体外培養系を利用したスクリーニングによる卵母細胞の静止期維持の機能因子の同定

• 研究課題/領域番号: 23K18137
• 研究種目: 挑戦的研究(萌芽)
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 中区分44:細胞レベルから個体レベルの生物学およびその関連分野
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 永松 剛 山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (70453545)
• 研究期間 (年度): 2023-06-30 – 2026-03-31
• 研究課題ステータス: 交付 (2023年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2025年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2024年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円); 2023年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: 卵母細胞 / 静止期

研究開始時の研究の概要

DNA切断活性の無いdCAS9とSugTagの融合タンパクと、SunTagに対する抗体（Fv）と転写活性化因子であるVP64の融合タンパクとを発現させることによってsgRNAを標的として遺伝子の活性化を誘導することができる。この強制発現系をFOXO3欠損ES細胞に導入し、転写因子およびにDNA結合タンパクに対するsgRNA libraryの機能によって誘導されてくる原始卵胞を回収することから候補因子を同定する。この候補因子に関してノックアウトES細胞を作成し、再び体外培養系で検証して原始卵胞が誘導されてこないものを機能因子として同定する。