変異受容体型チロシンキナーゼの細胞内輸送制御による白血病治療薬の開発研究

• 研究課題/領域番号: 23K07846
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 審査区分: 小区分54010:血液および腫瘍内科学関連
• 研究機関: 近畿大学
• 研究代表者: 田中 宏和 近畿大学, 医学部, 教授 (40360846)
• 研究分担者: 松村 到 近畿大学, 医学部, 教授 (00294083) ; 芹澤 憲太郎 近畿大学, 医学部, 講師 (60548593) ; 森田 泰慶 近畿大学, 医学部, 准教授 (80411594)
• 研究期間 (年度): 2023-04-01 – 2026-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円); 2025年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2024年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 急性骨髄性白血病 / 受容体型チロシンキナーゼ / 細胞内輸送 / チロシンキナーゼ

研究開始時の研究の概要

申請者らは、抗精神病薬CPZが、活性化型変異FLT3やKITを有するAML細胞/幹細胞に対して、RTKの細胞内局在を変化させることで、特異的な殺細胞効果をもたらすことを見出した。本研究では、近年問題となっているTKI耐性に関し、CPZと既存薬剤、FLT3-TKI、新規分子標的薬との併用によりTKI耐性を克服し得るかを検証するとともに、TKI耐性AML細胞の生物学的特性を明らかにする。さらに、CPZによる変異RTKの細胞内局在変化に関わる分子機序を解明することで、より安全で特異性の高い細胞内輸送制御によるAML治療薬の開発を目指す。

研究実績の概要

本研究では、FLT3変異陽性急性骨髄性白血病(AML)において、FLT3-チロシンキナーゼ阻害薬（TKI）耐性を克服する新たな治療法につき検証するとともに、FLT3-TKI耐性AML細胞におけるFLT3-ITDの細胞内局在やシグナル伝達の変化を感受性細胞と比較し、その生物学的特性を明らかにする。さらに、申請者らが見出した抗精神病薬chlorpromazine (CPZ)がもたらす変異RTKの細胞内局在変化に関わる分子機序を解明することで、より安全で特異性の高い細胞内輸送制御による白血病治療薬の開発につなげることを目的としている。
まず、本年度はFLT3-TKI耐性が報告されている二重変異型RTK（FLT3-ITD/N676D、FLT3-ITD/F691L、FLT3-ITD/G697R）をマウスIL3依存性細胞株Ba/F3へ導入し、CPZ単剤、あるいは既存の抗腫瘍薬（Cytarabine）やFLT3-TKI（Gilteritinib, Quizartinib）との併用が、サイトカイン非依存性の増殖に及ぼす影響について解析した。その結果、二重変異型RTKにおいてもCPZは変異RTKの細胞内局在を変化させ、その活性を大きく減少させることで、単独変異の場合と同程度その増殖を抑制した。一方、既存の抗腫瘍薬やFLT3-TKIとの併用では相乗効果は得られなかったものの、相加効果が認められたことから、今後より毒性の少ない治療を開発する上での有用な方法となる可能性がが示唆された。また、CPZ投与によりSTAT5のリン酸化が強く抑制され、恒常的活性型STAT5を導入することで、CPZの増殖抑制は解除された。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度は、FLT3-TKI耐性細胞株を樹立しCPZの抗腫瘍効果の検証を行なった。また、抗腫瘍効果に寄与する下流分子につき詳細に解析した。その結果、FLT3-TKI耐性細胞株においてもTKI感受性株同様にCPZの抗腫瘍効果を認め、その下流分子としてSTAT5のリン酸化抑制が強く関与していることを明らかにした。我々の研究を通して、FLT3の細胞内輸送を標的としたFLT3-TKI耐性AMLに対する治療戦略として、CPZと既存の抗腫瘍薬やFLT3-TKIとの併用の有用性、さらにCPZの抗腫瘍効果および変異RTKの細胞内局在制御に関わる分子機構の検討の重要性が示唆されたことから、ほぼ当初の目標通りに研究を遂行できていると考えられる。

今後の研究の推進方策

現在、上記細胞株におけるFLT3の細胞内局在を、CPZ単剤処理およびTKI併用前後で比較を実施している。今後は、より選択的な細胞内輸送経路の阻害剤による変異RTKの細胞内局在変化、および抗腫瘍効果を検討し、CPZと同様の抗腫瘍効果が得られるかを検証し、CPZによる変異RTKの細胞内局在変化をもたらす分子機序を明らかにする。さらに令和6年度は、FLT3-ITD の細胞内局在変化や下流分子の活性化変化を指標にCPZと同様の効果を示す低分子化合物のスクリーニングを実施する。これらの研究を通じて、活性化型変異RTKの細胞内局在を変化させるという新たな機序で抗腫瘍効果をもたらすことにより、TKI耐性を克服し腫瘍の根絶に挑む。

