| 研究課題/領域番号 |
23K26854
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| 補助金の研究課題番号 |
23H02161 (2023)
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 基金 (2024)
補助金 (2023) |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分38050:食品科学関連
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
中村 宜督 岡山大学, 環境生命自然科学学域, 教授 (60324381)
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| 研究分担者 |
松本 明子 佐賀大学, 医学部, 准教授 (10330979)
佐藤 あやの 岡山大学, ヘルスシステム統合科学学域, 准教授 (40303002)
中村 俊之 岡山大学, 環境生命自然科学学域, 准教授 (90706988)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2027-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
18,590千円 (直接経費: 14,300千円、間接経費: 4,290千円)
2026年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
2025年度: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2024年度: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2023年度: 6,760千円 (直接経費: 5,200千円、間接経費: 1,560千円)
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| キーワード | 食品 / 生化学 / 代謝 / アルデヒド / 遺伝子 / アルコール / ケルセチン / アセトアルデヒド / アルデヒドデヒドロゲナーゼ |
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| 研究開始時の研究の概要 |
アルデヒドデヒドロゲナーゼ2（ALDH2）の活性低下は、体内のアセトアルデヒド量を増加させるが、すべての飲酒関連疾病の発症リスクを変化させるわけではなく、寿命にも大きな影響を与えない（アルデヒドパラドックス）。一方、食品成分が生体防御応答の亢進を介して、アセトアルデヒドに対する耐性を高め、飲酒関連疾患のリスク低減に寄与する可能性がある。本研究では、ALDH2活性低下と疾病リスクとの矛盾を意味するアルデヒドパラドックスを代償的代謝リモデリングの観点から理解し、機能性食品成分による補完的な代謝リモデリング誘導によって、アルデヒドパラドックスから逃れた疾病リスクの低減を目指す。
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| 研究実績の概要 |
本申請課題では、日本人特有の遺伝的背景であるALDH2活性低下と疾病リスクとの矛盾を意味するアルデヒドパラドックスについて、代償的代謝リモデリングとアルデヒド代謝の観点から理解することを目的としている。以下に、本年度の具体的な成果を示す。
１）アルデヒドデヒドロゲナーゼ（ALDH）アイソザイムをゲノム編集で欠損させたアルコール不耐性培養肝細胞モデル（aldh2-kdおよびaldh1a1-kd）を確立した。また、これらの細胞株がアセトアルデヒドに対して高感受性であることを確認した。
２）アルデヒドの網羅的解析法を改良HPLC-DNPH（2,4-ジニトロフェニルヒドラジン）法を用いて構築し、細胞内アセトアルデヒド蓄積量を再現性良く定量できることを確認した。
３）細胞ライセイトのアセトアルデヒド分解作用を改良HPLC-DNPH法により評価することで、簡易なアセトアルデヒド特異的ALDH活性測定法を確立した。
４）ALDHアイソザイム欠損肝細胞モデルを用いて、アセトアルデヒドに対するケルセチンの保護効果を評価した。ALDH1A1欠損変異体（aldh1a1-kd）におけるケルセチンのアセトアルデヒドに対する細胞保護作用は野生型よりも有意に低下することを見出した。さらに、ケルセチンはaldh1a1-kd細胞のALDH活性を増強しなかったことから、ALDH1A1がケルセチンによる細胞保護作用に重要な役割を果たしていることを明らかにした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
令和5年度の交付申請書に記載した計画のうち、１）ALDHアイソザイム欠損の培養肝細胞モデルの確立、２）ALDHアイソザイム欠損肝細胞モデルの有用性の確認、3）改良HPLC-DNPH法を用いたアルデヒドの網羅的解析法の構築と簡易なアセトアルデヒド特異的ALDH活性測定法の確立、4）ケルセチンの細胞保護作用の分子機構の解明などの成果を得ている。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は、令和5年度に引き続き、代償的代謝リモデリング誘導において主要な役割を果たすアルデヒドに関する研究を中心に推進し、培養細胞モデルによるアルデヒドプロファイルへの影響を調査する。昨年度得られたALDH欠損変異株と野生株との差異を明確にするだけでなく、アルデヒド生成を促す培養条件での検討を行う。また、HPLC-DNPH（2,4-ジニトロフェニルヒドラジン）法の分析条件を検討し、各種アルデヒドの分析システムにグレードアップする。さらに、各種アルデヒドによる代償的代謝リモデリング誘導実験を行い、代謝酵素遺伝子発現への影響を中心に解析する。
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