| 研究課題/領域番号 |
23K06615
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(C)
|
| 配分区分 | 基金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 審査区分 |
小区分50010:腫瘍生物学関連
|
|---|
| 研究機関 | 熊本大学 |
|---|
研究代表者 |
山根 大侍 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 特定研究員 (80928747)
|
|---|
| 研究分担者 |
澤 智裕 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (30284756)
諸石 寿朗 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (30647722)
宮本 裕士 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 准教授 (80551259)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2025年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2024年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
|
|---|
| キーワード | 大腸癌 / Fusobacterium nucleatum / 鉄 |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
Fusobacterium nucleatum (F.nucleatum)はヒトの口腔内・腸管内に存在するグラム陰性桿菌である。近年、F. nucleatum感染が消化器癌の進展に関わっていることが報告されており、我々の研究グループは、F. nucleatum陽性の大腸癌症例は有意に予後不良であることを報告した。しかし、その詳細なメカニズムについて完全には解明されていない。我々は鉄代謝が癌の進展につながることを継続的に研究してきた。さらに鉄代謝が腸内細菌に影響を与えることも近年明らかになりつつある。そこで我々はF. nucleatum陽性大腸癌においても鉄が重要な役割を果たしているのではないかと考え、本研究を開始した。
|
| 研究実績の概要 |
本研究の目的は、Fusobacterium nucleatum (F.nucleatum)が大腸癌進展に関わる分子メカニズムを、鉄によるマクロファージ中のNF-κB経路の活性化、炎症環境の増悪という観点から明らかにすることである。大腸癌切除検体を対象とし、定量PCRによるF.nucleatumの発現量、体内鉄量の関連を調査したところ、F. nucleatum高発現症例において鉄沈着マクロファージが存在することが大腸癌の予後不良因子となることが示唆された。次に、ヒトTHP-1マクロファージ細胞内の鉄量を操作した後にF. nucleatumによる刺激を与えRNA sequenceによる発現変動遺伝子の解析を行ったところ、鉄過剰状態でケモカイン関連遺伝子 (CXCL6, CCL8, CCL15)の有意な上昇を認め、鉄によりF. nucleatumに対するマクロファージの炎症形質が増悪されることが明らかになった。次に、マクロファージにおけるF. nucleatum由来の炎症性ケモカイン産生を鉄がどのように制御しているかの分子メカニズムを明らかにしたいと考えた。F. nucleatumはグラム陰性桿菌であり細胞壁にリポポリサッカライド：LPSを含んでおり、過去の報告で、F. nucleatum中のLPSがToll-like receptor 4 (TLR4)-NF-κB経路を活性化し炎症を引き起こすという報告を認めたため、このシグナル経路に着目することとした。THP-1細胞内の鉄量を減少させた後にLPSで刺激して定量PCRを行うとCXCL6, CCL8, CCL15ともに産生が低下し、そこに鉄を加えるとケモカインの産生が回復するという結果であった。つまり、LPSによるマクロファージのケモカイン産生には鉄が必須であることが判明した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マクロファージにおけるF. nucleatum由来の炎症性ケモカイン産生を鉄がどのように制御しているかの分子メカニズムを明らかにすることを目指している。その第一段階としてF. nucleatumが細胞壁に含むLPSを用いた実験でLPSによるマクロファージのケモカイン産生には鉄が必須であることを明らかにすることができた。
|
| 今後の研究の推進方策 |
次にマクロファージをLPS刺激後のTLR4-NF-κB経路が細胞内の鉄量を操作することでどのように変化していくかを調べる予定である。一般的にLPSがTLR4を刺激すると、リン酸化カスケードによりIKKαβがリン酸化され、IκBがリン酸化、分解されNF-κBが核内に移行し転写因子として働き、ケモカインの産生が促進されます。このTLR4-NF-κB経路のIKKαβ・IκBリン酸化を細胞内の鉄量を操作したうえで、Western blottingで評価を行う予定である。
|
