水平伝播を利用した次世代型クローニング技術の開発

• 研究課題/領域番号: 23710239
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 応用ゲノム科学
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 金子 真也 東京工業大学, 生命理工学研究科, 助教 (10399694)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2013年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2011年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 応用微生物 / 核酸 / ゲノム / バイオテクノロジー / 形質転換

研究概要

水平伝播を利用した次世代型クローニング技術開発に向けて、供与菌(大腸菌)と受容菌(枯草菌)の適切な培養条件を確立するとともに、安定なDNAの移行操作についての菌株の種類やヌクレアーゼ阻害剤の効果を明らかにすることができた。特にビルレントファージ(λgt10)による溶菌システムを開発したことで、プラスミドを保持する既存の大腸菌株(ライブラリー)を手軽に使用することが可能となった。さらにエキソヌクレアーゼが高効率化のための促進剤として効果的であることも判明した。以上本研究によりDNAを精製せずに簡便に他の宿主に移行させる「水平伝播を利用したクローニングシステム」の基盤技術を確立できた。

研究成果

• [学会発表] 水平伝播を利用したクローニングシステム(CMM)の汎用性 A versatile designed horizontal gene-transfer system by natural transformation, named as Culture MixMethod (CMM) for genomic syntheses (2014)
  • 著者名/発表者名: 金子真也、板谷光泰
  • 学会等名: 日本農芸化学会2014年度(平成26年度)大会[東京]
  • 発表場所: 明治大学生田キャンパス(神奈川県川崎市)
  • 年月日: 2014-03-30
• [学会発表] 細胞外核酸による水平伝播システム(CMM)を用いたゲノム合成 A designed horizontal gene-transfer system by natural transformation, named as Culture Mix Method (CMM) for genomic syntheses (2012)
  • 著者名/発表者名: 金子真也、板谷光泰
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会ワークショップ 3W3III-1セッションタイトル;「ゲノムを作り、種を越えて動かす : 合成生物学的観点から見る水平伝播」
  • 発表場所: 福岡国際会議場 4F小会議室 (福岡県)
  • 年月日: 2012-12-13
  • 招待講演
• [学会発表] 細胞外核酸の水平伝播を介するゲノム合成 Genome synthesis via horizontal transfer of stable extra-cellular DNA (2011)
  • 著者名/発表者名: 板谷光泰、金子真也
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会シンポジウム「細胞外核酸の動態 : 医科学環境科学での新しい観点からの研究、応用展開」
  • 発表場所: 京都国際会館(京都府)
  • 年月日: 2011-09-24
• [学会発表] 細胞外核酸の水平伝播を介するゲノム合成 Genome synthesis via horizontal transfer of stable extra-cellular DNA (2011)
  • 著者名/発表者名: 板谷光泰、金子真也
  • 学会等名: 第84回日本生化学会大会 シンポジウム「細胞外核酸の動態：医科学環境科学での新しい観点からの研究、応用展開」
  • 発表場所: 京都国際会館(京都府)
• [学会発表] 水平伝播を利用したクローニングシステム(CMM)の汎用性 A versatile designed horizontal gene-transfer system by natural transformation, named as Culture Mix Method (CMM) for genomic syntheses.
  • 著者名/発表者名: 金子真也、板谷光泰
  • 学会等名: 日本農芸化学会2014年度(平成26年度)大会[東京]
  • 発表場所: 明治大学生田キャンパス (神奈川県川崎市)
• [学会発表] 細胞外核酸による水平伝播システム(CMM)を用いたゲノム合成 A designed horizontal gene-transfer system by natural transformation, named as Culture Mix Method (CMM) for genomic syntheses.
  • 著者名/発表者名: 金子真也、板谷光泰
  • 学会等名: 第35回日本分子生物学会年会 ワークショップ 3W3III-1 セッションタイトル；「ゲノムを作り、種を越えて動かす：合成生物学的観点から見る水平伝播」
  • 発表場所: 福岡国際会議場 4F 小会議室 (福岡県)
  • 招待講演