| 研究課題/領域番号 |
23K08824
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分56040:産婦人科学関連
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| 研究機関 | 山口大学 |
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研究代表者 |
竹谷 俊明 山口大学, 医学部附属病院, 准教授 (70464328)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2025年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2024年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2023年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
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| キーワード | 子宮内膜間質細胞 / 脱落膜化 / cAMP / MPA / 遺伝子発現 / プロゲステロン |
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| 研究開始時の研究の概要 |
ヒト子宮内膜間質細胞を様々な刺激で脱落膜化を誘導し、RNA-sequenceを行う。それぞれの刺激で特異的に発現が変化する遺伝子の特徴を解析し、刺激間で比較することにより、in vitro脱落膜化における刺激間の違いを同定する。また、ヒト子宮内膜のsingle cell RNA-sequenceのデータと比べることで、in vitroでの脱落膜化と、実際に生体内で起こっている脱落膜化における遺伝子発現の違いや、in vitroのどの刺激方法が最もin vivoに近いのかということについて検討する。
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| 研究実績の概要 |
子宮内膜間質細胞は、プロゲステロンにより脱落膜化という形態的・機能的に非常にダイナミックな変化を生じる。この脱落膜化は着床の成立や初期の妊娠維持に不可欠である。これまで、子宮内膜の脱落膜化についてはin vitroで様々な研究が行われてきた。昨年度は、in vitroにおけるいくつかの脱落膜化刺激方法（cAMP、cAMP+MPA、MPA、Estradiol+MPAなど）を比較したところ、刺激に応じて異なる細胞機能が誘導されることが明らかとなった。今年度は、個体差を考慮し多症例検体でreal time RT-PCRで発現変動遺伝子の確認実験を行った。また、ヒト月経周期子宮内膜のsingle cell RNA-sequenceのデータを用いてin vivoの間質細胞の脱落膜化過程において発現が変化する遺伝子を抽出した。これらの遺伝子のGene ontology解析を行うことで、in vivoの脱落膜化において変化する細胞機能を同定した。
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| 現在までの達成度 |
現在までの達成度
2: おおむね順調に進展している
理由
ヒト子宮内膜間質細胞を1) cAMP単独、2) cAMP＋MPAで4日間刺激する群、3) MPA単独、4) Estradiol＋MPAで14日間刺激する群の4群とそれぞれのコントロール群から回収したtotal RNAを抽出し、RNA-sequenceによりそれらの遺伝子発現について網羅的に解析を行い、群間で多くの発現が異なる遺伝子を同定した。また、個体差を考慮し多症例検体でreal time RT-PCRで発現変動遺伝子の確認実験を行った。ヒト月経周期子宮内膜のsingle cell RNA-sequenceのデータ（Nat Med. 2020）を用いて増殖期後期の子宮内膜間質細胞（非脱落膜化細胞）と分泌期後期の子宮内膜間質細胞（脱落膜化細胞）の遺伝子発現データを取得し比較することで、in vivoの間質細胞の脱落膜化過程において発現が変化する遺伝子を抽出した。これらの遺伝子のGene ontology解析を行うことで、in vivoの脱落膜化において変化する細胞機能を同定した。
以上のことを同定するにいたったので、おおむね順調に進行していると考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
vivoとvitroの脱落膜化データをそろえることができたので、どのin vitroでの刺激方法が、よりvivoの脱落膜化の状態を反映しているかを調べる。これにより、より生体内の脱落膜化に近いin vitroでの脱落膜化刺激方法を明らかにしたい。また、どのようなホルモン・成長因子を加えればよりvivoの脱落膜化の状態に近づけることができるかも明らかにしたい。
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