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高感度細胞表面抗原マーカー検出に向けたエピトープ領域の網羅的同定

研究課題

研究課題/領域番号 23710218
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 ゲノム生物学
研究機関慶應義塾大学

研究代表者

増田 豪  慶應義塾大学, 政策・メディア研究科, 特任助教 (70383940)

研究期間 (年度) 2011 – 2012
研究課題ステータス 完了 (2012年度)
配分額 *注記
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2012年度: 2,860千円 (直接経費: 2,200千円、間接経費: 660千円)
2011年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワード細胞表面抗原 / ショットガンプロテオミクス / 膜タンパク質 / 相間移動可容化剤 / リン酸化プロテオミクス / 細胞分画 / 相間移動可溶化剤 / プロテオーム
研究概要

細胞表面抗原タンパク質を網羅的に同定するために、ショットガンプロテオーム解析に適した前処理方法を構築した。LC-MS/MSを用いたショットガンプロテオーム解析はタンパク質の網羅的解析に有用であるが、膜タンパク質である細胞表面抗原タンパク質は疎水性が高く、存在量が少ないため網羅的解析が困難なタンパク質群である。これらのタンパク質の同定効率を改善するために、本研究では膜タンパク質同定に適した消化酵素の組み合わせ予測やショットガンプロテオーム解析に適した細胞分画法、迅速消化カラム、高感度分析カラムの開発を実施した。これらの前処理法を用いることで、わずか0.5μgのタンパク質試料から209種類の膜貫通タンパク質が同定され、効果的に細胞表面抗原を同定できると期待された。

報告書

(3件)
  • 2012 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2011 実施状況報告書
  • 研究成果

    (40件)

すべて 2013 2012 2011 その他

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件) 学会発表 (29件) (うち招待講演 1件) 備考 (2件) 産業財産権 (3件)

  • [雑誌論文] In-depth Membrane Proteomics Study of Breast Cancer Tissues for the Generation of a Chromosome-based Protein List2013

    • 著者名/発表者名
      Satoshi Muraoka, Hideaki Kume, Jun Adachi, Takashi Shiromizu, Shio Watanabe, Takeshi Masuda, Yasushi Ishihama, Takeshi Tomonaga
    • 雑誌名

      Journal of Proteome Research

      巻: V12, No.1 ページ: 208-213

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Nestin Protein Is Phosphorylated in Adult Neural Stem/Progenitor Cells and Not Endothelial Progenitor Cells2012

    • 著者名/発表者名
      Jun Namiki, Sayuri Suzuki, Takeshi Masuda, Yasushi Ishihama, Hideyuki Okano
    • 雑誌名

      Stem Cells International

      巻: 2012 ページ: 430138-430138

    • DOI

      10.1155/2012/430138

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Construction of a Microscale Phosphoproteomics System with High Sensitivity2012

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Yasushi Ishihama
    • 雑誌名

      BUNSEKI KAGAKU

      巻: V61, No.6 ページ: 459-467

    • NAID

      10030436721

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Nematode-specific tRNAs that decode an alternative genetic code for leucine2012

    • 著者名/発表者名
      Kiyofumi Hamashima, Kousuke Fujishima, Takeshi Masuda, Junichi Sugahara, Masaru Tomita, Akio Kanai
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Research

      巻: V40, No.8 ページ: 3653-3662

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Microscale phosphoproteome analysis of 10000 cells from human cancer cell lines2011

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Naoyuki Sugiyama, Masaru Tomita, Yasushi Ishihama
    • 雑誌名

      Analytical Chemistry

      巻: V83, No.20 ページ: 7698-7703

    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Micro-scale phosphoproteome analysis of 10, 000 cells from human cancer cell lines2011

    • 著者名/発表者名
      T. Masuda, N. Sugiyama, M. Tomita, and Y. Ishihama
    • 雑誌名

      Anal Chem

      巻: 83 号: 20 ページ: 7698-703

    • DOI

      10.1021/ac201093g

    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Bernhard Φ. Palsson,Martin Robert, Metabolic response of Escherichia coli adapted to growth on a glycerol minimum medium2012

    • 著者名/発表者名
      Kian-Kai Cheng, Baek-Seok Lee, Takeshi Masuda, Junko Fujikura, Takuro Ito, Kazutaka Ikeda, Jiyang Dong, Tomoyoshi Soga, Masaru Tomita
    • 学会等名
      Foundations of Systems Biology in Engineering 2012
    • 発表場所
      Tsuruoka
    • 年月日
      2012-10-22
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Development of a subcellular fractionation protocol using phase transfer surfactants2012

