種特異的な外来遺伝子発現抑制機構の解明

• 研究課題/領域番号: 23780027
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 園芸学・造園学
• 研究機関: 大阪府立大学
• 研究代表者: 三柴 啓一郎 大阪府立大学, 生命環境科学研究科(系), 准教授 (70390888)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円); 2013年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2012年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2011年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: DNAメチル化 / リンドウ / 分子育種 / レタス / サイレンシング / 遺伝子組換え / 園芸

研究概要

本研究では、リンドウより見出した35Sプロモーター配列特異的なDNAメチル化の分子機構について詳細な解析を行った。リンドウに1コピー導入したT-DNAの全長について、de novoメチル化が高頻度に起きる領域が2箇所存在することを突き止めた。これら配列は2種のモチーフを持ち、核内因子と結合することを見出し、酵母ワンハイブリッド法により候補因子を同定した。また懸濁培養細胞を用いてDNAメチル化とヒストン修飾の関係について調査し、de novoメチル化に伴いヒストン修飾が変化していることを確認した。さらに組換えレタスを作出し、リンドウと同様の現象を見出した。

研究成果

• [雑誌論文] An attempt to detect siRNA-mediated genomic DNA modification by artificially induced mismatch siRNA in Arabidopsis. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yosuke Miyagawa, Jun Ogawa, Yuji Iwata, Nozomu Koizumi, Kei-ichiro Mishiba
  • 雑誌名: PLOS ONE 巻: 8 号: 11 ページ: e81326-e81326
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0081326
  • 査読あり
• [雑誌論文] De novo DNA methylation of the 35S enhancer revealed by high-resolution methylation analysis of an entire T-DNA segment in transgenic gentian (2011)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Yamasaki, Masayuki Oda, Nozomu Koizumi, Kazuhiko Mitsukuri, Masafumi Johkan, Takashi Nakatsuka, Masahiro Nishihara, Kei-ichiro Mishiba
  • 雑誌名: Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 巻: 28 号: 2 ページ: 223-230
  • DOI: 10.5511/plantbiotechnology.10.1222a
  • NAID: 10028259282
  • ISSN: 1342-4580, 1347-6114
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epigenetic modifications of the 35S promoter in cultured gentian cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Yamasaki, Masayuki Oda, Hiroyuki Daimon, Kazuhiko Mitsukuri, Masahumi Johkan, Takashi Nakatsuka, Masahiro Nishihara, Kei-ichiro Mishiba
  • 雑誌名: Plant Science 巻: 180(4) 号: 4 ページ: 612-619
  • DOI: 10.1016/j.plantsci.2011.01.008
  • 査読あり
• [学会発表] Genetic engineering of eggplant with high carotenoid contents in fruits (2013)
  • 著者名/発表者名: Tomoya Fujiwara, Shunji Teranishi, Yuki Hiramatsu, Kei-ichiro Mishiba, Nozomu Koizumi
  • 学会等名: JSOL 10th International Symposium on Solanaceae Genomics、Japanese Solanaceae Genomics Initiative (JSOL)
  • 発表場所: 大阪府立大学
  • 年月日: 2013-11-29
• [学会発表] ナス果実で強く発現する遺伝子のプロモーター解析 (2012)
  • 著者名/発表者名: 藤原知也、平松由季、三柴啓一郎、小泉望
  • 学会等名: 第30回日本植物細胞分子生物学会大会、日本植物細胞分子生物学会
  • 発表場所: 奈良先端科学技術大学院大学
  • 年月日: 2012-08-05
• [学会発表] Making transgenic eggplant with high carotenoids contents.、SOL2011 8th Solanaceae and 2nd Cucurbitaceae Genome Joint Conference (2011)
  • 著者名/発表者名: Tomoya Fujiwara, Shunji Teranishi, Yuki Hiramatsu, Kei-ichiro Mishiba, Nozomu Koizumi
  • 学会等名: Japanese Solanaceae Genomics Initiative (JSOL)
  • 発表場所: 神戸コンベンションセンター
  • 年月日: 2011-11-28
• [学会発表] リンドウに導入したT-DNA領域全長のde novo DNAメチル化解析 (2011)
  • 著者名/発表者名: 山崎識知ら
  • 学会等名: 日本育種学会
  • 発表場所: 横浜市立大学（神奈川県）
• [図書] The Gentianaceae, Vol.2. Biotechnology and Application, Chapter 10. Genetic transformation and its application to gentian breeding (2013)
  • 著者名/発表者名: Jan J. Rybczynski, Michael R. Davey, Anna Mikula (eds.) M. Nishihara, K. Mishiba, T. Imamura, H. Takahashi, T. Nakatsuka
  • 総ページ数: 250
  • 出版者: Springer
• [備考]
  • URL: http://www.plant.osakafu-u.ac.jp/~mishiba/
• [備考] 申請者の研究室HP（研究紹介）
  • URL: http://www.plant.osakafu-u.ac.jp/~mishiba/Research.html
• [備考]
  • URL: http://www.plant.osakafu-u.ac.jp/~mishiba/Research.html