器官培養法を用いたヒトｉｎ ｖｉｔｒｏ精子形成法の開発

• 研究課題/領域番号: 24390371
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 一部基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 泌尿器科学
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 小川 毅彦 横浜市立大学, 生命医科学研究科, 教授 (50254222)
• 連携研究者: 佐藤 卓也 横浜市立大学, 生命医科学研究科, 特任助教 (70599505)
• 研究期間 (年度): 2012-04-01 – 2015-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2014年度)
• 配分額: 17,940千円 (直接経費: 13,800千円、間接経費: 4,140千円); 2014年度: 7,540千円 (直接経費: 5,800千円、間接経費: 1,740千円); 2013年度: 7,410千円 (直接経費: 5,700千円、間接経費: 1,710千円); 2012年度: 2,990千円 (直接経費: 2,300千円、間接経費: 690千円)
• キーワード: 精子形成 / 器官培養 / 男性不妊症

研究成果の概要

私たちは2011年にマウス精子形成を体外で進行させ、精子産生に成功した。本研究において、その培養法と培養条件をヒト精巣組織に応用したが、これまでヒト精子形成の進行は確認できていない。そこで培養法・培養条件の根本的な見直し作業を行った。それらの結果、現在ではマウス精子形成誘導に必要な多くの因子が明らかになってきた。またマイクロ流体システムを導入したことで、いままでは2か月が限界であったマウス精子形成を、6か月以上に亘って維持することに成功した。引き続き培養条件の改良を継続することにより、ヒトin vitro精子形成を達成したい。

