抗体工学的アプローチによる新世代受動喫煙評価システムの開発

• 研究課題/領域番号: 23790632
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 病態検査学
• 研究機関: 神戸薬科大学
• 研究代表者: 森田 いずみ 神戸薬科大学, 薬学部, 助手 (20299085)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2011年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 抗体工学 / 受動喫煙 / バイオテクノロジー / 分析科学 / 社会医学

研究概要

我々は先に,モノクローナル抗コチニン抗体を産生するハイブリドーマを樹立し,その"野生型"scFvを調製している.このscFv遺伝子を鋳型として,変異scFv遺伝子ライブラリーを作製し,ELISAから判断して,より親和力が高いscFvクローンを得た.これらを用いる競合型ELISAの条件を最適化して,用量作用曲線を作成したところ,50%阻害値は0.2ng/assayであり,マウス抗体を用いた従来のELISAと比べて大幅な高感度化に成功した.本アッセイ系は,ヒト尿中コチニンの直接測定も可能で,受動喫煙のモニタリングに有用と期待される.

研究成果

• [雑誌論文] A monoclonal antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay for human urinary cotinine to monitor tobacco smoke exposure (2011)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi N., Banzono E., Shimoda Y., Oyama H., Kunihiro T., Morita I., Ohta M.
  • 雑誌名: Analytical Methods 巻: 3(9) 号: 9 ページ: 1995-2002
  • DOI: 10.1039/c1ay05083d
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simultaneousdetermination of histamine and prostaglandin D2 using an LC-ESI-MS/MS method with positive/negative ion-switching ionization modes: application to the study ofanti-allergic flavonoids on the degranulation of KU812 cells (2011)
  • 著者名/発表者名: Koyama J., Taga S., Shimizu K., Shimizu, M., Morita I., Takeuchi A.
  • 雑誌名: Analytical and Bioanalytical Chemistry 巻: 401(4) 号: 4 ページ: 1385-1392
  • DOI: 10.1007/s00216-011-5200-3
  • 査読あり
• [学会発表] 実用診断試薬を創出する試験管内分子進化 (6). 改良型scFvを用いるヒト尿中コチニンELISAの確立 (2013)
  • 著者名/発表者名: 森田いずみ, 大山浩之, 渡部芳郎, 平井杏奈, 太田光熙, 小林典裕
  • 学会等名: 日本薬学会第133年会
  • 発表場所: 横浜
• [学会発表] Taxus yunnanensis含有成分の抗アレルギー活性とがん予防効果について (2012)
  • 著者名/発表者名: 守川耕平,信川真智子,信川真貴子,信川京子,森田いずみ,清水香衣,小山淳子
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-30
• [学会発表] 実用診断試薬を創出する試験管内分子進化(4).抗コチニン変異scFvの諸性質 (2012)
  • 著者名/発表者名: 森田いずみ,大山浩之,石井香好,渡部芳郎,太田光熙,小林典裕
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
  • 年月日: 2012-03-29
• [学会発表] 実用診断試薬を創出する試験管内分子進化（4）．抗コチニン変異scFvの諸性質 (2012)
  • 著者名/発表者名: 森田 いずみ，大山 浩之，石井 香好，渡部 芳郎，太田 光熙，小林 典裕
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] Taxus yunnanensis 含有成分の抗アレルギー活性とがん予防効果について (2012)
  • 著者名/発表者名: 守川 耕平，信川 真智子，信川 真貴子，信川 京子，森田 いずみ，清水 香衣，小山 淳子
  • 学会等名: 日本薬学会第132年会
  • 発表場所: 札幌
• [学会発表] 部位特異的変異導入による抗コチニンscFvの試験管内親和性成熟の試み (2011)
  • 著者名/発表者名: 大山浩之,寺本隆佑,宮岡広子,森田いずみ,小林典裕
  • 学会等名: 日本分析化学会第60年会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2011-09-15
• [学会発表] 高親和力変異抗コチニン抗体の単離に用いるcleavableビオチン標識体の合成と性質 (2011)
  • 著者名/発表者名: 森田いずみ,久保智士,大山浩之,小林典裕
  • 学会等名: 日本薬学会第131年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2011-03-29