| 研究課題/領域番号 |
23K09368
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
大和地 正信 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任講師 (70451747)
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| 研究分担者 |
伊豫田 学 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (40431746)
坂本 洋右 千葉大学, 医学部附属病院, 講師 (50451745)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2025年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2024年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | 人工合成環状RNA / ノンコーディングRNA / microRNA / Non-coding RNA / miRNA / 環状RNA / 口腔癌 / エクソソーム |
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| 研究開始時の研究の概要 |
口腔癌において発現が低下している環状RNA (circRNA-102450) を同定し, 口腔癌抑制型環状RNAとして新たながん治療の糸口となることを報告した．本研究ではその継続的研究として, 口腔癌促進型環状RNAに着目し, 口腔癌特異的な「環状RNA-miRNA-mRNA」の経路を同定し, 口腔癌の進行および転移との関連性を解明したいと考えている. さらに, 口腔癌特異的接着能を有するエクソソームに本研究にて同定された口腔癌促進型環状RNAのsiRNAを搭載することで, 口腔癌促進型環状RNAの発現抑制を実現させ, 核酸医薬としての可能性を検討したいと考えている.
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| 研究実績の概要 |
本研究では以下の事項を明らかにし, 口腔癌における環状RNAーmiRNAー遺伝子の経路の種類や増殖, 浸潤, 転移などの機能の調整をしているかどうかを明らかにする.
1. 口腔癌細胞株における口腔癌促進型環状RNAの同定とそれらの発現状況
2. 口腔癌細胞株における口腔癌促進型環状RNAのターゲットとなるmiRNA・mRNAの存在
また, 口腔癌促進型環状RNAや, ターゲットとなるmiRNAの発現量を調整することで環状RNAーmiRNAー遺伝子の経路の検証を行い, 口腔癌促進型環状RNAや, ターゲットとなるmiRNAの発現の変動に伴う, 口腔癌細胞の細胞増殖能, 浸潤能, 遊走能の変化を確認する.
現在, 口腔癌に特異的に高発現している候補口腔癌特異的microRNA群を同定した. さらに, 口腔癌促進型環状RNAのターゲットとなるmiRNAとmRNAの吸着をルシフェラーゼアッセイにより確認した.
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
口腔癌に特異的に高発現している口腔癌促進型環状RNAの同定が完了し、現在口腔癌促進型環状RNAのターゲットとなるmiRNAとmRNAの検索が進行中のため.
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| 今後の研究の推進方策 |
口腔癌促進型環状RNAの発現を抑制するsiRNAをリポフェクション法等により口腔癌細胞株に導入する. さらに, Network解析やqRT-PCR等によってその下流遺伝子の発現量を調整することで起きる「環状RNA-miRNA-遺伝子」の発現量の変化を確認する. それにより細胞内シグナルの検証を行うことが可能となる. また, 口腔癌促進型環状RNA発現抑制細胞株における増殖, 浸潤・転移に対する機能を, Matrigel-coated TranswellやWound healing 法などを用いて解析を行う.
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