択性を持たせるため、測定対象のメチルシトシンを DNA バルジ領域に配置させ、その後当該2本鎖 DNA と抗メチルシトシン抗体とのアフィニティを計測することにより実現させた。一例として、MGMT(癌と関係する遺伝子の1つ)のプロモーター領域のメチル化状態を1塩基レベルで迅速に検出することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] DNA Methylation Analysis Triggered by Bulge Specific Immuno-Recognition (2012)
  • 著者名/発表者名: Ryoji Kurita and Osamu Niwa
  • 雑誌名: Analytical Chemistry 巻: 84 号: 17 ページ: 7533-7538
  • DOI: 10.1021/ac301702y
• [雑誌論文] Electrochemical Surface Plasmon Resonance Measurement Based on Gold Nanohole Array Fabricated by Nanoimprinting Technique, Analytical Chemistry (2012)
  • 著者名/発表者名: Ryoji Kurita, Kumi Arai, Kohei Nakamoto, Dai Kato, Osamu Niwa
  • 雑誌名: Analytical Chemistry 巻: (In press) 号: 4 ページ: 1799-1803
  • DOI: 10.1021/ac202692f
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a mass-producible on-chip plasmonic nanohole array biosensor (2011)
  • 著者名/発表者名: Kohei Nakamoto, Ryoji Kurita, Osamu Niwa, Toshiyuki Fujii, Munehiro Nishida
  • 雑誌名: Nanoscale 巻: 3 号: 12 ページ: 5067-5075
  • DOI: 10.1039/c1nr10883b
  • 査読あり
• [学会発表] DNA バルジを利用したシーケンス選択的なメチルシトシン免疫測定法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二、丹羽修
  • 学会等名: 電気化学会
  • 発表場所: 東北大学(宮城県)
  • 年月日: 2013-03-31
• [学会発表] Single methylation analysis in DNA by electrochemiluminescence and surface plasmon resonance (2013)
  • 著者名/発表者名: Ryoji Kurita
  • 学会等名: Pittcon2013
  • 発表場所: Pennsylvania Convention Center Philadelphia(米国)
  • 年月日: 2013-03-20
• [学会発表] DNAバルジを利用したシーケンス選択的なメチルシトシン免疫測定法 (2013)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 学会等名: 電気化学会
  • 発表場所: 東北大学
• [学会発表] Single methylation analysis in DNA by electrochemiluminescence and surface plasmon resonance (2013)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 学会等名: Pittcon2013
  • 発表場所: Philadelphia
  • 招待講演
• [学会発表] DNA バルジ特異的な抗体認識を利用したシトシンのメチル化診断 (2012)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二、丹羽修
  • 学会等名: 分析化学会
  • 発表場所: 金沢大学(石川県)
  • 年月日: 2012-09-19
• [学会発表] DNAバルジ特異的な抗体認識を利用したシトシンのメチル化診断 (2012)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 学会等名: 分析化学会
  • 発表場所: 金沢大学
• [学会発表] Development of Electrogenerated Chemiluminescence based Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (2011)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二 ほか
  • 学会等名: ICAS2011
  • 発表場所: 京都、京都国際会議場
• [学会発表] ENZYME LINKED IMMUNO-SORBENT ASSAY WITH SURFACE ACCUMULABLE MOLECULE FORMED BY LABELING ENZYME (2011)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 学会等名: 9th Asian Conference on Chemical Sensors(招待講演)
  • 発表場所: 台湾,Chientan Youth Activity Center
• [学会発表] Development of Electrochemiluminescence and Surface Plasmon Resonance based Immunosensors with Surface Accumulable Molecules (2011)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 学会等名: 2011 MRS fall meeting(招待講演)
  • 発表場所: 米国, Marriotto copley place
• [図書] メチル化 DNA の迅速検出を目指して (2013)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 出版者: 化学とマイクロ・ナノシステム研究会誌
• [図書] 化学とマイクロ・ナノシステム研究会誌 (2013)
  • 著者名/発表者名: 栗田僚二
  • 総ページ数: 8
  • 出版者: 化学とマイクロ・ナノシステム研究会
• [備考]
  • URL: http://unit.aist.go.jp/biomed-ri/biomed-nbd/menber_kurita/kurita.html
• [備考]
  • URL: http://unit.aist.go.jp/biomed-ri/biomed-nbd/menber_kurita/kurita.html
• [産業財産権] (英語)METHYLCYTOSINE DETECTION METHOD (和訳)メチルシトシン検出法 (2018)
  • 発明者名: 栗田 僚二, 吉岡 恭子, 丹羽 修
  • 権利者名: 産業技術総合研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 取得年月日: 2018
  • 外国
• [産業財産権] メチルシトシン検出法 (2015)
  • 発明者名: 栗田 僚二
  • 権利者名: 産業技術総合研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2015-12-09
  • 外国
• [産業財産権] メチルシトシン検出法 (2014)
  • 発明者名: 栗田 僚二, 柳澤 博幸, 吉岡 恭子, 丹羽 修
  • 権利者名: 独立行政法人産業技術総合研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2014-03-13
  • 外国
• [産業財産権] メチルシトシン検出法 (2013)
  • 発明者名: 栗田僚二、丹羽修
  • 権利者名: 栗田僚二、丹羽修
  • 産業財産権番号: 2013-051501
  • 出願年月日: 2013-03-14
• [産業財産権] メチルシトシン検出法 (2013)
  • 発明者名: 栗田 僚二, 柳澤 博幸
  • 権利者名: 産総研
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2013-051501
  • 出願年月日: 2013-03-14
  • 取得年月日: 2017-02-24
• [産業財産権] メチル化核酸検出法 (2011)
  • 発明者名: 栗田僚二、加藤大、丹羽修
  • 権利者名: 栗田僚二、加藤大、丹羽修
  • 産業財産権番号: 2011-098844
  • 出願年月日: 2011-04-27