金属イオン検出を新たな次元とする多次元PAGEによるメタロタンパク質分析法の開発

• 研究課題/領域番号: 23750077
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 分析化学
• 研究機関: 埼玉大学
• 研究代表者: 齋藤 伸吾 埼玉大学, 大学院・理工学研究科, 准教授 (60343018)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2012年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2011年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
• キーワード: 分離分析 / 金属タンパク質 / ゲル電気泳動法 / 蛍光プローブ / メタロタンパク質 / 金属蛍光プローブ / ポリアクリルアミドゲル電気泳動 / スペシエーション

研究概要

生体試料中の金属イオンの分布情報を得るため,ポリアクリルアミドゲル電気泳動法(PAGE)を基盤とするタンパク結合型金属イオンの高感度検出技術を開発した。金属イオンをPAGEで検出するための蛍光プローブを開発し,種々の金属イオンに対して分離検出可能なプローブを見出した。この金属検出PAGEを二次元目とし,ブルーネイティブPAGEを一次元目として用い二次元化を試みた。その結果,種々のタンパク質結合型銅および鉄イオンの検出に成功した。

研究成果

• [雑誌論文] A New Molecular Motif for Recognizing Sialic Acid Using Emissive Lanthanide-Macrocyclic Polyazacarboxylate Complexes: Acid-Dissociation of A Coordinated Water Molecule ControlsSelectivity (2013)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Ouchi, Shingo Saito, MasamiShibukawa
  • 雑誌名: Inorganic Chemistry
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive detection of neodymium ion in small amount of spent nuclear fuel samples using novel fluorescent macrocyclic hexadentate polyaminocarboxylate probe in capillary electrophoresis-laser-induced fluorescence detection (2012)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Yoshiyuki Sato, Tomoko Haraga, Yuta Nakano, Shiho Asai, Yutaka Kameo, Kuniaki Takahashi, Masami Shibukawa
  • 雑誌名: Journal of Chromatography A 巻: 1232 ページ: 152-157
  • 査読あり
• [雑誌論文] Highly sensitive detection of neodymium ion (2012)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito et al.
  • 雑誌名: Journal of Chromatography A 巻: 1232 ページ: 152-157
  • DOI: 10.1016/j.chroma.2011.11.032
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ultrasensitive CE for heavy metal ions using the variations in the chemicalstructures formed from new octadentate fluorescent probes and cationicpolymers (2011)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Yuta Nakano, Atsushi Hikichi, Ryouji Suzuki, Keitaro Yoshimoto, Mizuo Maeda,Masakazu Aoyama, Masami Shibukawa
  • 雑誌名: Analyst 巻: 136(13) ページ: 2697-2705
  • 査読あり
• [雑誌論文] 新規蛍光プローブの開発と 速度論的特性を用いる高性能金属イオン分 離分析システムの構築 (2011)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 雑誌名: 分析化学 巻: 60(10) ページ: 773-784
  • NAID: 10029482295
  • 査読あり
• [学会発表] キャピラリー等速電気泳動法を利用した新規濃縮-分離-分取システムの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 辻村大翔,齋藤伸吾,渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
  • 年月日: 2012-09-18
• [学会発表] ウラニルイオンに選択的なキャピラリー電気泳動-レーザー励起検出法用新規蛍光プローブの開発 (2012)
  • 著者名/発表者名: 佐藤義行,齋藤伸吾,原賀智子,伊東祐有希,亀尾裕,高橋邦明,渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
  • 年月日: 2012-09-18
• [学会発表] 汚染金属フリーな新規ゲル電気泳動法の開発と血清中タンパク質‐銅イオン二次元マップ (2012)
  • 著者名/発表者名: 川島光善,齋藤伸吾,佐藤誠,渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第61年会
  • 発表場所: 金沢大学
  • 年月日: 2012-09-18
• [学会発表] Lanthanide-macrocyclic polyazacarboxylate complexes for luminescence recognition of sialic acid: the mechanism of the specific binding (2012)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Ouchi, Shigo Saito, Masami Sibukawa
  • 学会等名: RSC Tokyo International Conference 2012 -Micro/Nano Technologies for Analysis of Human Health and Diagnostics-
  • 発表場所: Makuhari Messe, Chiba, Japan
  • 年月日: 2012-09-06
• [学会発表] タンパク質-金属イオン二次元ゲル電気泳動法の開発:分離場の汚染金属抑制とヒト血漿中銅イオンの分布 (2012)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾,川島光喜,佐藤誠,渋川雅美
  • 学会等名: 第23回日本微量元素学会学術集会
  • 発表場所: シェーンバッハ・サボー,砂防会館
  • 年月日: 2012-07-05
• [学会発表] Emissive Lanthanide-Macrocyclic Polyazacarboxylate Complexes Specifically Recognizing Sialic Acid by Acid Dissociation Reaction of a Coordinated Water Molecule (2012)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Ouchi, Shingo Saito, Masami Shibukawa
  • 学会等名: PittCon 2012, Orlando, USA
  • 発表場所: Orange CountyCenter, USA
