微生物被メチル化塩基配列の汎用的分析基盤の創出

研究課題

研究課題/領域番号	23750083
研究種目	若手研究(B)
配分区分	基金
研究分野	分析化学
研究機関	九州大学
研究代表者	鈴木宏和九州大学, 大学院・農学研究院, 准教授 (80462696)
研究期間 (年度)	2011 – 2012
研究課題ステータス	完了 (2012年度)
配分額 *注記	4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円) 2012年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円) 2011年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
キーワード	メチル化塩基 / メチル化部位分析 / 抗体 / 分析方法
研究概要	微生物におけるメチル化 DNA 塩基種としては,5-methylcytosine,N6-methyladenine,およびN4-methylcytosine の 3 種が挙げられる.本研究では,抗メチル化塩基抗体を用いた DNA メチル化部位の汎用的分析手法の開発を目的とし,従来法では解析が困難であった I 型制限修飾系のメチル化部位分析手法の確立に取り組んだ.抗 5-methylcytosine抗体を用いた分析手法各種(免疫沈降/PCR 法,被メチル化プラスミドライブラリー/HPLC 法,被メチル化プラスミドライブラリー/ウェスタンブロット法)を設計し,条件検討を重ねた結果,被メチル化プラスミドライブラリー/ウェスタンブロット法が,I 型制限修飾系メチル化部位の分析に適していることが示唆された.