| 研究課題/領域番号 |
23K08763
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56030:泌尿器科学関連
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
田口 和己 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (00595184)
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| 研究分担者 |
田上 辰秋 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(薬学), 准教授 (10609887)
安藤 亮介 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (30381867)
安井 孝周 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (40326153)
海野 怜 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (40755683)
岡田 淳志 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (70444966)
杉野 輝明 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (70881746)
濱本 周造 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (80551267)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2025年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2024年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
2023年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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| キーワード | 尿路結石 / マクロファージ / ナノ粒子 / マイクロバブル |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、Mφの結晶貪能を利用した「尿路結石の溶解治療」の開発のため、ナノ粒子の取り込みと超音波標的マイクロバブル破壊による組織選択性に着目し、臨床応用を目指したiPS細胞での実証を含む以下の医工薬連携研究を行う。
[1] ナノ粒子取り込みMφの結晶貪食活性化による尿路結石形成の抑制
[2] 超音波標的マイクロバブル破壊を利用した腎特異的Mφ活性化治療の確立
[3] iPS細胞由来の3次元培養モデルにおけるナノ粒子-マイクロバブル治療の実証
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| 研究実績の概要 |
【背景・目的】これまでに私たちは、マクロファージ（Mφ）が尿路結石の形成および消失に関与していることを報告してきた。また、抗炎症性M2Mφが強い結石食作用を持ち、結石形成を抑制することも示した。しかし、Mφによる結石食作用のメカニズムは明確ではなく、体内での分化誘導方法も課題である。このため私たちは、ナノ粒子を使用した薬物送達システム（DDS）によるMφの貪食作用の向上の可能性に着目した。今回、MΦの貪食作用向上のため、これまでの研究成果からビオグリタゾン（PGZ)をナノ粒子装填薬剤として選んだ。
【方法】6-8週齢のC57BL/6J雄マウスから骨髄由来のMφ（BMDM）を採取した。シュウ酸カルシウム一水和物（COM）、COM+PGZ（5μM）、およびCOM+PGZ（10μM）を添加した3群のBMDMにおいて、M2Mφへの分化誘導をフローサイトメトリー（BD FACSCantoII）で評価した。PGZをカプセル化したナノ粒子は、PLGA（L/G比 75:25）とPGZを使用したemulsion solvent diffusion methodで調製した。
【結果】フローサイトメトリーにより、BMDM+COM群では30,000細胞中67個、BMDM+COM+PGZ（5μM）群では212個、BMDM+COM+PGZ（10μM）群では155個のM2Mφ（F4/80(+)およびCD206(+)で示される）が確認され、PGZ装填群で増加が示された。
【結論】PGZをカプセル化したナノ粒子がM2Mφへの分化誘導を向上させる可能性が示されたが、さらなる検証が必要である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本年度は、上記のin vitroの研究に加えて、モデルマウスを利用したin vivoの研究も予定していた。しかし、in vitroの研究に使用する骨髄由来MΦの確保のためのマウス実験に時間を要したことと、ナノ粒子作成の調整、ナノ粒子投与のための尾静脈注射の手技確立などの問題があり、予定より遅れている。
これらの準備がほぼ整ってきているため、次年度に早々に実験をすすめていきたい。
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| 今後の研究の推進方策 |
ナノ粒子の作成・評価を行う薬学研究科、薬物送達学分野での研究体制が整いつつある。さらに今後はナノ粒子の調整のみならず、基本的なin vitroの研究も同施設で行っていく予定であり、実験速度をさらに加速させていく。
さらにin vivo研究についても体制が整っているので、医学研究科にてマウス実験をすすめていく。
マイクロバルブについては、ディスカッションとpreliminaryな研究をすすめていくことで、すぐにでもin vitro, in vivoな研究が行えるよう、体制を整えていきたい。
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