| 研究課題/領域番号 |
23K27121
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| 補助金の研究課題番号 |
23H02428 (2023)
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 基金 (2024)
補助金 (2023) |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分43020:構造生物化学関連
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| 研究機関 | 国立研究開発法人理化学研究所 |
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研究代表者 |
川上 恵典 国立研究開発法人理化学研究所, 放射光科学研究センター, 研究員 (40619904)
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| 研究分担者 |
小澄 大輔 熊本大学, 産業ナノマテリアル研究所, 准教授 (70613149)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-01 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2024年度)
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| 配分額 *注記 |
19,110千円 (直接経費: 14,700千円、間接経費: 4,410千円)
2025年度: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円)
2024年度: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2023年度: 10,920千円 (直接経費: 8,400千円、間接経費: 2,520千円)
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| キーワード | 光合成 / 光捕集 / 電子顕微鏡 / 光エネルギー移動 / 色素蛋白質複合体 / 光エネルギー / クライオ電子顕微鏡 / 構造生物化学 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、好熱性シアノバクテリア由来膜表在性アンテナ複合体（Phycobilisome）および渦鞭毛藻由来膜表在性アンテナ複合体（Peridinin-Chl a protein）について、研究代表者が新たに考案した光合成試料調製法を用いてアンテナ-光化学系超複合体の単離・精製を行い、クライオ電子顕微鏡を用いた単粒子解析によってその立体構造を明らかにする。
そして、レーザー励起時間分解測定による超複合体のエネルギー移動解析、クライオ電子顕微鏡による時間分割構造解析を行うことで、アンテナ-光化学系超複合体の構造と機能を解明する。
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| 研究実績の概要 |
地球上に生息する藻類は、光エネルギーを吸収して光合成を行っている。藻類がもつフィコビリソーム（Phycobilisome, PBS）は、巨大な水溶性光捕集蛋白質複合体であり、吸収した光エネルギーを光化学系蛋白質群（光化学系I, 光化学系II）に伝達する。PBSから光化学系蛋白質群へのエネルギー伝達の仕組みは未だ詳細に明らかになっておらず、PBSの立体構造及び光化学系蛋白質群との相互作用を明らかにすることは、藻類の光捕集・エネルギー伝達の仕組みを理解する上で重要である。本研究は、PBSと光化学系蛋白質群が相互作用した光合成超複合体の立体構造をクライオ電子顕微鏡を用いた単粒子解析によって明らかにし、PBSの光捕集・伝達システムを解明することを目的としている。
２０２３年度は、好熱性シアノバクテリア由来PSIIのフェムト秒ポンプ・プローブ分光によって、PSIIにおけるエネルギー移動とそれに続く電荷分離反応の詳細を明らかにし、その研究成果が国際雑誌『Photosynthesis Research』に受理された。そして、PBS-PSIIの光誘起時間分割解析を行うための「光照射グリッド凍結装置」を制作し、従来のグリッド凍結装置（Vitrobot）では凍結操作に数秒必要とするのに対し、新たに制作した装置では閃光照射後に数十ミリ秒以内で試料を凍結、光照射による状態をトラップできる性能を得ることができた。そして、試料調製・可溶化条件の最適化により、よりインタクトなPBS-PSIIの調製が行うことができようになった。加えて、得られたPBS-PSIIのエネルギー移動解析を行い、PBSからPSIIへのエネルギー移動を確認できた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
２０２３年度は、フェムト秒ポンプ・プローブ分光によってPSII内のエネルギー移動とそれに続く電荷分離反応の詳細を明らかにし、PBS-PSII内のエネルギー移動解析と共に、PBS-PSIIの構造解析のための「光照射グリッド凍結装置」の制作を行った。そして、よりインタクトなPBS-PSIIが得られる調製条件を確立させた。これらのことから、本研究は順調に進展していると言える。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後の推進方策として、得られたPBS-PSIIのクライオ電子顕微鏡測定・解析を進めていく。そして、２０２３年度に制作した「光照射グリッド凍結装置」を用いてPBS-PSIIの光反応解析を進めていく。
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