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γ-グルタミル-S-アリルシステインによる拮抗細菌集積の機構解明

研究課題

研究課題/領域番号 23K23609
補助金の研究課題番号 22H02344 (2022-2023)
研究種目

基盤研究(B)

配分区分基金 (2024)
補助金 (2022-2023)
応募区分一般
審査区分 小区分39040:植物保護科学関連
研究機関岐阜大学

研究代表者

清水 将文  岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (60378320)

研究分担者 市橋 泰範  国立研究開発法人理化学研究所, バイオリソース研究センター, チームリーダー (20723810)
柳瀬 笑子  岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (60313912)
研究期間 (年度) 2022-04-01 – 2025-03-31
研究課題ステータス 交付 (2024年度)
配分額 *注記
17,550千円 (直接経費: 13,500千円、間接経費: 4,050千円)
2024年度: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円)
2023年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2022年度: 8,190千円 (直接経費: 6,300千円、間接経費: 1,890千円)
キーワード土壌微生物叢制御 / 拮抗細菌 / 発病抑止土壌 / ジペプチド / ネギ類 / γ-グルタミル-S-アリルシステイン / γ-グルタミルシステイン / グルタチオン / フザリウム萎凋病 / 発病抑止性 / 微生物叢 / γ‐グルタミル‐S‐アリルシステイン / アミノ酸
研究開始時の研究の概要

ネギ類の混植や輪作には、土壌伝染性フザリウム病を抑制する効果がある。研究代表者らは、土壌への拮抗細菌群の集積が同効果の主原因であることを明らかにした。さらに、ネギ類が産生するγ‐グルタミル‐S‐アリルシステイン(GSAC)が拮抗細菌の集積原因であることも突き止めた。本研究では、拮抗細菌(シュードモナス菌)のゲノム比較、GSACの動態解析、GSACおよびGSAC分解産物に対する微生物応答の解析などを行い、GSACによる拮抗細菌集積のメカニズムを解明する。本研究は“土壌微生物叢制御による病害防除”という革新的技術の開発への道を拓く重要な科学的知見を提供するものである。

研究実績の概要

γ-グルタミル-S-アリルシステイン(GSAC)の土壌施用で誘導される拮抗細菌集積を介したフザリウム萎凋病抑止性のメカニズムを明らかにするため、GSACと構造が類似のペプチドであるγ-グルタミルシステイン(GGC:システインとグルタミン酸で構成)およびグルタチオン(GSH:システイン、グルタミン酸、グリシンで構成)を土壌に施用し、GSAC施用と同様の効果が得られるかを検証した。その結果、GSAC区ではキュウリつる割病(フザリウム萎凋病の一種)の発病が顕著に抑制されたのに対して、GGC区とGSH区では抑制されなかった。さらに、土壌微生物カクテルとGSAC、GGCまたはGSHを添加した液体培地にキュウリつる割病菌を接種し、同病原菌の増殖を比較した結果、GSAC区でのみ増殖が抑制された。これらのことから、拮抗細菌集積を介した発病抑止性の誘導効果は、S-アリルシステイン(SAC)とグルタミン酸(Glu)から成るGSAC特有のものであることが明らかとなった。つぎに、対照土壌および各ペプチド施用土壌から蛍光性シュードモナス菌(FP菌)を分離したところ、GSAC施用土壌からのみ同菌が高頻度で分離された。この結果は、GSAC施用による発病抑制効果には、既報のとおり、FP菌が関与することを示唆している。一方で、前年度までの研究において、GSACと同様に発病抑止性を誘導できることが明らかとなったSACとGluの混合液を施用した土壌からは、FP菌がほとんど分離できなかった。このことから、GSAC施用とSAC・Glu施用は異なるメカニズムで発病抑止性を誘導しており、GSACが分解されて生成されるアミノ酸(SACとGlu)ではなく、GSAC自身が拮抗性FP菌の集積を誘導する原因であると推察された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

年度当初の計画とは研究の進め方が違ってはいるが、拮抗細菌集積の原因がGSAC自身であることを明らかにできた点や、蛍光性シュードモナス(FP菌)が発病抑制の原因であることが改めて確認がきたことから、当初の目的達成に大きく近づいたと考えている。一方で、FP菌のゲノム解析や細菌叢解析などに着手できなかった点は、当初計画より遅れている。以上のことを総合して、おおむね順調に進展していると判断した。

今後の研究の推進方策

拮抗細菌(FP菌)集積はGSACそのものにより誘導される可能性が浮上したため、FP菌のGSACに対する応答性を詳細に解析する必要が出てきた。2024年度は、この点を中心に解析を進めたい。また、細菌叢解析やGSACの土壌中での動態解析など未着手の実験も実施し、研究目標を達成したい。

報告書

(2件)
  • 2023 実績報告書
  • 2022 実績報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて 2024 2023 2022

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (6件) (うち招待講演 6件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] 発病抑止力を高めるための土壌微生物叢の改善―土着拮抗微生物を活かした土壌病害防除―2023

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 雑誌名

      作物生産と土づくり

      巻: 55 ページ: 14-18

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [雑誌論文] The Stimulation of Indigenous Bacterial Antagonists by γ-Glutamyl- <i>S</i> -Allyl- <scp>l</scp> -Cysteine Increases Soil Suppressiveness to Fusarium Wilt2022

    • 著者名/発表者名
      Nishioka Tomoki、Suga Haruhisa、Shimizu Masafumi
    • 雑誌名

      Applied and Environmental Microbiology

      巻: 88 号: 24

    • DOI

      10.1128/aem.01554-22

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 土壌病害防除のための微生物叢改変技術2022

    • 著者名/発表者名
      西岡友樹・清水将文
    • 雑誌名

      化学と生物

      巻: 60 ページ: 182-188

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 病害抑止的な土壌微生物叢をつくり出す魔法の薬の開発に向けて2024

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 学会等名
      日本農芸化学会2024度大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 農作物を病気から守る土壌微生物とその活用法2023

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 学会等名
      日本土壌微生物学会2023年度千葉大会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 発病抑止土壌の創造 植物病理屋の夢とロマンについて2023

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 学会等名
      生態と防除研究会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 土壌の病害抑止力を高める拮抗微生物集積誘導剤の開発に向けて2023

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 学会等名
      第4回 日本生物防除協議会オンラインシンポジウム
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 発病抑止土壌をつくるという夢を叶えたい2023

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 学会等名
      植物病理を紡ぐ会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] 発病抑止力を高めるための土壌微生物叢の改善―土着拮抗微生物を活かした土壌病害防除―2022

    • 著者名/発表者名
      清水将文
    • 学会等名
      土づくり推進フォーラム
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 招待講演
  • [産業財産権] 土壌病害抑制剤2023

    • 発明者名
      清水将文、西岡友樹、外山耕、住吉隼斗、三村尚毅
    • 権利者名
      清水将文、西岡友樹、外山耕、住吉隼斗、三村尚毅
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      2023-127457
    • 出願年月日
      2023
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書

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公開日: 2022-04-19   更新日: 2024-12-25  

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