炎症性腸疾患新規マーカーLRGによる糖鎖を介した腸炎制御機構の解明

• 研究課題/領域番号: 23K07426
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分53010:消化器内科学関連
• 研究機関: 兵庫医科大学
• 研究代表者: 新崎 信一郎 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (60546860)
• 研究分担者: 福井 広一 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (60378742) ; 横山 陽子 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (40529004)
• 研究期間 (年度): 2023-04-01 – 2026-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2025年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円); 2024年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2023年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: LRG / 炎症性腸疾患 / 糖鎖 / 腸管免疫 / バイオマーカー

研究開始時の研究の概要

1) 炎症性腸疾患患者におけるLRGの糖鎖解析と臨床経過との関連
患者および健常者血清からLRGを分離精製し、LC-MS法にてLRG糖鎖構造を解析する。血清LRG濃度およびLRG糖鎖変化に基づく、疾患発症・増悪や難治性に関わる因子解析を行う。

2) LRGによる腸炎制御機構の解明
LRG欠損マウスにおける実験腸炎モデルの程度を野生型と比較する。また、IBD患者由来LRG投与による血管内皮細胞株の血管新生能や免疫細胞株のサイトカイン産生能を健常者由来LRGと比較検討し、炎症性腸疾患の治療標的を探索する。

研究実績の概要

1) 炎症性腸疾患患者におけるLRGの糖鎖解析と臨床経過との関連
患者および健常者血清からLRGを分離精製し、LC-MS法にてLRG糖鎖構造を解析する。血清LRG濃度およびLRG糖鎖変化に基づく、疾患発症・増悪や難治性に関わる因子解析を行う。
2) LRGによる腸炎制御機構の解明
LRG欠損マウスにおける実験腸炎モデルの程度を野生型と比較する。また、IBD患者由来LRG投与による血管内皮細胞株の血管新生能や免疫細胞株のサイトカイン産生能を健常者由来LRGと比較検討し、炎症性腸疾患の治療標的を探索する。
1)については、炎症性腸疾患患者におけるLRGの糖鎖解析と臨床経過との関連を検討するため、活動期および寛解期IBD患者、および健常者から血清を採取・保存し、LRG濃度や各種炎症性バイオマーカー値を測定する。さらに血清からLRGを分離精製し、さらに糖ペプチドまで切断した後に、LRG糖鎖構造の解析を行う。初年度は、IBD患者から得られた血清からLRGを分離精製し、その収量や純度の検討を行うとともに、糖鎖解析に関する予備検討を行っている。また患者から得られたLRG値の推移と臨床経過との関連についても合わせて検討している。
2)については、患者血清から実験に十分な量のLRGを得ることが困難であることが判明したことから、現在患者由来リコンビナントLRGを作成しており、作成次第細胞株による検討を順次行っていく予定である。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

患者血清からLRGを高用量かつ高純度に分離精製するのにやや時間を要したが、技術的なハードルはほぼ超えたことから、実際の糖鎖解析に順調に進めるものと考えている。

今後の研究の推進方策

計画どおりに解析を行っていく予定である。

研究成果

• [雑誌論文] White Blood Cell Counts and Future Relapse in Ulcerative Colitis under Low-Dose Thiopurine Treatment in Real-World Practice: A 3-Year Japanese Multi-Center Retrospective Cohort Study (2023)
  • 著者名/発表者名: Kiyohara H, Yamazaki H, Moriya K, Akimoto N, Kawai S, Takenaka K, Fukuda T, Tominaga K, Umeno J, Shinzaki S, Honzawa Y, Takagi T, Ichikawa H, Endo T, Ozaki R, Andoh A, Matsuoka K, Hibi T, Kobayashi T
  • 雑誌名: Inflammatory Intestinal Diseases 巻: 9 号: 1 ページ: 1-10
  • DOI: 10.1159/000535889
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Anti-α6β4 integrin autoantibodies inhibit the binding of laminins to α6β4 integrin in patients with pemphigoid and affect the gastrointestinal tract (2023)
  • 著者名/発表者名: Arase N, Sasaoka Y, Narita J, Kiyohara E, Hashimoto K, Shinzaki S, Nojima S, Takagi J, Fujimoto M.
  • 雑誌名: J Eur Acad Dermatol Venereol 巻: 38(2) 号: 2 ページ: 404-412
  • DOI: 10.1111/jdv.19582
  • 査読あり
• [雑誌論文] Seasonal variations in gut microbiota and disease course in patients with inflammatory bowel disease. (2023)
  • 著者名/発表者名: Mizuki Tani, Shinichiro Shinzaki, Akiko Asakura, Taku Tashiro, Takahiro Amano, Yuriko Otake-Kasamoto, Takeo Yoshihara, Shunsuke Yoshii, Yoshiki Tsujii, Yoshito Hayashi, Takahiro Inoue, Daisuke Motooka, Shota Nakamura, Hideki Iijima, Tetsuo Takehara
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 18 号: 4 ページ: e0283880-e0283880
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0283880
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Short-term clinical evaluation of teduglutide for patients with Crohn's disease on home parenteral support for postoperative short bowel syndrome with intestinal failure (2023)
  • 著者名/発表者名: Sato Toshiyuki、Uchino Motoi、Takeuchi Jiro、Fujihira Yutaro、Shimizu Kazuma、Yokoyama Keiko、Yagi Soichi、Kaku Koji、Takashima Yusuke、Ikenouchi Maiko、Kojima Kentaro、Kawai Mikio、Nagase Kazuko、Kamikozuru Koji、Yokoyama Yoko、Takagawa Tetsuya、Ikeuchi Hiroki、Watanabe Kenji、Shinzaki Shinichiro
  • 雑誌名: Clinical Nutrition 巻: 42 号: 5 ページ: 722-731
  • DOI: 10.1016/j.clnu.2023.03.012
  • 査読あり