| 研究課題/領域番号 |
23K10797
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分59040:栄養学および健康科学関連
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
原 康洋 大阪大学, 大学院医学系研究科, 特任研究員(常勤) (70568617)
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| 研究分担者 |
平野 賢一 大阪大学, 大学院医学系研究科, 特任教授(常勤) (30332737)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,680千円 (直接経費: 3,600千円、間接経費: 1,080千円)
2025年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2024年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | TGCV / CES1 / カプリン酸 / トリグリセリド / 中性脂肪蓄積心筋血管症 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
中性脂肪蓄積心筋血管症(TGCV)は心筋へのトリグリセリド(TG)蓄積を来す難病であり、リパーゼATGLの欠損を主要な原因とする。申請者は心臓にTGが蓄積するATGLノックアウトマウスの心臓プロテオーム解析を行い、carboxylesterase 1が最も減少していること、その減少がTGCV治療能を持つカプリン酸(CA)食によって改善することをすでに見出した。
本研究では、細胞を用いてヒトのcarboxylesterase 1(CES1)の脂肪滴TG代謝における役割およびCAによるCES1の活性調節を調べ、CES1がCAによる脂肪蓄積治療の標的となるか否かを明らかにする。
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| 研究実績の概要 |
中性脂肪蓄積心筋血管症(Triglyceride deposit cardiomyovasculopathy;TGCV)は、心筋へトリグリセリド(TG)が蓄積する難病でありadipose triglyceride lipase(ATGL)の欠損を主要な原因とする。研究代表者は心臓にTGが蓄積するATGLノックアウトマウスの心臓プロテオーム解析を行い、carboxylesterase 1d(Ces1d)が最も減少していることを見出した。ヒトでの同酵素CES1はTG分解活性を有するとされるが脂肪滴におけるTG代謝への役割はわかっていない。本研究ではCES1の細胞内TG代謝における役割およびTGCV治療薬カプリン酸によるCES1の調節を調べ、CES1がカプリン酸による治療の標的となるか否かを明らかにすることを目的とする。
令和5年度はCES1の細胞内でのTG分解能を明確にする目的で、CES1の細胞内発現用の種々のコンストラクトを構築した。それらは細胞内での局在を見るため蛍光タンパク質との融合体とし、一過性高発現、安定発現両方に対応している。また、酵素活性と細胞内TGの分解を詳細に調べるためカルボキシエステラーゼ活性に重要であるとされるSerをAlaに置換した変異体も作製した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究の第一の目的はCES1の細胞内のTG蓄積を改善する酵素としての機能を明確にすることである。そのために細胞内発現用の種々のコンストラクトを、変異体を含め作製し準備を整えたことは、初年度の進捗としては十分であると考えられるため。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和6年度は、令和5年度において作製したCES1発現コンストラクトを用いて、脂肪酸負荷により脂肪滴を蓄積させた種々の細胞内でCES1を発現させることによりそのトリグリセリド分解能を詳細に検討する。
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