新規ネイティブフォームGPCR提示システムによる抗GPCR抗体アッセイ法の創製

• 研究課題/領域番号: 23760748
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 生物機能・バイオプロセス
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 秋山 真一 名古屋大学, 医学系研究科, 特任講師 (20500010)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円); 2012年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円); 2011年度: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
• キーワード: ゼブラフィッシュ / 抗体測定 / ネイティブフォーム抗原 / 膜タンパク質 / 抗体 / 立体構造 / GPCR

研究概要

次世代の組換えタンパク質発現宿主である小型魚類のゼブラフィッシュ(Danio rerio)初期胚を用いて、ヒト膜タンパク質の一つであるPhospholipase A2 receptor(hPLA2R)をネイティブフォームの立体構造を保ったまま効率良く調製することに成功し、得られたリコンビナントhPLA2Rを抗原として、hPLA2Rの立体エピトープを特異的に認識する特発性膜性腎症患者由来イムノグロブリンGを測定することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Functional and heterologous expression of human protein O-linked mannose β -1,2-N- acetylglucosaminyltransferase 1 in zebrafish (2012)
  • 著者名/発表者名: E. Avsar-Ban, H. Ishikawa, S. Akiyama, H. Manya, T. Endo, Y. Tamaru
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioengin 巻: 114(2) ページ: 237-239
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional and heterologous expression of human protein O-linked mannose β-1,2-N- acetylglucosaminyltransferase 1 in zebrafish (2012)
  • 著者名/発表者名: E. Avsar-Ban
  • 雑誌名: J. Biosci. Bioengin. 巻: 114 ページ: 237-239
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tissue-restricted expression of Nrf2 and its target genes in zebrafish with gene-specific variations in the induction profiles (2011)
  • 著者名/発表者名: H. Nakajima, Y. Nakajima-Takagi, T. Tsujita, S. Akiyama, T. Wakasa, K. Mukaigasa, H. Kaneko, Y. Tamaru, M. Yamamoto, M. Kobayashi
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 6(10)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tissue-restricted expression of Nrf2 and its target genes in zebrafish with gene-specific variations in the induction profiles (2011)
  • 著者名/発表者名: Nakajima H
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 6 (10)
  • 査読あり
• [学会発表] Prevalence of autoantibody against PLA2R1 in patients with membranous nephropathy in Japan (2012)
  • 著者名/発表者名: S. Akiyama, T. Ozaki, S. Maruyama, H. Yokoyama, G. Lambeau, D. Salant, S. Matsuo, E. Imai
  • 学会等名: American Society of Nephrology 2012
  • 発表場所: アメリカ合衆国 San diego
  • 年月日: 2012-11-03
• [学会発表] Development of ELISA for detection of anti-phospholipase A2 receptor autoantibodies as a biomarker of idiopathic membranous nephropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: S Akiyama, S. Maruyama, S. Matsuo, E. Imai
  • 学会等名: 55thAnnual meeting of the Japanese Society of Nephrology
  • 発表場所: Yokohama
  • 年月日: 2012-06-01
• [学会発表] Development of ELISA for detection of anti-phospholipase A2 receptor autoantibodies as a biomarker of idiopathic membranous nephropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: S. Akiyama, S. Maruyama, S. Matsuo, E. Imai
  • 学会等名: CKD Frontier
  • 発表場所: Nagoya
  • 年月日: 2012-02-18
• [学会発表] Development of ELISA for detection of anti-phospholipase A2 receptor autoantibodies as a biomarker of idiopathic membranous nephropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: S Akiyama
  • 学会等名: 55th Annual meeting of the Japanese Society of Nephrology
  • 発表場所: Yokohama
  • 招待講演
• [学会発表] “Prevalence of autoantibody against PLA2R1 in patients with membranous nephropathy in Japan” (2012)
  • 著者名/発表者名: S Akiyama
  • 学会等名: American Society of Nephrology 2012
  • 発表場所: San diego
• [学会発表] Development of ELISA for detection of anti-phospholipase A2 receptor autoantibodies as a biomarker of idiopathic membranous nephropathy (2012)
  • 著者名/発表者名: Shinichi Akiyama
  • 学会等名: 1st CrKD frontie
  • 発表場所: キャスルプラザホテル 名古屋
• [学会発表] 魚類発現系による活性型組換えヒト POMGnT1 タンパク質の生産 (2011)
  • 著者名/発表者名: 秋山真一、アヴシャル坂恵利子、石川文啓、田守彩子、萬谷博、遠藤玉夫、田丸浩
  • 学会等名: 第63回日本生物工学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2011-09-27
• [学会発表] Production of active form recombinant hPOMGnT1 by novel recombinant protein expression system using zebrafish embryo (2011)
  • 著者名/発表者名: 秋山 真一
  • 学会等名: 日本生物工学会2011年次大会
  • 発表場所: 東京農工大学 小金井キャンパス
• [図書] 薬ジャーナル 2012 年 11 月号(Vol.48 No.11)、腎疾患診療の最前線 3.膜性腎症の抗 PLA2R 抗体測定の現状と展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 秋山真一、今井圓裕
  • 出版者: 医薬ジャーナル社
• [図書] 日本生物工学会誌 (2012)
  • 著者名/発表者名: 秋山真一
  • 総ページ数: 199
• [図書] 腎疾患診療の最前線 ３．膜性腎症の抗PLA2R抗体測定の現状と展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 秋山真一
  • 総ページ数: 6
  • 出版者: 医薬ジャーナル社
• [図書] 第3の水産業への期待 (2012)
  • 著者名/発表者名: 秋山真一
  • 総ページ数: 1
  • 出版者: 日本生物工学会誌
• [図書] 食のバイオ計測の最前線-機能解析と安全・安心の計測を目指して- 7 バイオ計測への魚類バイオテクノロジーの応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 秋山真一、田丸浩
  • 出版者: CMC 出版
• [図書] 食のバイオ計測の最前線 ―機能解析と安全・安心の計測を目指して―、植田充美監修、第7章 バイオ計測への魚類バイオテクノロジーの応用 (2011)
  • 著者名/発表者名: 秋山 真一
  • 出版者: シーエムシー出版
• [図書] Research and Development of Biotechnologies Using Zebrafish and Its Application on Drug Discovery Progress in Molecular and Environmental Bioengineering - From Analysis and Modeling to Technology Applications, ISBN: 978-953-307-268-5 (2011)
  • 著者名/発表者名: Yutaka Tamaru
  • 出版者: INTECH