| 研究課題/領域番号 |
23K14061
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分42010:動物生産科学関連
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| 研究機関 | 帯広畜産大学 |
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研究代表者 |
堀内 里紗 帯広畜産大学, 畜産学部, 助教 (50823697)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
中途終了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2025年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2024年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2023年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
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| キーワード | 免疫グロブリンA / 糖鎖 / ミルク / 分泌型免疫グロブリンA / 家畜初乳 / 糖鎖構造 / 腸内細菌叢 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
採集したウシ初乳から分泌型免疫グロブリンA（secretory immunoglobulin A, sIgA）を分離・精製し、精製したsIgAの糖鎖構造の網羅的解析を行い、個体間における糖鎖の構造多様性や不均一性を明らかにする。また、初乳採取に用いたウシの子牛から糞便を採取し、次世代シーケンサーを用いた16S rRNA菌叢解析を行い、ウシ初乳に含まれるsIgAの糖鎖構造パターンと合わせて子牛糞便菌叢との相関を明らかにする。
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| 研究実績の概要 |
分泌型免疫グロブリンA（secretory immunoglobulin A, sIgA）が二量体として粘膜中に分泌され生体防御の最先端で働くことは、古くから知られていた。ところが近年、sIgAは体外への微生物排除だけでなく、腸管免疫系を介した微生物との共生関係の樹立や、微生物の宿主体内移行に関与することが明らかとなってきた。このように宿主と微生物の間を取り持つ生体成分としてsIgAは位置付けられ、その働きにはsIgAの糖鎖が重要な役割を果たすことが示唆されている。乳、特に分娩直後に分泌される初乳にはsIgAが豊富に含まれており、新生子の腸内細菌叢の確立に寄与することが予想される。そこで本研究は、入手が容易な家畜初乳からsIgAを精製し、その糖鎖構造を網羅的に解析し、さらに子の糞便菌叢を解析することでsIgAを介した腸内細菌叢の形成機構の解明を目的とした。
帯広畜産大学フィールド科学センターにて飼育するHolstein-Friesian種10頭から、それぞれ分娩後に初回採取した初乳100 mLを試料として用いた。初乳試料を回収後、タンパク質成分の分解を防ぐため、速やかに哺乳類用プロテアーゼ阻害剤カクテルを添加した。次いで遠心分離により脱脂し、得られた脱脂乳から酸沈殿法によりカゼインを除去した。次いで孔径0.2 μmのマイクロフィルターでろ過し、得られたろ液をチオエーテル基結合ゲル（T-gel）を用いたアフィニティ精製に供した。溶出したIg画分をToyopearl HW-55カラムを用いたゲル濾過に供し、sIgA画分を回収した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
2023年9月より療養のために休職したため。
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| 今後の研究の推進方策 |
2024年7月より民間企業へ異動したため、辞退する。
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