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水分子との相互作用から解き明かすトレハロースの生体保護機構

研究課題

研究課題/領域番号 23K23730
補助金の研究課題番号 22H02465 (2022-2023)
研究種目

基盤研究(B)

配分区分基金 (2024)
補助金 (2022-2023)
応募区分一般
審査区分 小区分41040:農業環境工学および農業情報工学関連
研究機関京都大学

研究代表者

白神 慧一郎  京都大学, 農学研究科, 助教 (80795021)

研究期間 (年度) 2022-04-01 – 2025-03-31
研究課題ステータス 交付 (2024年度)
配分額 *注記
18,330千円 (直接経費: 14,100千円、間接経費: 4,230千円)
2024年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2023年度: 780千円 (直接経費: 600千円、間接経費: 180千円)
2022年度: 16,510千円 (直接経費: 12,700千円、間接経費: 3,810千円)
キーワードトレハロース / 二糖 / ポリオール / 誘電分光 / 水和
研究開始時の研究の概要

二糖のトレハロースは高い保水性と氷成長抑制機能を持つ生体保護物質として経験的に知られており、安全性の高い食品添加剤として広く用い られている。一方でその分子論的な機序は十分な理解が進んでいなかったものの、分光学的手法によってトレハロースと水の分子間相互作用が 生体保護機能の根源であることが明らかになりつつある。そこで本研究では、0.5 GHz~120 THzに及ぶ超広帯域分光を実現することで分光学的 な情報量を格段に増加させ、トレハロースが高い保水性と氷成長抑制を示す分子論的機序を解明する。

研究実績の概要

二糖のトレハロースは高い保水性と氷成長抑制機能を持つ生体保護物質として経験的に知られており、安全性の高い食品添加剤として広く用いられている。ただしその分子論的な機序は十分に理解が進んでいないため、本研究ではマイクロ波から赤外領域に及ぶ超広帯域分光測定を用いることで、トレハロースと水の分子間相互作用が生体保護機能にいかに関与しているかを明らかにすることを目指す。
トレハロース、スクロース、マルトースを対象に二糖水溶液のマイクロ波誘電分光を行ったところ、二糖の中でもトレハロースが最も“リジッドな”水和殻を形成して水を効果的に保持していることが分子レベルで明らかになった。これは、トレハロースは2個の単糖が二枚貝を作るようにグリコシド結合することで、貝の内側では水和水が安定的に保持されていることに起因すると考えられる。さらに、このようなトレハロースの水和優位性は温度低下とともに顕著になる傾向が認められたことから、低温下における氷成長抑制機能にも水とトレハロースの相互作用が密接に関係していることが考えられる。
また、二糖と同様に生体保護機能を持つことが知られているポリオールに対しても同様に分光解析を実施したところ、ポリオールは二糖よりも水和能力が著しく大きいことが明らかになった。そこで熱分析や密度測定を併用してその原因を追求したところ、ポリオールでは親水性OH基だけでなく、疎水性の炭化水素基も水の分子ダイナミクスを遅滞化させるうえで重要や役割を担っていることがわかった。この結果は、生体保護機能に関わる水の重要性を理解するうえでは、親水性水和と疎水性水和を区別して議論する必要があることを示唆するものである。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

本年度は濃度・温度依存的に代表的な二糖水溶液の誘電分光を実施することで、トレハロースを取り巻く水に特徴的な分子挙動が現れるかを検証することを目指して研究を推進した。当初計画していた赤外分光との相関解析には到達することができなかったものの、マイクロ波帯の誘電スペクトルが反映する水分子ダイナミクスを解析したことで、トレハロースは他の二糖分子に比べてより安定な水和殻を形成していることが明らかになった。
また、二糖の生体保護機能をより本質的に理解するための試みとしてグリセリンなどのポリオールを対象とした研究を展開し、分光分析にとどまらず熱分析や密度測定を組み合わせることで、生体保護分子周辺の水の振る舞いをより包括的に理解することに挑戦した。その結果、当初の予想を遥かに上回って水の分子動態を詳細に描写することが可能になったため、次年度の研究プラットフォームを強固に確立したという点では、研究が大いに進展したと考えられる。