研究成果

• [雑誌論文] Depletion of Ppp6c in hematopoietic and vascular endothelial cells causes embryonic lethality and decreased hematopoietic potential (2024)
  • 著者名/発表者名: Kondo Ayumi、Tanaka Hirokazu、Rai Shinya、Shima Hiroshi、Matsumura Itaru、Watanabe Toshio
  • 雑誌名: Experimental Hematology 巻: 133 ページ: 104205-104205
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2024.104205
  • 査読あり
• [雑誌論文] Long-term effectiveness and safety of high dose chemotherapy followed by autologous stem cell transplantation in daily practice in patients with diffuse large B-cell lymphoma (2023)
  • 著者名/発表者名: Haeno Takahiro、Rai Shinya、Miyake Yoshiaki、Inoue Maiko、Fujimoto Ko、Fujii Aki、Iwata Yoshio、Minamoto Shuji、Taniguchi Takahide、Kakutani Hiroaki、Inoue Hiroaki、Kumode Takahiro、Serizawa Kentaro、Taniguchi Yasuhiro、Hirase Chikara、Morita Yasuyoshi、Tanaka Hirokazu、Tatsumi Yoichi、Ashida Takashi、Matsumura Itaru
  • 雑誌名: Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ 巻: 63 号: 2 ページ: 99-107
  • DOI: 10.3960/jslrt.23001
  • ISSN: 1346-4280, 1880-9952
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of elotuzumab for multiple myeloma in reference to lymphocyte counts and kappa/lambda ratio or B2 microglobulin (2023)
  • 著者名/発表者名: Nakamura N, Arima N, Takakuwa T, Yoshioka S, Imada K, Fukushima K, Hotta M, Fuchida SI, Kanda J, Uoshima N, Shimura Y, Tanaka H, Hino M; Kansai Myeloma Forum.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 13 号: 1
  • DOI: 10.1038/s41598-023-32426-6
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of cytogenetic abnormalities in symptomatic multiple myeloma; a Japanese real-world analysis from Kansai Myeloma Forum (2023)
  • 著者名/発表者名: NakayaA,ShibayamaH,UoshimaN,YamamuraR,YoshiokaS,ImadaK,ShimuraY,HottaM,MatsuiT,KosugiS,HanamotoH,UchiyamaH,YoshiharaS,FuchidaSI,OndaY,TanakaY,OhtaK,MatsudaM,KandaJ,YokoA,KiyotaM,KawataE,TakahashiR,FukushimaK,TanakaH,YagiH,TakakuwaT,HosenN,ItoT,ShimazakiC,Takaori-KondoA,KurodaJ,MatsumuraI,HinoM.
  • 雑誌名: Leukemia Research Reports 巻: 20 ページ: 100395-100395
  • DOI: 10.1016/j.lrr.2023.100395
  • 査読あり
• [雑誌論文] Real-world data on induction therapy in patients with transplant-ineligible newly diagnosed multiple myeloma: retrospective analysis of 598 cases from Kansai Myeloma Forum (2023)
  • 著者名/発表者名: Shimura Y, Shibayama H, Nakaya A, Yamamura R, Imada K, Kaneko H, Hanamoto H, Fuchida SI, Tanaka H, Kosugi S, Kiyota M, Matsui T, Kanda J, Iida M, Matsuda M, Uoshima N, Shibano M, Karasuno T, Hamada T, Ohta K, Ito T, Yagi H, Yoshihara S, Shimazaki C, Nomura S, Hino M, Takaori-Kondo A, Matsumura I, Kanakura Y, Kuroda J.
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 118 号: 5 ページ: 609-617
  • DOI: 10.1007/s12185-023-03653-4
  • 査読あり
• [学会発表] ダラツムマブ治療後にエロツズマブの効果は低下する：関西骨髄腫フォーラムデータベースによる後方視的解析 (2023)
  • 著者名/発表者名: 中村 直和、有馬 靖佳、高桑 輝人、吉岡 聡、今田 和典、福島 健太郎、堀田 雅章、淵田 真一、 諫田 淳也、魚嶋 伸彦、志村 勇司、田中 宏和、太田 健介、小杉 智、八木 秀男、吉原 哲、山村 亮介、足立 陽子、花本 仁、柴山 浩彦、保仙 直毅、伊藤 量基、島崎 千尋、高折 晃史、黒田 純也、松村 到、日野 雅之
  • 学会等名: 第85回日本血液学会学術集会