| 研究課題/領域番号 |
23K23806
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| 補助金の研究課題番号 |
22H02542 (2022-2023)
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 基金 (2024)
補助金 (2022-2023) |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分42040:実験動物学関連
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| 研究機関 | 獨協医科大学 |
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研究代表者 |
杉本 智恵 獨協医科大学, 医学部, 准教授 (60469955)
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| 研究分担者 |
若尾 宏 獨協医科大学, 医学部, 教授 (10280950)
森 一泰 獨協医科大学, 医学部, 非常勤講師 (20270655)
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| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
17,290千円 (直接経費: 13,300千円、間接経費: 3,990千円)
2025年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2024年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2023年度: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円)
2022年度: 5,330千円 (直接経費: 4,100千円、間接経費: 1,230千円)
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| キーワード | 自然免疫型T細胞 / ウイルス感染 / 呼吸器 / 感染免疫 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
粘膜関連インバリアントT細胞(MAIT細胞)はヒトの血液、粘膜組織に局在するユニークな自然免疫型T細胞である。MAIT細胞の細菌感染抑制能についてはよく研究されているが、ウイルス感染による疾患の発症や病態にどのように作用するのかは十分に明らかになっていない。本研究で はiPS細胞技術を応用したMAITマウスを用いてMAIT細胞の呼吸器ウイルス感染における役割を解明する。本研究の成果はウイルス感染防御のための新規ワクチン開発の基盤に応用可能である。
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| 研究実績の概要 |
本研究ではRSウイルスを用い、我々が構築したMAIT細胞が豊富なMAITマウスとMAIT-iPS細胞由来reMAIT細胞を使用して、ウイルス感染の病態におけるMAIT細胞の役割を解明する。当該年度はRSウイルス感染モデルを確立するため以下の項目の実験を行った。
1. RSウイルスA2株をATCCから入手し、HEp2細胞を用いてマウス接種ウイルスストックの作製を試みた。C57BL/6はRSウイルス感受性が低く、高力価のウイルス接種が必要とされる。継代培養を行なって感染力価を上げることを試みたが、C57BL/6マウス感染に十分な高力価ストックを得ることができなかった。
2. 上述の問題点が明らかとなったことから、接種ウイルスをインフルエンザウイルスPR8に変更し、MDCK細胞を用いて接種ウイルスの作製を終了した。
3. 並行して、C57BL/6よりBALB/cの方がウイルス感染感受性が高いため、BALB/c系のMAIT細胞が多い新たなマウスモデルを作製することを開始した。我々のこれまでの成果から、肺MAIT細胞がiPS細胞作製に適していることが明らかであるので、BALB/cマウスの肺からMAIT細胞を分離することを試みた。しかし、BALB/cではC57BL/6よりMAIT細胞が少ないことがわかり、 MAIT細胞を分離することが困難であった。MAIT細胞の抗原であるビタミンB2合成中間体の誘導体である5-OP-RUとToll様受容体9のリガンドであるCpGをマウスへ経鼻で混合接種することにより、肺内MAIT細胞をin vivoで増殖することに成功した。これによりMAIT細胞を分離し、BALB/c MAIT細胞由来iPS細胞を樹立することができた。このiPS細胞を用いてキメラマウスの作製を試みたが、樹立には至らなかった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
マウス実験に用いるのに十分な高力価のウイルスストックが作製できない。BALB/c MAIT細胞由来iPS細胞由来のキメラマウスが樹立できなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
接種ウイルスの種類をインフルエンザウイルスPR8に変更することにより、顕著な感染表現型示す感染モデルを樹立する。
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