  • 年月日: 2012-03-18
• [学会発表] タンパク質－金属イオン二次元ゲル電気泳動法の開発：分離場の汚染金属抑制とヒト血漿中銅イオンの分布 (2012)
  • 著者名/発表者名: 齋藤伸吾
  • 学会等名: 第23回日本微量元素学会学術集会
  • 発表場所: 砂防会館
• [学会発表] A Boronic Acid-Functionalized Squarylium (2012)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito，Christa L. Colyer
  • 学会等名: PittCon2012(招待講演)
  • 発表場所: Orange County Center, USA
• [学会発表] Emissive Lanthanide-Macrocyclic Polyazacarboxylate (2012)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Ouchi, Shingo Saito
  • 学会等名: PittCon2012
  • 発表場所: Orange County Center, USA
• [学会発表] Specific Molecular Recognition of Sialic Acid by Reactions with Residual Coordination Sites of Lanthanide-Macrocyclic Polyazacarboxylate Complexes in Aqueous Solution (2011)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Ohuchi, Shingo Saito, MasamiShibukawa
  • 学会等名: IUPAC International Congress on Analytical Sciences 2011
  • 発表場所: Kyoto InternationalConference Center, JAPAN
  • 年月日: 2011-05-25
• [学会発表] Two-Dimensional Protein-Metal PAGE for Sensitive Detection of Metal-Bound Proteins (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Ohshima, Shingo Saito, Mitsuyoshi Kawashima, Makoto Sato, Masami Shibukawa
  • 学会等名: IUPAC International Congress on Analytical Sciences 2011
  • 発表場所: Kyoto International ConferenceCenter, JAPAN
  • 年月日: 2011-05-23
• [学会発表] ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による金属錯体分離における結合水の影響 (2011)
  • 著者名/発表者名: 浅藤憲,齋藤伸吾,渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第60年会
  • 発表場所: 名古屋大学東山キャンパス
• [学会発表] Highly Emissive Metal Probes Suitable for Ultratrace Detection of Lanthanide and Actinide Ions by Capillary Electrophoresis-Laser-Induced Fluorescence (2011)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Tomoko Haraga, Yuta Nakano, Yoshiyuki Sato, Yutaka Kameo, Kuniaki Takahashi, Masami Shibukawa
  • 学会等名: 36th International Symposium on High-Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques (HPLC2011)
  • 発表場所: Budapest Congress & World Trade Centre, Budapest,Hungary
• [学会発表] Specific Molecular Recognition of Sialic Acid (2011)
  • 著者名/発表者名: Kazuki Ohuchi, Shingo Saito, Masami Shibukawa
  • 学会等名: ICAS 2011
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
• [学会発表] Two-Dimensional Protein-Metal PAGE (2011)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Ohshima, Shingo Saito, Mitsuyoshi Kawashima
  • 学会等名: ICAS 2011
  • 発表場所: Kyoto International Conference Center
• [学会発表] Highly Emissive Metal Probes Suitable In CE-LIF (2011)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Tomoko Haraga, Yuta Nakano
  • 学会等名: HPLC2011
  • 発表場所: Budapest Congress & World Trade Centre, Budapest
• [学会発表] CE-LIF Assays Based on Boronic Acid Dyes (2011)
  • 著者名/発表者名: Shingo Saito, Takeshi Maeda, Hiroyuki Nakazumi
  • 学会等名: HPLC2011
  • 発表場所: Budapest Congress & World Trade Centre, Hungary
• [学会発表] HPLCによるジペプチドの溶液内反応と固液界面反応の平衡論的および速度論的解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 枝彩花，斎藤伸吾，渋川雅美
  • 学会等名: Separation Science 2011
  • 発表場所: 幕張メッセ国際会議場
• [学会発表] 多孔質グラファイトカーボンカラムを用いたオンカラム酸化還元化学種変換HPLCに関する基礎研究 (2011)
  • 著者名/発表者名: ウヤハン，齋藤伸吾，齋藤和憲，渋川雅美
  • 学会等名: Separation Science 2011
  • 発表場所: 幕張メッセ国際会議場
• [学会発表] ポリエチレングリコール／硫酸ナトリウム水性二相抽出法を用いた環境水中のカドミウムの簡易比色定量法 (2011)
  • 著者名/発表者名: 信島大輝，齋藤伸吾，松谷佑磨，齊藤和憲，南澤宏明，渋川雅美
  • 学会等名: Separation Science 2011
  • 発表場所: 幕張メッセ国際会議場
• [学会発表] Capillary Electrophoresis with Laser-Induced (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomoko Haraga, Shingo Saito
  • 学会等名: ICEM 2011
  • 発表場所: Reims Champagne Congres Centre, France
• [学会発表] 疎水性細孔空間を利用した気液ハイブリッド分離システムの構築 (2011)
  • 著者名/発表者名: 仲村大樹，近藤善紀，齋藤伸吾，渋川雅美
  • 学会等名: 日本分析化学会第60年会
  • 発表場所: 名古屋大学東山キャンパス
• [備考]
  • URL: http://www.apc.saitama-u.ac.jp/bunseki/index.html
• [産業財産権] 試料中の金属の測定方法 (2012)
  • 発明者名: 齋藤伸吾,佐藤誠
  • 権利者名: 株式会社シノテスト
  • 出願年月日: 2012-12-07