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等温増幅及びラテラルフロー検出による法科学核酸マーカーの簡便なスクリーニング

研究課題

研究課題/領域番号 23H05370
研究種目

奨励研究

配分区分補助金
審査区分 3240:社会医学、看護学およびその関連分野
研究機関石川県警察科学捜査研究所

研究代表者

久保 誠司  石川県警察科学捜査研究所, 公務員

研究期間 (年度) 2023-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
340千円 (直接経費: 340千円)
2023年度: 340千円 (直接経費: 340千円)
キーワードLAMP / RPA / 唾液 / HTN3 / XIST / LAMP法
研究開始時の研究の概要

犯罪現場で採取された生体試料のスクリーニングは、法科学鑑定において重要な工程である。例えば、性犯罪では男性DNAの確認が重要である。また、体液特異的なmRNAは試料の由来を特定するために利用される。しかし、これらの核酸検出に用いられる(RT-)qPCR法は、操作が煩雑で、時間と手間がかかるという課題がある。本研究では、等温増幅反応(LAMP法・RPA法)と目視検出(ラテラルフロー検出)を組み合わせることで、法科学核酸マーカーの簡便なスクリーニング法を開発することを目的とする。

研究成果の概要

本研究では、等温増幅反応のLAMP法・RPA法を利用し、唾液の指標となるmRNA(HTN3)及び女性由来の指標となるnon-coding RNA(XIST)を迅速・簡便に検出する方法を開発した。HTN3の検出法は、RPA法とLAMP法を組み合わせた高感度な方法であり、0.5 μL相当の唾液が検出可能であった。XISTの検出法は、RT-LAMP法と目視検出(pH指示薬による色調変化)を組み合わせた方法であり、0.5 μL相当の女性血液が検出可能であった。

研究成果の学術的意義や社会的意義

犯罪現場に遺留される生体試料のスクリーニングは、法科学鑑定において重要な工程である。唾液特異的なmRNAや女性特異的なRNAは、スクリーニング検査の有効な指標となるが、従来法(PCR法)による検出は時間・手間がかかるという課題がある。本研究で開発した方法は、等温増幅反応(LAMP法・RPA法)に基づいており、迅速性・簡便性に優れている。そのため、スクリーニング検査、ひいては法科学鑑定の効率化に貢献できる。

報告書

(2件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 研究成果

    (2件)

すべて 2024 2023

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件)

  • [雑誌論文] Female sample screening using colorimetric reverse transcription loop-mediated isothermal amplification (RT-LAMP) targeting non-coding RNA XIST2024

    • 著者名/発表者名
      Kubo Seiji、Amai Keito、Tanaka Jin、Niimi Hideki
    • 雑誌名

      Forensic Science International

      巻: (in press)

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] One-tube, two-step isothermal amplification of histatin 3 mRNA for saliva screening2023

    • 著者名/発表者名
      Kubo Seiji、Amai Keito、Tanaka Jin、Niimi Hideki
    • 雑誌名

      Forensic Science International

      巻: 352 ページ: 1-6

    • DOI

      10.1016/j.forsciint.2023.111847

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス

URL: 

公開日: 2023-04-13   更新日: 2025-01-30  

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