| 研究課題/領域番号 |
23K21377
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| 補助金の研究課題番号 |
21H02715 (2021-2023)
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 基金 (2024)
補助金 (2021-2023) |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分49030:実験病理学関連
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| 研究機関 | 徳島大学 (2024)
京都大学 (2021-2023) |
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研究代表者 |
寺井 健太 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 教授 (20616073)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
15,470千円 (直接経費: 11,900千円、間接経費: 3,570千円)
2024年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2023年度: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2022年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2021年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
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| キーワード | イメージング / 光遺伝学 / 深部観察技術 / FRET / 生体イメージング / 腫瘍免疫排除 / プロスタグランジンE2 / 蛍光生体イメージング / 腫瘍微小環境 / 細胞間情報伝達 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
アデノ随伴ウイルスを用いて作出した遺伝子をマウスに導入し、その効果を顕微鏡下にて検証する。
A)NIR-FPカルシウムセンサーの改良: 遊離カルシウム結合領域と、その結合領域の認識配列を改良することで更なる高感度化を目指す。
B)NIR-FPキナーゼバイオセンサー開発: 種々の組み合わせを用いて、プロトタイプとなり得るものをスクリーニングする。
C)NIR-FPを用いた血管造影法の開発: AAVのSerotypeの選択を進め、マウス環境下における最適化を行う。
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| 研究実績の概要 |
プロスタグランジンE2(PGE2)は腫瘍微小環境において、がん免疫を抑制することが知られており、我々はその分泌機序の一端を明らかにしている。本年は生体マウス皮膚基底層と培養細胞におけるPGE2分泌機序について、光遺伝学によりカルシウムシグナルの再構築を行い、生体内の皮膚上皮におけるカルシウムシグナルの表現型の一端と、そのメカニズムを明らかにした。
プロテインキナーゼA(PKA)はcAMPの細胞内濃度上昇により活性化することが知られている。我々はこのPKA活性を可視化するツールを用いて犬腎上皮細胞(MDCK)とマウス皮膚基底層を観察したところ、同心円状に広がるPKA活性化を世界で初めて見出すことに成功した。この事象にradial spread of PKA activation (RSPA) と名付け、詳細な分子機構を解析した。その結果、RSPAはPGE2の分泌を介することが明らかとなった。
更に、このPGE2分泌はカルシウムシグナル阻害によって抑制されたので、光遺伝学ツールを用いてカルシウムシグナルとPGE2分泌の関連性を解析した。その結果、PGE2分泌は、カルシウムシグナルの閾値によって制御されていることが明らかとなった。
また、皮膚基底層におけるPGE2分泌には、上皮成長因子受容体(EGFR)の下流に存在する、細胞外シグナル調節キナーゼ(ERK)の活性が寄与している事は知られている。我々は、このERK活性が PGE2分泌過程におけるカルシウムシグナルの閾値を決定している事を見出した。
また、これらの内容を既に論文としてまとめ、Pre-printとして発表している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
生体内におけるPGE2分泌の制御機構の一端が明らかとなった。今後は、この事象ががん細胞と癌免疫機構にも当てはまるか否か検討していく。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在、一回のPGE2分泌による分泌量を計測する実験系を立ち上げている。従来得られなかった【PGE2分泌量】という情報からがん細胞の新たな特性を見出せるか検討していく。
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