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Naoyuki Sugiyama, Masaru Tomita, Yasushi Ishihama
    • 学会等名
      11th Human proteome organization Annual World Congress
    • 発表場所
      Boston
    • 年月日
      2012-09-11
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 相間移動可溶化法を用いたショットガンプロテオーム解析2012

    • 著者名/発表者名
      増田豪
    • 学会等名
      第10回北里疾患プロテオーム研究会
    • 発表場所
      北里大学
    • 年月日
      2012-08-23
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] ショットガンプロテオミクスのための相間移動可溶化法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      増田豪
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第10回大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2012-07-26
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 相間移動可溶化剤を用いた新規細胞分画法の開発と応用2012

    • 著者名/発表者名
      増田豪, 杉山直幸, 冨田勝, 石濱泰
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構第10回大会
    • 発表場所
      東京
    • 年月日
      2012-07-26
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Highly sensitive LC-MS/MS analysis of phosphorylated peptides in minimal number of cells2012

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Yasuyuki Igarashi, Masaru Tomita, Jun Namiki, Naoyuki Sugiyama, Yasushi Ishihama
    • 学会等名
      60th ASMS Conference on Mass Spectrometry
    • 発表場所
      Vancouver
    • 年月日
      2012-05-24
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 超高熱性アーキアPyrococcus furiosusにおける3タイプのRNAリガーゼと試験管内tRNA断片連結再構成系の構築2012

    • 著者名/発表者名
      佐藤朝子, 増田豪, 冨田勝, 伊藤隆, 金井昭夫
    • 学会等名
      第35回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書 2012 研究成果報告書
  • [学会発表] nev-tRNA: A novel nematode-specific tRNA that decodes an alternative genetic code for leucine2012

    • 著者名/発表者名
      Kiyofumi Hamashima, Kosuke Fujishima, Takeshi Masuda, Junichi Sugahara, Masaru Tomita, Akio Kanai
    • 学会等名
      The 17th Annual Meeting of the RNA Society
    • 発表場所
      Michigan
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Biochemical Characterization of Three RNA Ligases from the Hyperthermophilic Archaeon Pyrococcus furiosus2012

    • 著者名/発表者名
      Asako Sato, Takeshi Masuda, Masaru Tomita, Takashi Itoh, Akio Kanai
    • 学会等名
      The 17th Annual Meeting of the RNA Society
    • 発表場所
      Michigan
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Metabolic response of Escherichia coli adapted to growth on a glycerol minimum medium2012

    • 著者名/発表者名
      Kian-Kai Cheng, Baek-Seok Lee, Takeshi Masuda, Junko Fujikura, Takuro Ito, Kazutaka Ikeda, Jiyang Dong, Tomoyoshi Soga, Masaru Tomita, Bernhard Palsson, Martin Robert
    • 学会等名
      Foundations of Systems Biology in Engineering 2012
    • 発表場所
      山形
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Development of a subcellular fractionation protocol using phase transfer surfactants2012

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Naoyuki Sugiyama, Masaru Tomita, Yasushi Ishihama
    • 学会等名
      11th Human proteome organization Annual World Congress
    • 発表場所
      ボストン
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 相間移動可溶化法を用いたショットガンプロテオーム解析2012

    • 著者名/発表者名
      増田豪
    • 学会等名
      第10回北里疾患プロテオーム研究会
    • 発表場所
      神奈川
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 相間移動可溶化剤を用いた新規細胞分画法の開発と応用2012

    • 著者名/発表者名
      増田豪, 杉山直幸, 冨田勝, 石濱泰
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第10回大会
    • 発表場所
      東京
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] nev-tRNA: A novel nematode-specific tRNA that decodes an alternative genetic code for leucine2012

    • 著者名/発表者名
      Kiyofumi Hamashima, Kosuke Fujishima, Takeshi Masuda, Junichi Sugahara, Masaru Tomita, Akio Kanai
    • 学会等名
      The 17th Annual Meeting of the RNA Society
    • 発表場所
      アナーバー
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Biochemical Characterization of Three RNA Ligases from the Hyperthermophilic Archaeon Pyrococcus furiosus2012

    • 著者名/発表者名
      Asako Sato, Takeshi Masuda, Masaru Tomita, Takashi Itoh, Akio Kanai
    • 学会等名
      The 17th Annual Meeting of the RNA Society
    • 発表場所
      アナーバー
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] Highly sensitive LC-MS/MS analysis of phosphorylated peptides in minimal number of cells2012

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Yasuyuki Igarashi, Masaru Tomita, Jun Namiki, Naoyuki Sugiyama, Yasushi Ishihama
    • 学会等名
      60th ASMS Conference on Mass Spectrometry
    • 発表場所
      バンクーバー
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 高感度リン酸化プロテオーム解析システムの開発2011

