| 研究課題/領域番号 |
23K23775
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| 補助金の研究課題番号 |
22H02510 (2022-2023)
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 基金 (2024)
補助金 (2022-2023) |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分42020:獣医学関連
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| 研究機関 | 帯広畜産大学 |
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研究代表者 |
福本 晋也 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 准教授 (50376422)
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| 研究分担者 |
茅野 光範 帯広畜産大学, 畜産学部, 准教授 (20590095)
相内 大吾 帯広畜産大学, グローバルアグロメディシン研究センター, 准教授 (50552783)
白水 貴大 藤田医科大学, 病態モデル先端医学研究センター, 助教 (80804608)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
17,420千円 (直接経費: 13,400千円、間接経費: 4,020千円)
2024年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2023年度: 4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2022年度: 7,540千円 (直接経費: 5,800千円、間接経費: 1,740千円)
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| キーワード | 犬糸状虫 / イヌ糸状虫 / 蚊 / ヤブカ / フィラリア |
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| 研究開始時の研究の概要 |
蚊の病原体媒介能の個体差は様々な生物学的要因・環境要因によるものと考えられてきた。申請者は実験室系統のヤブカにおいて犬糸状虫の媒 介能は遺伝的形質であることを発見したした。すなわちゲノムの比較解析により、犬糸状虫の媒介機構を解明可能なことを示す実験的証拠であ った。そこで、本申請ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を遺伝子 レベルで同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目的とする。
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| 研究実績の概要 |
本研究ではネッタイシマカのイヌ糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出するための科学的基盤を構築することを目的としている。現在までに得られた一次的な次世代シーケンサーを用いた比較ゲノム解析の結果、3カ所の表現型特異的ゲノム領域が推定された。そ こで、本申請ではゲノム解析をさらに詳細に進めることでネッタイシマカの犬糸状虫非媒介性表現型に関する責任ゲノム領域を遺伝子レベルで 同定し、犬糸状虫を媒介しない蚊を作出する ための科学的基盤を構築することを目指した。昨年度7世代まで成功した蚊の近交化を更に進め、13世代に到達することに成功した。すなわち高い精度でのゲノム解析が実施可能な状況の実現に成功した。
詳細な解析法としてバキュロウイルス発現系を用いた過剰発現系の検討を試みた。ネッタイシマカで特異的に外来遺伝子(GFP)を発現するシステムの開発に成功した。しかしながらバキュロウイルスによる毒性で蚊の生存率が大きく下がる問題が発現した。弱毒化バキュロウイルスの使用を検討したが、抜本的な改善には至らなかった。機能減衰実験系としては、大腸菌発現dsRNAを用いた機能減衰と表現型の発現に成功した。すなわち多くの遺伝子を同時に低コストでアッセイする系を入手するに至り、今後の実験スピードの進展が期待される。以上、これらの実験系を用いて、ネッタイシマカのイヌ糸状虫感染低抗性に関するメカニズムの解明に繋げていきたい。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
蚊の近交系作成は困難であり、系統樹立中にリーサルとなることが多々ありその道のりは厳しい。今年度において13世代の近交系の作成に成功し、高い解像度での解析可能な実験基盤の樹立に成功した。また、大腸菌内in vivo dsRNA発現系による遺伝子ノックダウンと表現型誘導に成功し解析基盤が大きく前進した。
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| 今後の研究の推進方策 |
今年度において作成に成功した実験材料を基盤として、特に遺伝子機能減衰型実験系での解析を進める。また遺伝子機能増強型の実験系のトライアルを行う。RNAaのフィラリアと蚊における有効性を検証する。
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