ＢＲＣＡ１／ＢＡＰ１複合体の機能解析

• 研究課題/領域番号: 23791504
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 外科学一般
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 西川 裕之 聖マリアンナ医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 研究技術員 (90387077)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2013
• 研究課題ステータス: 完了 (2013年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2013年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2012年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2011年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
• キーワード: 癌抑制遺伝子 / 癌 / 脱ユビキチン化 / ガン抑制遺伝子

研究概要

細胞内におけるBAP1と結合するタンパク質の同定を行った。複数の細胞株を用意しFLAGタグ付きのBAP1タンパク質が発現するように遺伝子を導入した後に細胞がDNA損傷を起こすように薬剤又は放射線を照射し細胞を溶解しFLAG抗体にて免疫沈降を行い、プロテアーゼ処理をしてBAP1タンパク質に結合している相互作用因子をペプチド化した。このペプチドを2次元HPLCにて陽イオンカラムと逆相カラムを用いて分画してLC-MSにて分析を行った。51種類の相互作用因子を同定する事が出来た。本実験においてBAP1との相互作用因子としてヒストンシャペロン、クロマチンリモデリング関連のタンパク質が複数見つかった。

研究成果

• [雑誌論文] A DNA-Damage Selective Role for BRCA1 E3 Ligase in Claspin Ubiquitylation, CHK1 Activation, and DNA Repair (2012)
  • 著者名/発表者名: Sato K, Sundaramoorthy E, Rajendra E, Hattori H, Jeyasekharan AD, Ayoub N, Schiess R, Aebersold R, Nishikawa H, Sedukhina AS, Wada H, Ohta T, Venkitaraman AR.
  • 雑誌名: Curr Biol 巻: 22 ページ: 1659-66
  • 査読あり
• [雑誌論文] DNA相同組換え修復と乳癌 (2012)
  • 著者名/発表者名: 太田智彦、西川裕之
  • 雑誌名: メディカルサイエンスダイジェスト 巻: Vol38(1) ページ: 637-640
  • 査読あり
• [雑誌論文] HERC2 Interacts with Claspin and regulates DNA origin firing and replication fork progression (2011)
  • 著者名/発表者名: Izawa N, Wu W, Sato K, Nishikawa H, Kato A, Boku N, Itoh F, Ohta T.
  • 雑誌名: Cancer Res 巻: 71 ページ: 5621-5
  • 査読あり
• [学会発表] Recruitment of phosphorylated NPM1 to sites of DNA damage through RNF8-dependent ubiquitin conjugates (2011)
  • 著者名/発表者名: Ayaka Koike, Hiroyuki Nishikawa, Wenwen Wu, Yukinori Okada, Ashok R Venkitaraman, Tomohiko Ohta
  • 学会等名: EMBO Workshop・The Interface between the Ubiquitin Family and the DNA Damage Response
  • 発表場所: Rovinj, Croatia