研究成果

• [雑誌論文] Genome editing in mouse spermatogonial stem cell lines using TALEN and double-nicking CRISPR/Cas9 (2015)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Sakuma T, Yokonishi T, Katagiri K, Kamimura S, Ogonuki N, Ogura A, Yamamoto T, Ogawa T
  • 雑誌名: Stem Cell Reports 巻: ４ ページ: 1-1
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Offspring production with sperm grown in vitro from cryopreserved testis tissues (2014)
  • 著者名/発表者名: Yokonishi T, Sato T, Komeya M, Katagiri K, Kubota Y, Nakabayashi K, Hata K, Inoue K, Ogonuki N, Ogura A, Ogawa T
  • 雑誌名: Nature Communications 巻: 5 号: 1 ページ: 4320-4320
  • DOI: 10.1038/ncomms5320
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] 精子幹細胞 (2014)
  • 著者名/発表者名: 古目谷 暢、小川毅彦
  • 雑誌名: Hormone Frontier in Gynecology 巻: 21 ページ: 131-136
• [雑誌論文] 精子幹細胞と精子形成：ex vivo cultureの可能性 (2014)
  • 著者名/発表者名: 佐藤卓也、横西哲広、小川毅彦
  • 雑誌名: 実験医学 巻: 32 ページ: 859-864
• [雑誌論文] 精巣組織の凍結保存 (2014)
  • 著者名/発表者名: 横西哲弘、小川毅彦
  • 雑誌名: 臨床産婦人科 巻: 68 ページ: 54-63
• [雑誌論文] In vitro sperm production from mouse spermatogonial stem cell lines using an organ culture method. (2013)
  • 著者名/発表者名: Sato T, Katagiri K, Kubota Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Nature Protocol 巻: 8 号: 11 ページ: 2098-2104
  • DOI: 10.1038/nprot.2013.138
  • 査読あり
• [雑誌論文] In Vitro Reconstruction of Mouse Seminiferous Tubules Supporting Germ Cell Differentiation. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yokonishi T, Sato T, Katagiri K, Komeya M, Kubota Y, Ogawa T
  • 雑誌名: Biology of Reproduction 巻: 89 号: 1 ページ: 15-15
  • DOI: 10.1095/biolreprod.113.108613
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vitro spermatogenesis using an organ culture technique. (2013)
  • 著者名/発表者名: Yokonishi T, Sato T, Katagiri K, Qgawa T
  • 雑誌名: Methods Mol Biol. 巻: 927 ページ: 479-488
• [雑誌論文] Testis tissue explantation cures spermatogenic failure in c-Kit ligand mutant mice (2012)
  • 著者名/発表者名: T.Sato, T.Yokonishi, M.Komeya, K.Katagiri, Y.Kubota, S.Matoba, N.Ogonuki, A.Ogura, S.Yoshida and T.Ogawa
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 巻: 109 号: 42 ページ: 16934-16938
  • DOI: 10.1073/pnas.1211845109
  • 査読あり
• [学会発表] In Vitro Spermatogenesis using Organ Culture Systems (2015)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: IFFS/JSRM
  • 発表場所: パシフィコ横浜（神奈川県横浜市）
  • 年月日: 2015-04-29
  • 招待講演
• [学会発表] ex vivo cultureによる体外精子形成 (2015)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第10回日本生殖再生医学会
  • 発表場所: 京都メルパルク（京都府京都市）
  • 年月日: 2015-03-22
  • 招待講演
• [学会発表] in vitro spermatogenesis in explanted adult mouse testis tissues (2014)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: Gordon Research Conference, Mammalian Reproduction
  • 発表場所: Colby Sawyer College, USA
  • 年月日: 2014-08-10 – 2014-08-16
• [学会発表] 精子幹細胞の器官培養法による精子形成 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第32回日本受精着床学会総会・学術講演会 シンポジウム
  • 発表場所: ハイアットリージェンシー東京（東京都）
  • 年月日: 2014-08-01
  • 招待講演
• [学会発表] 器官培養法によるin vitro精子形成：展望と課題 (2014)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第33回日本アンドロロジー学会
  • 発表場所: 軽井沢プリンスホテル（長野県）
  • 年月日: 2014-06-13
  • 招待講演
• [学会発表] 培養下での精巣組織再構成の試み (2013)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第90回 日本生理学会大会
  • 発表場所: タワーホール船堀(東京都)(招待講演)
  • 年月日: 2013-03-29
• [学会発表] in vitro reconstruction of functional testicular tissues supporting spermatogenesis (2013)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: 日本再生医療学会 Johnson & Johnson Innovation Award 受賞講演
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)(招待講演)
  • 年月日: 2013-03-22
• [学会発表] In vitro spermatogenesis using an organ culture method. (2013)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: 10^<th> International Congress of Andrology
  • 発表場所: Melbourne, Australia(招待講演)
  • 年月日: 2013-02-25
• [学会発表] in vitroにおける精子形成 (2013)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 日本生殖医学会
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • 招待講演
• [学会発表] in vitro spermatogenesis using an organ culture system (2013)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: The 9th Conference of the Pacific Rim Society for Fertility and Sterility
  • 発表場所: 神戸国際会議場（兵庫県神戸市）
  • 招待講演
• [学会発表] In vitro maturation of sperm (2013)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: 59th Annual meeting of Canadian Fertility and Andrology Society
  • 発表場所: Victoria, Canada
  • 招待講演
• [学会発表] Induction of spermatogenesis in testis of c-Kit ligand mutant spermatogenic failure mice using Organ Culture method (2012)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第63回 韓国生殖医学会
  • 発表場所: 韓国, ソウル(招待講演)
  • 年月日: 2012-12-01
• [学会発表] 精巣組織培養法は無精子症を治療できるか (2012)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 日本生殖医学会学術講演会シンポジウム2
  • 発表場所: 長崎ブリックホール(長崎県)(招待講演)
  • 年月日: 2012-11-08
• [学会発表] In vitro spermatogenesis using an organ culture method. (2012)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: Meeting GDRI "Mammalian Meiosis Network"
  • 発表場所: Nice, France.(招待講演)
  • 年月日: 2012-10-11
• [学会発表] 精子幹細胞からの培養下精子形成 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 日本受精着床学会シンポジウム
  • 発表場所: 大阪国際会議場(大阪府)(招待講演)
  • 年月日: 2012-08-30
• [学会発表] Testicular tissue culturing inducing complete spermatogenesis (2012)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 学会等名: The 7^<th> AUA/JUA international affiliate society meeting
  • 発表場所: 米国, アトランタ(招待講演)
  • 年月日: 2012-05-20
• [学会発表] In vitro精子形成法の開発と不妊症診療への応用の可能性 (2012)
  • 著者名/発表者名: 小川毅彦
  • 学会等名: 第100 回日本泌尿器科学会総会シンポジウム2
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川県)(招待講演)
  • 年月日: 2012-04-22
• [図書] In vitro production of functional sperm from neonatal mouse testes, Chapter 4 in "Stem Cells in Reproductive Medicine, 3rd edition" (2013)
  • 著者名/発表者名: Takehiko Ogawa
  • 総ページ数: 187
  • 出版者: CAMBRIDGE UNIVERSITY PRESS
• [備考] 生殖再生医学・小川毅彦 研究室
  • URL: http://www.tsurumi.yokohama-cu.ac.jp/proteome/ogawa/index.html
• [備考] 生殖再生医学・小川毅彦 研究室
  • URL: http://www.tsurumi.yokohama-cu.ac.jp/proteome/ogawa/index.html