今後の研究の推進方策

前年度に取得した二糖水溶液の誘電分光スペクトルをさらに詳細に解析し、水和水の数やその動態、ならびに活性化エネルギーといった水和パラメーターを定量化することで、トレハロース周辺を取り巻く水の特徴を正確に言語化できるようになることを目指す。また、分光分析(マイクロ波領域の誘電分光と赤外分光)に加えて熱分析や密度測定も実施することで、二糖の中でトレハロースと水の相互作用にどのような特徴が見られるかを包括的に理解するとともに、ポリオールなどの他の生体保護分子と二糖の比較を行うことで、二糖そのものの特徴も理解することを目指す。
そのうえで最終的には、生体保護分子(二糖あるいはポリオール)と水、そしてそこにタンパク質が加わった3成分系にも研究を展開し、生命活動の根幹を担うタンパク質の活動に対して生体保護分子や水がそのように相互作用するかを明らかにすることにも挑戦する。

報告書

(2件)
  • 2023 実績報告書
  • 2022 実績報告書
  • 研究成果

    (11件)

すべて 2023 2022 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (7件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Determining changes in crystallinity of rice starch after heat-moisture treatment using terahertz spectroscopy2023

    • 著者名/発表者名
      Han Guo, Keiichiro Shiraga, Naoshi Kondo, Siyao Chen, Yoshihisa Yamashige, Yuichi Ogawa
    • 雑誌名

      Food Chemistry

      巻: 425 ページ: 136237-136237

    • DOI

      10.1016/j.foodchem.2023.136237

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Hydrogen-Bond Configurations of Hydration Water around Glycerol Investigated by HOH Bending and OH Stretching Analysis2022

    • 著者名/発表者名
      Morita Miho、Matsumura Fumiki、Shikata Toshiyuki、Ogawa Yuichi、Kondo Naoshi、Shiraga Keiichiro
    • 雑誌名

      The Journal of Physical Chemistry B

      巻: 126 号: 47 ページ: 9871-9880

    • DOI

      10.1021/acs.jpcb.2c05445

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 水の分子間伸縮振動における分光学的帰属の解明2023

    • 著者名/発表者名
      白神慧一郎, Zheng Ziwei, Chen Siyao
    • 学会等名
      第45回溶液化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Evaluation of Hydration State around Glycerol as a Humectant using Microwave Dielectric Spectroscopy2023

    • 著者名/発表者名
      N. Takeuchi, K. Shiraga, M. Morita, Y. Ogawa, N. Kondo
    • 学会等名
      15th International Congress on Agricultural Mechanization and Energy in Agriculture
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] Investigation of hydration state around proteins to elucidate the role of water in enzyme reactions2023

    • 著者名/発表者名
      M. Yamamoto, N. Kondo, Y. Ogawa, K. Shiraga
    • 学会等名
      The 61st Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 広帯域誘電分光に基づくテラヘルツ波スペクトルの理解とその応用2023

    • 著者名/発表者名
      白神慧一郎, Zheng Ziwei, Chen Siyao, 山重貴久
    • 学会等名
      シンポジウム テラヘルツ科学の最先端X
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] 酵素GlucoamylaseのMaltose分解反応に伴うバルク水量増加の実証2023

    • 著者名/発表者名
      山本瑞貴, 近藤直, 小川雄一, 白神慧一郎
    • 学会等名
      関西農業食料工学会 第151回例会
    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [学会発表] トレハロースの水和作用が加熱に伴う球状タンパク質の二次構造安定化に及ぼす影響の評価2023

    • 著者名/発表者名
      朝倉 皐,鈴木 哲仁,小川 雄一,近藤 直,白神 慧一郎
    • 学会等名
      関西農業食料工学会 第149回例会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] HOH変角振動スペクトルに着目した水素結合環境の解明2022

    • 著者名/発表者名
      白神 慧一郎,森田 美穂
    • 学会等名
      第3回 日本Aquaphotomics研究会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [備考] Research map

    • URL

      https://researchmap.jp/keishiraga

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [備考] Researchmap

    • URL

      https://researchmap.jp/keishiraga/presentations

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

URL: 

公開日: 2022-04-19   更新日: 2024-12-25  

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