| 研究課題/領域番号 |
23K05155
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分38060:応用分子細胞生物学関連
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| 研究機関 | 立命館大学 |
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研究代表者 |
長野 稔 立命館大学, 生命科学部, 講師 (80598251)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2025年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2024年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2023年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | 細胞膜 / ナノドメイン / シロイヌナズナ / 免疫 / ステロール / 植物免疫 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
細胞膜に点在する微小な脂質領域であるナノドメインは植物免疫に関与する。研究代表者は、蛍光タンパク質プローブGFP-D4Lを用いることにより、植物ナノドメインのイメージングに成功し、さらに病害応答時に細胞膜上のナノドメインの分布が変化することや、ナノドメインの分布変化には免疫受容体の動態が影響を与える可能性を見出した。本研究では、病害応答時におけるナノドメイン分布の制御機構を解明するために、ナノドメイン分布における免疫受容体の機能解析と、ナノドメイン分布を制御する因子の同定に取り組む。
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| 研究実績の概要 |
細胞膜には微小な脂質領域であるナノドメインが点在し、細胞膜タンパク質の多くがナノドメインに局在する。植物のナノドメインが耐病性に関与することが明らかとなっていたが、ナノドメインが植物免疫を制御する分子機構は未解明であった。これまでに、蛍光タンパク質プローブGFP-D4Lを用いることにより、病害応答時に細胞膜上のナノドメインの分布が不均一に変化すること、またナノドメインの分布変化には免疫受容体の動態が影響を与える可能性を見出した。本年度は、免疫受容体であるFLS2とBAK1の欠損変異体とGFP-D4Lを掛け合わせた系統を整備し、各変異体におけるナノドメインの分布を観察した。その結果が、fls2変異体においてナノドメインは通常時においても不均一な分布を示した。その一方で、bak1変異体においては、ナノドメインの分布は均一なままであった。また、イメージング解析により、FLS2とBAK1がナノドメインと共局在することも明らかにした。病害応答時にはFLS2はエンドサイトーシスによりナノドメイン上から減少するが、薬剤処理によりエンドサイトーシスを阻害すると、FLS2がナノドメイン上に留まるとともに、ナノドメインの分布は均一であった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度は、受容体変異体におけるナノドメインの分布を明らかにした。また、受容体のナノドメイン局在および、エンドサイトーシスとナノドメインの関係も明らかにすることができた。そのため、順調に進行したと評価した。
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| 今後の研究の推進方策 |
病害応答時のエンドサイトーシスとナノドメイン分布の関係を調べるために、ダイナミンタンパク質DRP1aのドミナントネガティブ型を用いた解析を行う。そのための系統の準備は現在進めている。また、受容体以外の免疫タンパク質のナノドメイン局在解析も行う。また、ナノドメイン動態を制御する因子の探索を行う。
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