| 研究課題/領域番号 |
23K06896
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分52010:内科学一般関連
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| 研究機関 | 藤田医科大学 |
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研究代表者 |
大江 瑞恵 藤田医科大学, 保健学研究科, 教授 (10247661)
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| 研究分担者 |
河村 吉紀 藤田医科大学, 医学部, 講師 (30581475)
稲垣 秀人 藤田医科大学, 医科学研究センター, 講師 (70308849)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2025年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2024年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
2023年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
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| キーワード | iciHHV-6 / モデル系 / 挿入メカニズム / icIHHV-6 / テロメア / DNA複製 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
ヒトゲノム内部に存在する内在性ウイルス配列は、病原性の観点からも注目されているが、ゲノム内への挿入機構には不明な点が多い。申請者らはヒトヘルペスウイルス6型（HHV-6）の染色体挿入にはHHV-6ゲノムに存在するヒトテロメア様配列が関与することを明らかにしてきた。本研究ではHHV-6ゲノムの染色体挿入機構の解明を目指す。培養細胞を用いた挿入モデルシステムを構築し、DNA複製機構を介した挿入を再現し、その機構を検証することを計画した。挿入モデルシステムの完成により、外来DNAの挿入メカニズムを明らかとし、さらに再活性化についての検証を目指す。
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| 研究実績の概要 |
ヒトゲノム内部に存在する内在性ウイルス配列は、ヒトの進化過程への関与や病原性の観点からも注目されているが、ゲノム内への挿入機構には不明な点が多い。申請者らはヒトヘルペスウイルス6型（HHV-6）の染色体挿入タイプiciHHV-6に関して、新規挿入例を複数同定し、またその挿入にはHHV-6ゲノムに存在するヒトテロメア様配列が関与することを明らかにしてきた。本研究では、挿入メカニズムの解明や再活性化を検証するために、培養細胞を用いた挿入モデルシステムの構築を目的とする。
本年度は、HHV-6Bの挿入に関与すると推定されるDNA塩基配列を抽出し、検証すべき領域を絞り、様々な配列を持つ挿入ベクターの設計を行なった。そして、プラスミドベクターを用いて、絞った領域を含んだ可視化挿入ベクターの構築を行なうことができた。さらに、次年度に向け、細胞への挿入トライアルの検証システムに着手した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
HHV-6BのターゲットとなるDNA塩基配列の特性上クローニングは複雑であり、ベクター構築に時間を有した。
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| 今後の研究の推進方策 |
培養細胞を用いて挿入トライアルを行い、可視化を利用した細胞回収系の構築や、次世代シーケンサーを用いた解析を進行させる。
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