細胞分離用酵素剤の最適化とイオンチャネル制御の膵島移植への応用

• 研究課題/領域番号: 23791554
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 福島県立医科大学
• 研究代表者: 穴澤 貴行 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (90566811)
• 研究期間 (年度): 2011 – 2012
• 研究課題ステータス: 完了 (2012年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2012年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2011年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 膵島移植 / 膵島分離 / 糖尿病 / イオンチャネル / 移植・再生医療 / 外科学 / 細胞・組織

研究概要

膵島移植において、高い細胞収量と分離過程の細胞障害回避の両立は重要な課題である。ClassI/II比を最適化したcollagenaseにneutral proteaseを併用すると、従来法であるThermolysinの併用より高い収量が得られることが明らかにされた。また、膵島分離過程にClイオン阻害剤の添加、Clイオンフリーとした細胞外溶液の使用を導入して、膵島分離収量やViabilityはClイオンの制御により改善されることが明らかとなった。さらに、本邦での臨床背景にそって、心停止ドナーモデルを構築し、心停止モデルでも同様の結果が得られることを明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] A new enzyme mixture to increase the yield and transplant rate of autologous and allogeneic human islet product (2012)
  • 著者名/発表者名: （Balamurugan AN） Takayuki Anazawa
  • 雑誌名: Transplantation 巻: 93 号: 7 ページ: 693-702
  • DOI: 10.1097/tp.0b013e318247281b
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mitomycin-C treatment significantly reduces central damage of islets in culture (2012)
  • 著者名/発表者名: Saito T, Saito T, Sato Y, Ise K, Anazawa T, Oshibe I, Haga J, Yamamoto M, Waguri S, Gotoh M.
  • 雑誌名: Pancreas. 巻: 41(2) 号: 2 ページ: 245-252
  • DOI: 10.1097/mpa.0b013e31822461c7
  • 査読あり
• [雑誌論文] 膵島移植症例登録報告（2011） (2012)
  • 著者名/発表者名: 穴澤 貴行
  • 雑誌名: 移植 巻: 47 ページ: 443-449
  • NAID: 10030209416
• [雑誌論文] Improved islet yield and function by use of a chloride channel blocker during collagenase digestion. (2011)
  • 著者名/発表者名: Anazawa T, Sato Y, Saito T, Tsuchiya T, Kenjo A, Kimura T, Haga J, Miyake M, Waguri S, Hazama A, Gotoh M.
  • 雑誌名: Transplantation 巻: 92(8) 号: 8 ページ: 871-877
  • DOI: 10.1097/tp.0b013e31822e6eb4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction of pancreatic tissue densities by an analytical test gradient system before purification maximizes human islet recovery for isletautotransplantation/allotransplantation (2011)
  • 著者名/発表者名: Anazawa T, Matsumoto S, Yonekawa Y, Loganathan G, Wilhelm JJ, Soltani SM, Papas KK, Sutherland DE, Hering BJ, Balamurugan AN
  • 雑誌名: Transplantation 巻: 91(5) 号: 5 ページ: 508-514
  • DOI: 10.1097/tp.0b013e3182066ecb
  • 査読あり
• [学会発表] 先進的組織細胞移植医療発展の先駆的モデルとしての膵島移植臨床開発:その展望と課題 (2012)
  • 著者名/発表者名: 穴澤貴行, 土屋貴男, 見城 明, 伊勢一哉, 齋藤拓朗, 後藤満一
  • 学会等名: 第11回日本組織移植学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2012-08-04
• [学会発表] Disappeared islet graft after intraportal transplantation in the recipient suffered from recurrent sepsis (2012)
  • 著者名/発表者名: Anazawa T, Tsuchiya T, Kenjo A, Haga J, Sato T, Sato N, Ise K, Saito T,Tasaki K, Gotoh M
  • 学会等名: 24th International Congress of the Transplantation Society
  • 発表場所: Berlin, Germany
• [学会発表] 膵島移植の現状と今後の展望 (2012)
  • 著者名/発表者名: 穴澤貴行, 土屋貴男, 見城 明, 伊勢一哉, 芳賀淳一郎, 齋藤拓朗, 後藤満一
  • 学会等名: 第48回日本移植学会総会
  • 発表場所: 名古屋
• [学会発表] Disappeared islet graft after intraportal transplantation in the recipient suffered from recurrent sepsis (2012)
  • 著者名/発表者名: Takayuki Anazawa
  • 学会等名: 24th International Congress of The Transplantation Society
  • 発表場所: Berlin, Germany
• [学会発表] Inhibition of chloride ion influx into islet cells protects islets during pancreatic islet isolation (2011)
  • 著者名/発表者名: Anazawa T, Tsuchiya T, Kenjo A, Haga J, Sato T, Sato N, Saito T, Sato Y, Miyake M, Hazama A, Gotoh M
  • 学会等名: The 13th World congress of International pancreas and islet transplantation association
  • 発表場所: Prague, Czech Republic
• [学会発表] Predicting porcine islet yield by acute C-peptide response to arginine stimulation of donor pigs and pancreas dithizone scoring system. (2011)
  • 著者名/発表者名: Anazawa T, Graham M, Abouaish J, Loganathan G, Hering BJ, A.N. Balamurugan
  • 学会等名: The 13th World congress of International pancreas and islet transplantation association
  • 発表場所: Prague, Czech Republic.
• [学会発表] Mitomycin-C treatment protects islets from the progression of central damage during culture. (2011)
  • 著者名/発表者名: Haga J, Saito T, Anazawa T, Tsuchiya T, Kenjo A, Sato S, Sato N, Saito T, Ise K, Yamamoto M, Waguri S, Gotoh M
  • 学会等名: The 13th World congress of International pancreas and islet transplantation association
  • 発表場所: Prague, Czech Republic
• [学会発表] Cl-チャネル阻害による細胞保護効果の膵島分離への応用-臨床膵島移植確立への細胞生理学的アプローチ- (2011)
  • 著者名/発表者名: 穴澤貴行, 土屋貴男, 見城 明, 芳賀淳一郎, 佐藤 哲, 三宅将生, 狹間章博, 後藤満一
  • 学会等名: 第111回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 東京
• [学会発表] 重症低血糖発作を伴うインスリン依存性糖尿病に対する心停止ドナーからの膵島移植:日本膵・膵島移植研究会事務局報告 (2011)
  • 著者名/発表者名: 穴澤貴行, 土屋貴男, 伊勢一哉, 見城明, 齋藤拓朗, 後藤満一
  • 学会等名: 第47回日本移植学会総会
  • 発表場所: 仙台
• [学会発表] Inhibition of chloride ion influx into islet cells protects islets during pancreatic islet isolation (2011)
  • 著者名/発表者名: Takayuki Anazawa
  • 学会等名: 13th World congress of International pancreas and islet transplantation association
  • 発表場所: チェコ・プラハ
• [学会発表] 先進的組織細胞移植医療発展の先駆的モデルとしての膵島移植臨床開発：その展望と課題
  • 著者名/発表者名: 穴澤 貴行
  • 学会等名: 第11回日本組織移植学会学術集会
  • 発表場所: 東京
• [産業財産権] 細胞分離用酵素溶液及び細胞分離方法、並びに膵島分離方法 (2013)
  • 発明者名: 穴澤貴行
  • 権利者名: 穴澤貴行、狹間章博、後藤満一
  • 出願年月日: 2013-01-29
  • 外国