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変異能力を有した培養B細胞株の機能拡張と抗体工学的活用

研究課題

研究課題/領域番号 24360343
研究種目

基盤研究(B)

配分区分一部基金
応募区分一般
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関岡山大学

研究代表者

金山 直樹  岡山大学, 自然科学研究科, 准教授 (70304334)

連携研究者 曲 正樹  岡山大学, 大学院自然科学研究科, 助教 (50359882)
研究期間 (年度) 2012-04-01 – 2015-03-31
研究課題ステータス 完了 (2014年度)
配分額 *注記
12,480千円 (直接経費: 9,600千円、間接経費: 2,880千円)
2014年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
2013年度: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2012年度: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
キーワード抗体 / 体細胞高頻度突然変異 / DT40 / 親和性成熟 / タンパク質ディスプレー / 細胞工学 / AID / 抗体工学 / 変異
研究成果の概要

抗体は次世代の分子標的医薬として注目されており、一本鎖抗体などの改変型抗体の利用も進みつつある。我々は、これまでに変異能力を有するニワトリB細胞株DT40を利用してin vitro抗体作製システムを構築した。本研究では、他の抗体作製技術で取得された任意のモノクローナル抗体の可変部や一本鎖抗体を、ヒトIgG1抗体定常部とのキメラ抗体としてDT40細胞表面に発現させることができ、かつ、DT40の変異能力によって親和性成熟できる革新的な動物細胞ディスプレーシステムを構築した。本研究の成果は、医薬候補となりうる活性を有した抗体を創出するための技術として有用であると考えられる。

報告書

(4件)
  • 2014 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2013 実績報告書
  • 2012 実績報告書
  • 研究成果

    (20件)

すべて 2014 2012 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (15件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] CSF-1 receptor-mediated differentiation of a new type of monocytic cell with B cell-stimulating activity: its selective dependence on IL-34.2014

    • 著者名/発表者名
      Fumihiro Yamane
    • 雑誌名

      J Leukoc Biol

      巻: 95 号: 1 ページ: 19-31

    • DOI

      10.1189/jlb.0613311

    • 関連する報告書
      2014 実績報告書 2013 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] la vitro substrate phosphorylation by Cg^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase kinase using guanosine-5' -triphosphate as a phosphate donor2012

    • 著者名/発表者名
      S. Yurimoto, et al.
    • 雑誌名

      BMC Biochemistry

      巻: 13 号: 1 ページ: 27-27

    • DOI

      10.1186/1471-2091-13-27

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 胚中心におけるB細胞のnegative selection と濾胞樹状細胞2012

    • 著者名/発表者名
      曲正樹
    • 雑誌名

      臨床免疫・アレルギー科

      巻: 58 ページ: 259-265

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [雑誌論文] 抗体遺伝子への突然変異能を有するニワトリB細胞株の機能拡張によるin vitroモノクローナル抗体作製・改良システム2012

    • 著者名/発表者名
      金山直樹
    • 雑誌名

      細胞工学

      巻: 31 ページ: 1159-1165

    • NAID

      40019445284

    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 抗原レセプターシグナル依存性アポトーシス因子を抑制したニワトリB細胞株を用いた高親和性抗体の作製2014

    • 著者名/発表者名
      古賀 舞, 池田 美香, 小嶋 宏侑, 曲 正樹, 徳光 浩, 大森 斉, 金山 直樹
    • 学会等名
      第37回日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      パシフィコ横浜
    • 年月日
      2014-11-25
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 変異能力を備えた B 細胞株を用いた抗体の機能改変2014

    • 著者名/発表者名
      金山 直樹 , 渡邊 康二 , 古賀 舞 , 川上 夏奈江 , 植月 英智 , 徳光 浩 , 曲 正樹 , 大森 斉
    • 学会等名
      第66回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター
    • 年月日
      2014-09-11
    • 関連する報告書
      2014 実績報告書
  • [学会発表] 抗体遺伝子への突然変異能を有するニワトリB細胞株の抗体工学的応用による抗体機能改変2012

