| 研究課題/領域番号 |
23KJ1974
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| 研究種目 |
特別研究員奨励費
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 国内 |
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| 審査区分 |
小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
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| 研究機関 | 東京理科大学 |
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研究代表者 |
清水 智哉 東京理科大学, 薬学研究科, 特別研究員(DC1)
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| 研究期間 (年度) |
2023-04-25 – 2026-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2025年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
2024年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
2023年度: 600千円 (直接経費: 600千円)
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| キーワード | Wolf-Hirschhorn syndrome / iPS細胞 / 神経堤細胞 / 染色体欠失 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
染色体欠失は多様な症状を示す遺伝性疾患の原因となるが、多くの場合で染色体欠失から症状につながる発症機序が明らかとなっていない。本研究では染色体欠失症候群の中から4p欠失症候群（Wolf-Hirschhorn Syndrome）および22q11.2欠失症候群（DiGeorge Syndrome）に着目する。各症候群で多様な症状が存在するが、共通して特徴的顔貌がみられる。これらの頭蓋顔面領域における症状は神経堤細胞の異常に起因する。
本研究は各症候群患者の体細胞からiPS細胞を作製し、神経堤細胞へ分化させ病態モデルを確立する。また、この病態モデルから発症機序の解明および新規治療標的分子の探索を行う。
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| 研究実績の概要 |
WHS患者由来iPS細胞から誘導した神経堤細胞の分化能を評価するべく、骨芽細胞、軟骨細胞それぞれに対する分化実験を実施した。骨芽細胞分化に関してはアリザリンレッド染色によって評価した。同様の条件で誘導した健常人由来サンプルと比較して、特徴的な違いは見られなかった。軟骨細胞分化に関しては、アルシアンブルー染色により評価した。健常人由来サンプルと比較して、患者由来サンプルで形態的な異常が確認された。
次にWHS患者由来iPS細胞から誘導した神経堤細胞の遊走能を評価するべく、創傷治癒実験を実施した。同様の条件で誘導した健常人由来サンプルと比較して、患者サンプルで遊走能の上昇傾向がみられた。これらの神経堤細胞の分化能および遊走能の異常が患者でみられる頭蓋顔面領域の発達異常に関与していると考えられる。
次年度はこれらの病態モデルから、責任遺伝子の同定および発症メカニズムを解明するべく、遺伝子発現解析を実施する予定である。また同様の実験をDGS患者由来iPS細胞でも実施し、疾患特異的な異常表現型がみられるか検証する。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
上記の通り、WHS患者由来iPS細胞から神経堤細胞を誘導し健常人由来サンプルと比較解析を行うことで、病態モデルを確立した。DGS患者由来iPS細胞に関しては、病態モデル確立に向け現在同様の実験を開始した。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後は発症メカニズムを解明するべく遺伝子発現解析を実施する予定である。WHSおよびDGSの欠失領域にはそれぞれ転写制御因子が含まれているため、下流の遺伝子発現に異常をきたすと予想される。神経堤細胞で病態に関与する患者特異的な遺伝子発現異常を同定するためにRNA-seqを行う。またRNA-seqの結果から欠失領域内の遺伝子で実際に発現が変動する遺伝子を同定し、それらの遺伝子を候補原因遺伝子とする。さらに患者由来iPS細胞における候補原因遺伝子の過剰発現株を作製し、患者神経堤細胞の表現型を回復させる遺伝子を探索する。
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