    • 著者名/発表者名
      増田豪, 五十嵐康之, 冨田勝, 並木淳, 杉山直幸, 石濱泰
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第9回大会
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      2011-07-29
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 微量組織試料に対する定量的リン酸化プロテオーム解析法の確立2011

    • 著者名/発表者名
      若林真樹, 塚原麻衣, 吉原宏樹, 増田豪, 石濱泰
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第9回大会
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      2011-07-29
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] タンパク質の抽出と分画2011

    • 著者名/発表者名
      増田豪, 杉山直幸, 石濱泰
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構第9回大会
    • 発表場所
      新潟
    • 年月日
      2011-07-28
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] nev-tRNA: A novel non-canonical type of tRNA in nematodes decodes an alternative genetic code for leucine2011

    • 著者名/発表者名
      Kiyofumi Hamashima, Kosuke Fujishima, Takeshi Masuda, Junichi Sugahara, Masaru Tomita, Akio Kanai
    • 学会等名
      第34回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      横浜
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 高感度LC-MS/MSシステムを用いた極微量組織試料のプロテオーム解析技術の確立2011

    • 著者名/発表者名
      若林真樹, 増田豪, 石濱泰
    • 学会等名
      第22回クロマトグラフィー科学会議
    • 発表場所
      仙台
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 超好熱性アーキアPyrococcus furiosus における3種のRNA ligaseの性状解析2011

    • 著者名/発表者名
      金井昭夫, 竹末可奈子, 佐藤朝子, 増田豪, 冨田 勝
    • 学会等名
      第84回 日本生化学会大会
    • 発表場所
      京都
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Metabolic shifts under the stringent response in Escherichia coli2011

    • 著者名/発表者名
      Natsumi Saito, Kenji Nakahigashi, Takeshi Masuda, Tomoyoshi Soga, Masaru Tomita
    • 学会等名
      7th International Conference of the Metabolomics Society
    • 発表場所
      Cairns, Australia
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] Highly Sensitive Phosphoproteome Analysis of a Minute Number of Cells2011

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda, Yasuyuki Igarashi, Masaru Tomtia, Jun Namiki, Yasushi Ishihama
    • 学会等名
      59th ASMS Conference on Mass Spectrometry
    • 発表場所
      Denver
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [学会発表] 高感度LC-MS/MSシステムを用いた極微量組織試料のプロテオーム解析技術の確立2011

    • 著者名/発表者名
      若林真樹
    • 学会等名
      第22回クロマトグラフィー科学会議
    • 発表場所
      東北大学(仙台市)
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [学会発表] タンパク質の抽出と分画2011

    • 著者名/発表者名
      増田豪
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第9回大会(招待講演)
    • 発表場所
      朱鷺メッセ(新潟市)
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [学会発表] 高感度リン酸化プロテオーム解析システムの開発2011

    • 著者名/発表者名
      増田豪
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第9回大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ(新潟市)
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [学会発表] 微量組織試料に対する定量的リン酸化プロテオーム解析法の確立2011

    • 著者名/発表者名
      若林真樹
    • 学会等名
      日本プロテオーム機構 第9回大会
    • 発表場所
      朱鷺メッセ(新潟市)
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [学会発表] Highly Sensitive Phosphoproteome Analysis of a Minute Number of Cells2011

    • 著者名/発表者名
      Takeshi Masuda
    • 学会等名
      59th ASMS Conference on Mass Spectrometry
    • 発表場所
      Colorado Convention Center (Denver)
    • 関連する報告書
      2011 実施状況報告書
  • [備考] 奨励賞、日本プロテオーム学会、2012年。

    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [備考] 2011 JHUPO Best Poster Award、高感度リン酸化プロテオーム解析システムの開発、日本プロテオーム学会、2011年。

    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [産業財産権] 獣毛繊維の鑑別方法2013

    • 発明者名
      増田豪
    • 権利者名
      一般社団法人ニッセンケン評価センター
    • 出願年月日
      2013-03-15
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [産業財産権] エチレングリコール及び界面活性剤を含む溶液を用いた細胞分画法2012

    • 発明者名
      増田豪, 杉山直幸
    • 権利者名
      学校法人 慶應義塾
    • 出願年月日
      2012-08-22
    • 関連する報告書
      2012 研究成果報告書
  • [産業財産権] エチレングリコール及び界面活性剤を含む溶液を用いた細胞分画法2012

    • 発明者名
      増田豪, 杉山直幸
    • 権利者名
      学校法人 慶應義塾
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2012-08-22
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書

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公開日: 2011-08-05   更新日: 2019-07-29  

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