| 研究課題/領域番号 |
23K24241
|
|---|
| 補助金の研究課題番号 |
22H02980 (2022-2023)
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(B)
|
| 配分区分 | 基金 (2024)
補助金 (2022-2023) |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 審査区分 |
小区分52020:神経内科学関連
|
|---|
| 研究機関 | 新潟大学 |
|---|
研究代表者 |
池内 健 新潟大学, 脳研究所, 教授 (20372469)
|
|---|
| 研究分担者 |
石黒 敬信 新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (40929634)
徳武 孝允 新潟大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (00707838)
今野 卓哉 新潟大学, 脳研究所, 助教 (20837372)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2022-04-01 – 2025-03-31
|
| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
|
| 配分額 *注記 |
17,550千円 (直接経費: 13,500千円、間接経費: 4,050千円)
2024年度: 4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2023年度: 5,070千円 (直接経費: 3,900千円、間接経費: 1,170千円)
2022年度: 7,930千円 (直接経費: 6,100千円、間接経費: 1,830千円)
|
|---|
| キーワード | ミクログリア / シグナル伝達 / 認知症 / 大脳白質 / 遺伝子変異 / 細胞移植 |
|---|
| 研究開始時の研究の概要 |
本研究課題は，脳内恒常性を保つために重要な役割を担うミクログリアの本質的な機能破綻を原因とする「一次性ミクログリア病」を対象とした研究である。ALSP/HDLSは代表的な一次性ミクログリア病であり，ミクログリアの分化および機能維持を調節する鍵分子であるCSF1R遺伝子変異を原因とする。CSF1Rシグナル伝達不全が恒常性ミクログリアの破綻を惹起し白質変性を引き起こすという仮説をもとに，患者剖検脳・試料ならびにモデルマウスを用いた多面的なアプローチを行い，ALSP/HDLSで生じる恒常性ミクログリア破綻の分子機序を明らかにする。
|
| 研究実績の概要 |
本研究課題は，脳内恒常性を保つために重要な役割を担うミクログリアの本質的な機能破綻を原因とする「一次性ミクログリア病」を対象とした研究である。ALSP (adult-onset leukoencephalopathy with spheroids and pigmented glia) / HDLS (hereditary diffuse leukoencephalopathy with spheroid) は代表的な一次性ミクログリア病であり，ミクログリアの分化および機能維持を調節する鍵分子であるCSF1受容体 (CSF1R) の遺伝子変異を原因とする。CSF1R変異がヘテロ接合体で生じると、成人発症のALSP/HDLSを発症するのに対し、CSF1R変異がホモ接合体で生じると、小児発症の白質脳症を発症する。申請者は，CSF1R変異を伴うALSP/HDLS多数例の解析により，恒常性ミクログリアの破綻が病態の鍵となることを明らかにしてきた。ALSP/HDLSに対する有効な治療法は確立しておらず、分子病態に基づいた治療法の開発が課題となっている。本研究課題は，CSF1Rシグナル伝達不全が恒常性ミクログリアの破綻を惹起し白質変性を引き起こすという仮説をもとに，患者剖検脳・試料ならびにモデル細胞を用いた多面的なアプローチを行い，ALSP/HDLSで生じる恒常性ミクログリア破綻の分子機序を明らかにする。さらにALSP/HDLSハプロ不全モデル細胞において，分子病態機序に基づいた新規治療法の効果を検証し，ALSP/HDLSの治療法開発に向けた基礎的研究を実施する。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ALSP/HDLS患者で同定されたCSF1R病的バリアントを発現するモデル細胞を樹立した。CSF1Rのリガンド依存性自己リン酸化を抗リン酸化抗体により定量し、CSF1R関連疾患の表現型との相関を検討した。その結果、CSF1R自己リン酸化とキナーゼ活性レベルが、臨床病型と相関することを明らかにした。CSF1R野生型と病的バリアントはヘテロ2量体を形成することをプルダウンアッセイにより明らかにした。シス活性によりCSF1Rのリン酸化が生じていた。ミスセンス型病的バリアントは、野生型CSF1Rに対して顕性阻害効果を示さなかった。ALSP/HDLS患者剖検脳組織からシングル核を分離し、網羅的なトランスクリプトーム解析を行うシステムを構築した。
|
| 今後の研究の推進方策 |
CSF1R病的バリアントを発現するモデル細胞を用い、CSF1Rキナーゼ活性調節剤を用いたレスキュー実験を行う。ALSP/HDLS患者由来の生体試料を採取し、ミクログリアに着目した解析を2023年度に進める。ALSP/HDLS患者剖検脳を用いたシングル核RNA-seq解析を進め、ミクログリアクラスターで生じている遺伝発現変動を明らかにする。
|