    • 著者名/発表者名
      金山直樹
    • 学会等名
      第35回 日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      2012-12-14
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] DT40細胞株を用いたin vitro抗体作製システムにおける,抗原レセプターの刺激に依存した生存による抗原特異的抗体産生細胞の選択法の開発2012

    • 著者名/発表者名
      渡邊康二
    • 学会等名
      第35回 日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場
    • 年月日
      2012-12-14
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] スプライシング因子SRSF1のアイソフォームSRSF1-3は,R-loopを形成することでlgV高頻度突然変異を誘導する2012

    • 著者名/発表者名
      川口祐加
    • 学会等名
      第35回 日本分子生物学会年会
    • 発表場所
      神戸国際会議場
    • 年月日
      2012-12-11
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] A splicing isoform of the splicing factor SRSF1, SRSF1-3, has role in R-loop formation in IgV hypermutation.2012

    • 著者名/発表者名
      Kanayama Naoki
    • 学会等名
      2012 日本免疫学会総会・学術集会
    • 発表場所
      神戸国際会議場
    • 年月日
      2012-12-05
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] ヒト型抗体産生ニワトリB細胞株DT40を用いた抗原特異的抗体の作製2012

    • 著者名/発表者名
      川上夏奈江
    • 学会等名
      第64回 日本生物工学会大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場
    • 年月日
      2012-10-26
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] 変異能力を有する培養B細胞株DT40を用いた新規なタンパク質ディスプレーシステムの開発2012

    • 著者名/発表者名
      日笠卓哉
    • 学会等名
      第64回 日本生物工学会大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場
    • 年月日
      2012-10-26
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] ニワトリB細胞株DT40-SWを用いた異種抗体改良システムの構築2012

    • 著者名/発表者名
      佐井燕
    • 学会等名
      第64回 日本生物工学会大会
    • 発表場所
      神戸国際会議場
    • 年月日
      2012-10-26
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書
  • [学会発表] B 細胞抗原レセプター依存性アポトーシスの制御によるニワトリB 細胞株DT40-SW を用いた高親和性抗体の作製

    • 著者名/発表者名
      古賀 舞
    • 学会等名
      日本生物工学会
    • 発表場所
      広島国際会議場(広島市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 変異能力を有するB 細胞株DT40-SW を用いたタンパク質ディスプレーシステムにおけるタンパク質進化

    • 著者名/発表者名
      渡邊 康二
    • 学会等名
      日本生物工学会
    • 発表場所
      広島国際会議場(広島市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] ヒト抗体産生型ニワトリB細胞株を用いた異種抗体改良システムによる抗血小板ヒトモノクローナル抗体の親和性成熟

    • 著者名/発表者名
      川上 夏奈江
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸国際会議場(神戸市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] 変異能力を内包する新規な動物細胞ディスプレーシステムによる単一ドメイン抗体の親和性成熟

    • 著者名/発表者名
      植月 英智
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      神戸国際会議場(神戸市)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] AID-dependent IgV hypermutation requires a splice isoform of the SR protein SRSF1

    • 著者名/発表者名
      金山直樹
    • 学会等名
      15th International Congress of Immunology
    • 発表場所
      ミラノ国際展示場(ミラノ,イタリア)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [学会発表] Follicular dendritic cells induce a new class of myeloid cells with unique B cell stimulating activities: specific dependence on IL-34/CSF-1R signaling pathway

    • 著者名/発表者名
      山根文寛
    • 学会等名
      15th International Congress of Immunology
    • 発表場所
      ミラノ国際展示場(ミラノ,イタリア)
    • 関連する報告書
      2013 実績報告書
  • [図書] 次世代抗体医薬開発に向けた抗体工学の最前線 監修 : 熊谷泉第13章 ニワトリ抗体ライブラリーからの高親和性抗体の作製2012

    • 著者名/発表者名
      金山直樹
    • 総ページ数
      9
    • 出版者
      シーエムシー出版
    • 関連する報告書
      2012 実績報告書

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公開日: 2012-04-24   更新日: 2019-07-29  

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